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[期刊] 西南农业学报
[作者]
周士家 孙正海 李丽萍
【目的】从具有优良性状的植物中分离具有相应功能的内生菌，并将其转接到自身或其它植物中，已成为植物内生菌开发应用的重要研究方向。分离鉴定喀西茄（Solanum aculeatissimum）根茎叶内生真菌，筛选具有促生功能的内生真菌并通过转接其他植物进一步验证其促生功能，以期为喀西茄内生真菌的开发应用提供理论基础。【方法】以喀西茄根茎叶为研究对象，分离并鉴定其内生真菌；测定菌株的溶磷、解钾、固氮、产铁载体、产吲哚乙酸（IAA）等促生能力；通过接种紫花苜蓿并测定种子萌发和幼苗形态指标，进一步验证喀西茄内生真菌的促生功能。【结果】本研究共分离得到27株内生真菌，茎中分离得到13株，根中分离得到9株，叶片中分离5株。分离得到的内生真菌来自11个属，优势属为间座壳属（Diaporthe）和镰刀菌属（Fusarium）。促生功能验证发现20株真菌具有产IAA能力，21株真菌具有固氮能力，2株具有产铁载体能力，1株有解钾能力，9株具有溶磷能力。转接紫花苜蓿后有3株（J12：Trichoderma simmonsii、G5：Penicillium ochrochloron和J4：Alternaria alstroemeriae）具有促生功能的菌株在紫花苜蓿种子萌发时能显著提高萌发指标，在盆栽时期仅菌株J12和J4能显著提高紫花苜蓿的生长指标。【结论】首次进行了喀西茄内生真菌的分离及鉴定，从喀西茄根、茎、叶中共分离得到27株内生真菌，茎部位分离得到的内生真菌最多。分离并鉴定了具有促生功能的内生真菌，并成功转接紫花苜蓿，通过其种子萌发和幼苗生长指标验证了内生真菌的促生功能。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
谢玲 张雯龙 蓝桃菊 陈艳露 覃丽萍 NARISAWA Kazuhiko 刘斌
从不同植物的茎和叶中分离获得２０４株真菌，通过对白菜的致病性测定筛选获得１株能显著促进白菜生长的内生真菌菌株２４Ｌ－４。结合形态学特征观察进行ＩＴＳ－ｒ ＤＮＡ和１８Ｓ－ｒ ＤＮＡ序列分析，对其进行鉴定，确定为ＤｅｖｒＩｅＳＩＡ ＬＡｇｅｒＳＴｒｏｅｍ。该菌株对铁皮石斛组培苗的株高、叶宽、茎径和干质量分别较未接种对照处理增加３３．３％、６５．７％、２７．３％和４５．１％，显著高于对照处理。同时，盆栽试验表明：Ｄ．ＬＡｇｅｒＳＴｒｏｅｍ铁皮石斛盆栽苗的茎径、鲜质量和干质量分别较无接种对照增加１０４．０％、８３．９％和１１４．７％，显著高于对照处理。显微镜观察发现：Ｄ．ＬＡｇｅｒＳＴｒｏｅｍ可定殖．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
罗永兰 张志元 冉国华
自2002—2004年,对广东梅州、重庆北碚、湖南石门的不同种类的柑橘(柑、橙、柚)进行了12次定点取样分离,共分离到柑橘内生真菌5642株,其中有5136株已鉴定,分别属于24个属.在这24个属中,出现频率在1%以上的只有Colletotrichumspp.,Fusariumspp.,Alternariaspp.,Penicilliumspp..柑橘内生真菌的静息部位依种类而异,Colletrichumspp.主要分布在柑橘的叶片、枝条、果皮内;Fusariumspp.则主要分布在根中.
关键词：
植物内生菌 柑橘 柑橘内生真菌
[期刊] 西南农业学报
[作者]
宋利沙 蒋妮 蓝祖栽 张占江
【目的】分析药用植物肿节风的内生真菌多样性,筛选具有较强抗菌活性的菌株,为寻找新的抗菌药物资源打下基础。【方法】采用平板对峙法从肿节风的不同组织中分离出具有抗菌活性的内生真菌,结合形态特征和ITS序列对其进行种类鉴定,筛选出抗菌活性强的内生真菌菌株。【结果】从肿节风的不同组织中分离、纯化得到111株内生真菌,选择42株不同形态类型的菌株进行分子鉴定,分属于9目20属28种。筛选出抗菌活性强的RJ-1和JJ-1菌株[分别鉴定为橡胶生拟茎点霉菌(Phomopsis heveicola)和新壳梭孢菌(Neofusicoccum parvum)],对15种病原真菌具有较强的抑制作用,其中对三七灰霉病菌(Botrytis sp.)、三七根腐病菌(Fusarium solani)、三七炭疽病菌(Colltetorrichum gloeosporioides)、香蕉炭疽病菌(Colltetorrichum sp.)、艾纳香褐斑病菌(Phoma sp.)、苦玄参叶斑病菌(Alternaria sp.)和肿节风炭疽病菌(Colletotrichum dematium)等7种病原菌的抑制率均在80%以上,具有强的抑菌广谱性。【结论】肿节风存在丰富的内生真菌,其中的RJ-1和JJ-1菌株对15种病原真菌具有较强的抑制作用,可作为抗菌活性菌株开展深入研究。
关键词：
肿节风 内生真菌 抗菌活性 鉴定
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
兰楠 祁高富 喻子牛 赵秀云
从油菜幼苗中通过PDA培养基分离出9株内生真菌,通过形态观察和18S rRNA基因序列分析,其中6株鉴定为链格孢菌(Alternaria alternata),1株鉴定为球毛壳菌(Chaetomium globosum),1株属于镰刀菌属(Fusarium),1株属于炭角菌目(Xylariales)。从鉴定出的油菜内生真菌中,筛选出1株有抑菌活性的生防真菌——球毛壳菌(Chaetomium globosum)YY-11,此菌株对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、油菜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王涛
【目的】三蕊兰（Neuwiedia singapureana）为兰科拟兰亚科（Apostasioideae）三蕊兰属（Neuwiedia）植物，是兰科中最原始的类群之一。开展三蕊兰可培养内生真菌多样性及其促生潜能研究，可为发掘海南地区三蕊兰内生真菌资源提供科学依据。【方法】以分布于海南吊罗山自然保护区野生三蕊兰为材料，通过分离培养，结合ITS测序及分析开展三蕊兰根内可培养真菌分离鉴定，并对其溶磷能力进行检测。将分离获得的内生真菌与铁皮石斛（Dendrobium officinale）和多花脆兰（Acampe rigida）原球茎进行共培养，检测其对2种兰科植物生长的影响。【结果】在光学显微镜下可明显观察到三蕊兰根细胞内分布的真菌菌丝。共获得三蕊兰根内生真菌24个OTUs，分属于9科14属，木霉属（Trichoderma）真菌分离概率最高；Nectriaceae科5个属(如Cylindrocarpon和Gliocephalotrichum等)真菌分离率次之。其中5株内生真菌具有不同程度的溶磷能力，为Apiotrichum sp.（Neu242），Cylindrocarpon spp.（Neu83和Neu154），Gliocladiopsis sp.（Neu245），和Mucor sp.（Neu123）属真菌。菌株Mucor sp. Neu123和Apiotrichum sp. Neu242对铁皮石斛和多花脆兰幼苗生长具有显著促进作用。【结论】三蕊兰根内具有丰富的可培养内生真菌，筛选鉴定出具溶磷能力的兰科促生真菌，可为兰科植物的人工繁育提供促生菌株资源，也为兰科菌根共生磷营养机制研究奠定基础。
关键词：
三蕊兰 内生真菌 溶磷真菌 促生
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
余永涛 王建华 赵清梅 李海利 宋毓民 王妍 张志敏 崔忠华 耿果霞 李勤凡
【目的】确定甘肃棘豆中是否存在产生苦马豆素(SW)的内生真菌。【方法】对甘肃棘豆的内生真菌进行分离,应用薄层色谱法和气相色谱-甲基化--αD-甘露糖苷内标法分别对菌丝中SW进行检测,筛选可生成SW的疯草内生真菌;通过形态学观察,应用聚合酶链反应对5.8S rDNA-ITS序列进行扩增,并对扩增序列进行分析,构建系统发育树,对其进行种属分类。【结果】筛选出1种可以产生SW的甘肃棘豆内生真菌FEL3,气相色谱内标法测得其菌丝中SW含量为400.52μg/g。根据形态学、5.8S rDNA-ITS序列分析结果和文献报道,确定FEL3为埃里格孢属真菌。【结论】甘肃棘豆中存在生成SW的内生真菌Embel...
关键词：
甘肃棘豆 苦马豆素 内生真菌 埃里格孢属
[期刊] 中国农业科学
[作者]
余永涛 何生虎 赵清梅
【目的】从宁夏野生苦豆子中分离内生真菌,筛选能够产生苦参碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱或槐定碱4种喹诺里西啶类生物碱的内生真菌。【方法】应用光学显微镜和扫描电子显微镜对分离菌株显微形态进行观察,根据形态对各菌株进行初步分类;应用薄层色谱法、气相色谱-质谱联用法和酸性染料比色法检测各分离菌株的生物碱成分。对能够产生生物碱的真菌ITS和SSU rDNA序列进行扩增和测序,根据序列信息进行同源性比较和系统发育树构建;结合形态特征,对其进行种属分类。【结果】从苦豆子中共分离到27株真菌,其中23株分属于青霉属、曲霉属、链格孢属、镰刀菌属、Simplicillium属真菌,4株为不产孢菌;筛选出E1、E3和...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
贾方芳 方玉鹏 孟娜 石文立 王妍 李勤凡
【目的】探索鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)中是否存在产槲皮素的内生真菌。【方法】采用组织块法对鱼腥草内生真菌进行分离培养,分离纯化后收集菌丝利用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)检测其代谢产物中的槲皮素,并分析其产量。采用形态学和内部转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列分析鉴定产槲皮素的内生真菌。【结果】从鱼腥草不同部位共分离得到9株内生真菌,其中由根中分离得到的菌株YXC-G1具有产生槲皮素的能力,为笋顶孢属(Acrostalagmus sp.)真菌,菌丝中槲皮素的含量为8.296 mg/g。【结论】从鱼腥草根部分离到1株产槲皮素的内生真菌YXC-G1,其可作为生产槲皮素的备选菌株。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
何璐 肖淑琴 关鑫 贺鹏飞 殷志鹏
采用组织分离法从孜然种子中分离纯化出内生真菌ZR-003菌株,并通过形态学观察和ITS序列分析方法确定其种属。采用平板测定法研究了该菌株对19种常见农业致病真菌的抑制作用,ZR-003菌株发酵液经过滤、离心和萃取,旋转蒸干之后利用GC方法对其代谢产物进行分析。研究结果表明:ZR-003菌落絮状、白色、具不明显的放射状沟纹,分生孢子结构稀少,其菌丝帚状结构明显散开,瓶梗形状和菌落特征应属于散枝亚组微紫青霉系中颜色较淡的类群;经分子生物学鉴定,ZR-003菌株的ITS序列与微紫青霉(Penicillium janthinellum)的相似性为99%,属微紫青霉菌;同时确定其对香蕉灰纹病菌[Cordana musae (Zimm.)Hohn.]、稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)、苹果斑点落叶病菌(Alternaria alternaria f.sp mali)、小麦根腐病菌[Bipolaris sorokiniana(Sacc.)Shoemakey]、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)都具有非常良好的抑制作用,其抑菌率分别为80.00%、81.82%、80.95%、80.00%和80.49%,其中对稻曲病菌的抑菌作用最好。经GC、UV分析可知,ZR-003菌株发酵液提取物在保留时间17.1789min处有明显出峰,其在328nm(λ),20(ε);280nm(λ),1500(ε);244nm(λ),15000(ε)下有明显吸收,与标准样品枯茗醛的色谱光谱特征一致,经计算得到其在发酵液中含量为28.7μg·mL-1,综上可见,孜然内生真菌ZR-003菌株发酵液中含有与孜然相同的药用成分—枯茗醛,从而为枯茗醛的获得开辟了新的微生物来源。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
袁理春 赵琪 张克华 杨顺林 瞿文林 张明忠 金杰 何璐 陈新云 范源洪
从能源植物麻疯树的根部凸起部分韧皮部、木质部中分离到内生真菌42株,应用PCR技术对分离菌rDNA的内转录间隔区(ITS区)基因克隆后测序,并将所测序列提交到欧洲分子生物学实验室核酸数据库(European Molecular Biology Laboratory Gen-bank),通过Blast程序将该序列与数据库已有的序列进行分析比较。结果表明,42个菌株分别与Genbank中的拟盘多毛孢菌属Pestalotiopsis、头孢霉属Cephalosporium、枝顶霉孢霉属Acremonium、镰孢霉菌Fusarium、木霉属Trichoderma、毛霉属Mucor、青霉属Penicill...
关键词：
麻疯树 内生真菌 分离 鉴定
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
邵登科 吕正阳 李望豪 周瑞鹏 赖泽成 张春源 樊改丽 王荣波 林占熺 鲁国东 叶文雨
通过研磨组织、稀释分离等方法，从巨菌草的健康叶片中分离、筛选出1株具有溶磷和分泌吲哚乙酸能力的内生细菌，命名为FJU3,并对其生理生化特性、16S rDNA序列进行测定和分子生物学鉴定，也研究了其对盆栽玉米的促生效果.结果表明：菌株FJU3具有一定的溶磷能力，其分泌吲哚乙酸的质量浓度达到了14.2 mg·L~(-1),且显著高于其他菌株；经形态特征和分子生物学鉴定该菌株为解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus);菌株FJU3在产铁载体、接触酶、解硅酸盐等生理生化特性试验中均为阳性反应；玉米盆栽促生试验结果表明，促生效果比较显著的是地上部鲜质量和株高，与对照组相比，分别增加了76%和41%.
关键词：
巨菌草 内生细菌 生理生化特性 促生效果
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王永 纪燕玲 王晗 陈永敢 王志伟
调查我国7省12个不同地区的禾本科植物内生真菌,经分离、培养后鉴定得到2种Epichlo属和4种Neotyphodium属内生真菌。采用改良的QS(improved quick and safe,IQS)法进行禾本科植物内生真菌基因组DNA的提取,并通过PCR进行验证。以生长在平板上的菌丝为起始材料,仪器要求简单、操作简便,快速安全、省时省力,整个提取过程大约40 min。该方法和常规SDS法相比,时间缩短到2周,为原来的1/4。以IQS法提取的DNA为模板,检测禾本科植物内生真菌中的NRPS基因,并在NCBI上进行比对分析,发现与已有的NRPS基因高度相似。这种快速提取法所获得的基因组DN...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张晨炜 纪燕玲 杨守玲 亢燕 王志伟
在我国吉林省长春市3个采样点共采集96株鹅观草属植物样品,经鉴定为犬草(Roegneria canina)。通过检测,样品中内生真菌的含菌率高达67.7%。分离得到5个菌株并对它们进行形态学特征调查,分离菌株呈典型的Neotyphodium属真菌特征。选择菌株Rjl7101和Rjl7104,利用tefA和tubB基因片段进行系统发育分析,结果表明分离菌株与Neotyphodiumsinicum聚为一枝。根据以上结果,确定分离菌株为N.sinicum。这是首次在犬草中发现N.sinicum,也扩大了N.sinicum在我国的分布地区范围,进一步说明我国拥有极为丰富的内生真菌资源且分布广泛。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张晓丽 赵建宇 孟祥坤 范玲超
为筛选具有良好生防效果和生产应用价值的番茄内生菌菌株,从番茄植株内部分离得到一株对番茄灰霉病病原菌具有较高拮抗效果的内生细菌JZ3。通过菌株形态学特征比较、16S r DNA序列和gyr B基因序列系统进化分析,结果显示JZ3为解淀粉芽孢杆菌。室内生测结果表明,浓度为5×107cfu/m L的JZ3液体悬浮剂对番茄灰霉病的预防效果可达82.04%,治疗效果约为30.54%。检测JZ3对高温高盐耐受性,结果 JZ3在高盐环境中的存活率可达70%,105℃高温高盐条件下处理15 min存活率仍可达56%左右。
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