【目的】探究咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester,CAPE）通过AMPK/FOXO3a信号通路缓解氧化应激对猪精液的影响及其分子机制。【方法】选取8头成年（1—2岁）、健康状况良好长白种公猪进行鲜精采集，将质检合格的样品混池待用。试验设计如下：首先，在常温基础稀释液中分别添加0、0.02、0.04、0.06、0.08和0.10 g·L~(-1)浓度的CAPE，将精液样品与各个浓度组依次混合后放置室温平衡，随即转入17℃电子恒温冰箱进行常温保存。全自动精子分析仪（CASA）测定1—5 d精子运动学参数（总活率与渐进性活力），筛选出最佳适宜浓度为0.06 g·L~(-1)。其次，将0.06 g·L~(-1) CAPE与400μmol·L~(-1)的H_2O_2建立氧化胁迫模型，在第1、3、5天分别采用CASA测定精子总活率与渐进性活力，荧光探针技术评估质膜完整性与顶体完整性，抗氧化试剂盒检测过氧化氢酶（catalase,CAT）与超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性，在第5天利用实时荧光定量PCR技术测定AMPK/FOXO3a信号通路下游靶向基因（AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT）及凋亡基因BAX的mRNA表达水平，蛋白免疫印记技术测定AMPK、p-AMPK蛋白表达。【结果】（1）浓度筛选试验中，0.06 g·L~(-1)的CAPE在保存第3天显著提高精子的总活率并维持至第5天（P<0.05），不仅如此，精子的渐进性活力在第1天显著高于其他处理组（P<0.05）。（2）氧化胁迫试验中，H_2O_2处理组的精子质膜完整性、顶体完整性、总活率、渐进性活力、SOD与CAT活性在保存的第5天均极限显著低于空白组与CAPE+H_2O_2混合组（P0.05）。与CAPE+H_2O_2混合组相比，H_2O_2处理组AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT的mRNA表达水平显著降低（P<0.05),BAX的表达水平显著升高（P0.05）。在蛋白表达水平中，CAPE+H_2O_2混合组与H_2O_2组相比，AMPK、p-AMPK与p-AMPK/AMPK比率显著提升（P

【目的】研究外源性γ-氨基丁酸（GABA）抵抗仔猪氧化应激的作用效果，及海马神经元 GABA 受体调节凋亡信号通路在其中可能的介导作用，为 GABA 作为动物应激调节剂的应用提供科学依据。【方法】基于成功构建的仔猪活体和大鼠海马神经元氧化应激模型，考察外源性 GABA 对仔猪血清及海马组织中氧化/抗氧化相关指标、仔猪日增重、脑海马 GABA 受体以及大鼠海马神经元中 GABA 受体及凋亡信号通路相关基因表达水平的影响。【结果】低、中、高浓度的 GABA 灌喂组（LD+OS;MD+OS;HD+OS）仔猪血清的 MDA 含量均极显著低于氧化应激（OS）组(P0.05)。氧化应激组海马组织的 MDA含量极显著高于对照组和 HD+OS 组 (P

【目的】探究姜黄素（Cur）对玉米赤霉烯酮（ZEA）诱导猪肾上皮细胞（PK-15）氧化损伤的保护作用，并基于SIRT1/FOXO1信号通路阐明其作用机制，为姜黄素的兽医临床应用提供依据。【方法】试验分为5组：对照组、ZEA组（36.55μg·mL~(-1) ZEA）、Cur 6.25组（36.55μg·mL~(-1) ZEA+6.25μmol·L~(-1) Cur）、Cur 12.5组（36.55μg·mL~(-1) ZEA+12.5μmol·L~(-1) Cur）、Cur 25组（36.55μg·mL~(-1) ZEA+25μmol·L~(-1) Cur）；通过MTT法测定ZEA的半数抑制浓度和Cur对PK-15细胞的最大安全浓度；使用倒置显微镜观察PK-15细胞的形态变化；采用试剂盒检测细胞内活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）以及丙二醛（MDA）的水平；qRT-PCR检测细胞SIRT1、FOXO1、CAT、Mn-SOD的mRNA水平；Western Blot检测SIRT1、FOXO1和Acetyl-FOXO1蛋白的表达量。【结果】ZEA的IC_(50)为36.55μg·mL~(-1),Cur的最大安全浓度为25μmol·L~(-1)；与对照组相比，ZEA极显著降低PK-15细胞活力（P<0.01），极显著提高ROS和MDA水平（P<0.01），极显著降低SOD、CAT活性（P<0.01）；与ZEA组对比，不同浓度的Cur(6.25、12.5、25μmol·L~(-1)）显著提高PK-15细胞的存活率（P<0.05），改善细胞形态；极显著（P<0.01）降低ZEA诱导的ROS和MDA水平；极显著升高细胞内SOD和CAT活性（P<0.01）。与ZEA组对比，各Cur组不同程度的升高SIRT1和CAT的mRNA表达量，极显著的降低FOXO1的mRNA表达量（P<0.01）；极显著升高Mn-SOD的mRNA表达量（P<0.05），极显著升高Acetyl-FOXO1蛋白表达（P<0.01）；与ZEA组对比，各Cur组均极显著升高SIRT1蛋白表达（P<0.01），极显著降低Acetyl-FOXO1蛋白表达（P<0.01）。【结论】Cur可以上调SIRT1的表达，降低FOXO1的乙酰化水平，诱导抗氧化酶Mn-SOD和CAT的表达，从而清除ROS，降低MDA水平，减轻ZEA对PK-15细胞的氧化损伤作用。

【目的】在地塞米松(DEX)诱导骨骼肌卫星细胞氧化应激的体外条件下,筛选丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号系统中起关键作用的信号通路。【方法】将体外培养的肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞(SCs)分别进行处理:Ⅰ、对照组;Ⅱ、DEX;Ⅲ、p38MAPK抑制剂;Ⅳ、DEX+p38MAPK抑制剂;Ⅴ、JNK抑制剂;Ⅵ、DEX+JNK抑制剂;Ⅶ、ERK5抑制剂;Ⅷ、DEX+ERK5抑制剂;Ⅸ、ERK1/2抑制剂;Ⅹ、DEX+ERK1/2抑制剂。除处理Ⅰ和处理Ⅱ外,其它处理首先用抑制剂预处理30min,弃去培养基后,再按处理设置分别加入含DEX的培养基或者正常培养基继续处理24h。处理结束后,分别测定细胞培...

【目的】通过考察生长猪一次性腹腔注射diquat后不同时间点的生产性能和血清氧化与抗氧化指标的变化,探明氧化应激的持续时间和血清敏感指标,建立氧化应激模型。【方法】选用DLY生长猪8头,体重(36.00±2.50)kg,随机分为2组,每组4头猪。应激组按8 mg.kg-1体重一次性腹腔注射diquat溶液,对照组腹腔注射相同剂量的灭菌生理盐水。试验期35 d,在试验第0、1、2、3、7、14、21、28、35d空腹前腔静脉采血,检测血清中抗氧化能力、抗氧化酶活力以及代谢产物。【结果】Diquat极显著降低了试验前期和全期试猪的生产性能,显著或极显著降低第7、14、21、28天血清谷胱甘肽过氧化...

选取12头、21日龄、平均体质量为(8.10±0.89) kg的健康二元杂(杜×长)断奶仔猪，于回肠末端实施“T”形瘘管手术，随机平均分为2组，处理组和对照组均饲喂基础饲粮，但处理组在基础日粮中根据每周体质量，每天拌入10g/kg剂量的D–半乳糖，建立D–半乳糖诱导断奶仔猪慢性氧化应激模型，探讨氧化应激对断奶仔猪血清生理生化指标、能量代谢和回肠末端氨基酸表观消化率的影响，试验期为28d。结果表明：D–半乳糖处理显著降低了断奶仔猪血清中总抗氧化能力、过氧化氢酶和总氧化物歧化酶的活性，显著提高了丙二醛的浓度；氧化应激显著降低了断奶仔猪血清尿素氮水平，而其他所测血清生化指标在两组间的差异均无统计学意义；氧化应激显著提高了断奶仔猪的氧气消耗量、二氧化碳产生量、产热量、呼吸熵和粪能；氧化应激显著或极显著降低了回肠末端必需氨基酸中的赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的表观消化率，同时也显著或极显著降低除脯氨酸和甘氨酸外的其他非必需氨基酸的表观消化率。使用10g/kg剂量的D–半乳糖建立断奶仔猪慢性氧化应激模型，断奶仔猪产生慢性氧化应激，不但降低了仔猪机体抗氧化酶系统活性和提高了氧化物水平，同时还抑制了仔猪能量代谢和回肠末端氨基酸消化水平，对断奶仔猪的生产产生不利影响。

选取12头、21日龄、平均体质量为(8.10±0.89) kg的健康二元杂(杜×长)断奶仔猪，于回肠末端实施“T”形瘘管手术，随机平均分为2组，处理组和对照组均饲喂基础饲粮，但处理组在基础日粮中根据每周体质量，每天拌入10g/kg剂量的D–半乳糖，建立D–半乳糖诱导断奶仔猪慢性氧化应激模型，探讨氧化应激对断奶仔猪血清生理生化指标、能量代谢和回肠末端氨基酸表观消化率的影响，试验期为28d。结果表明：D–半乳糖处理显著降低了断奶仔猪血清中总抗氧化能力、过氧化氢酶和总氧化物歧化酶的活性，显著提高了丙二醛的浓度；氧化应激显著降低了断奶仔猪血清尿素氮水平，而其他所测血清生化指标在两组间的差异均无统计学意义；氧化应激显著提高了断奶仔猪的氧气消耗量、二氧化碳产生量、产热量、呼吸熵和粪能；氧化应激显著或极显著降低了回肠末端必需氨基酸中的赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的表观消化率，同时也显著或极显著降低除脯氨酸和甘氨酸外的其他非必需氨基酸的表观消化率。使用10g/kg剂量的D–半乳糖建立断奶仔猪慢性氧化应激模型，断奶仔猪产生慢性氧化应激，不但降低了仔猪机体抗氧化酶系统活性和提高了氧化物水平，同时还抑制了仔猪能量代谢和回肠末端氨基酸消化水平，对断奶仔猪的生产产生不利影响。

氧化应激被认为是影响动物繁殖性能和造成人类不孕不育的重要因素,氧化应激诱导卵泡颗粒细胞凋亡,进而诱发卵泡闭锁是其影响动物繁殖性能的重要途径。近年来,针对氧化应激对有腔卵泡闭锁的影响研究取得了系列进展,主要包括:氧化应激对卵泡闭锁具有重要调控作用;叉头盒转录因子O1(FoxO1)是氧化应激诱发卵泡闭锁的关键性调控因子;卵泡液因子能够调控卵泡颗粒细胞氧化损伤的发生与程度。

课题组前期利用鲣加工副产物酶解制备了寡肽SEP-3（Leu-Leu-Phe-Thr-Thr-Gln）。为探究睡眠剥夺时间对小鼠氧化应激水平的影响及鲣寡肽SEP-3对睡眠剥夺小鼠氧化应激的干预作用，采用改良多平台水环境法对C57BL/6雄性小鼠分别进行睡眠剥夺0、48和72 h后，检测血清和肝脏中T-AOC、MDA含量、SOD和GSH-Px活性；然后将C57BL/6雄性小鼠分为正常组、SD组、褪黑素组、SEP-3组和★SEP-3组，除正常组外其余各组均进行72 h的睡眠剥夺，实验期间监测体质量的变化，H.E染色观察肝脏的组织形态，并检测血清和肝脏中T-AOC、MDA含量、SOD和GSH-Px活性。结果显示，与正常组相比，睡眠剥夺48 h后小鼠血清中MDA和SOD的表达水平明显升高，T-AOC和GSH-Px并无明显变化，肝脏中T-AOC、SOD和GSH-Px活性呈现下降趋势，而MDA含量呈上升趋势；睡眠剥夺 72 h，SD组小鼠血清和肝脏中T-AOC、SOD和GSH-Px活性明显下降，MDA含量明显升高。药物干预能显著提高小鼠血清和肝脏中T-AOC、SOD和GSH-Px活性，降低MDA含量。寡肽组间及阳性对照组之间小鼠血清和肝脏中MDA含量，SOD和GSH-Px活性并无显著差异。但在血清中，阳性对照组T-AOC显著高于寡肽组，寡肽组间却无显著差异；在肝脏中，阳性对照组和★SEP-3组T-AOC无显著差异，但均显著高于SEP-3组。此外，药物对睡眠剥夺小鼠体质量无影响，但对肝损伤具有明显的保护和修复作用，且阳性对照组和SEP-3组的效果更好。研究表明，睡眠剥夺72 h后能显著激活小鼠体内氧化应激反应，SEP-3能明显改善睡眠剥夺引起的氧化应激损伤。本研究为治疗睡眠障碍药物或辅助治疗的保健食品的研发提供了一定的理论依据。

本文比较研究了日粮中添加精氨酸(L-Arginine,Arg)和精氨酸生素(Arginine activator additive,AAA)对早期断奶仔猪氧化应激的影响。试验选用84头21日龄断奶的长×大仔猪(5.56±0.07kg),共12栏,分为3个处理组(4栏/处理,7头/栏)。分别饲喂基础日粮(SD)、SD+AAA(0.08%)或SD+Arg(0.6%),试验期为7d。结果表明:与对照组相比,Arg和AAA添加组中血清Arg浓度、平均日增重(ADG)及肠道重均显著增加(P<0.05),血清皮质醇(COR)、丙二醛(MDA)及尿素氮(BUN)浓度显著降低(P<0.05);与对照相比,AA...

为了解改性Y分子筛(DUSY)作为固体酸催化剂的催化活性,采用气相色谱分析法研究了DUSY在氧化苯乙烯与醇加成反应中的催化作用及反应条件对该加成反应的影响.结果表明,DUSY对该加成反应催化活性较高,得出的最佳反应条件是:反应温度为75℃,反应时间为2h,反应物配比(氧化苯乙烯∶乙酵)为1∶3(摩尔比),1mol氧化苯乙烯催化剂用量为22.8g.

【目的】探讨氧化应激在镉诱导大鼠肝细胞凋亡中的作用。【方法】采用两步灌流法获得大鼠肝细胞,经过24 h培养,用醋酸镉处理细胞,或者Z-VAD-fmk、NAC和镉共同处理细胞。应用MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内ROS水平和线粒体膜电位,分光光度法检测caspase-3活性、GSH和MDA含量。【结果】结果表明,肝细胞暴露于浓度为2.5、5、10μmol.L-1的镉后,细胞相对存活率显著下降(P<0.01),凋亡率显著或极显著升高(P<0.05或P<0.0...

为研究冷冻保存和常温((17±0.5)℃)保存后猪精子活率、活力和顶体完整率,比较了猪精液冷冻稀释液中2种甘油含量细管法的快速冷冻效果,以及不同解冻温度对冷冻精液的影响,采用细胞计数法、FDA-PI双重染色法与Giemsa染色方法检测精子的活率、活力和顶体完整率。结果显示:3%(体积分数,下同)甘油冷冻解冻后精液的活率、活力(38.54%、52.24%)显著(P<0.05)高于2%甘油组(15.63%、28.22%),但3%甘油组顶体完整率(11.55%)显著(P

[目的]探讨甘胆口服液按推荐剂量用药对牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease,BRD)的治疗效果及对血清急性期蛋白(acute phase protein,APP)浓度和氧化应激指标的影响,为其在牛临床上的推广应用提供依据。[方法]选择40头自然发病的BRD犊牛,随机分成2组,分别为受试药物组(甘胆口服液0.2 mL/kg)、对照药物组(麻杏石甘散0.75 g/kg),并增加健康犊牛12头作为空白对照组,按推荐剂量1次/d,连用7 d,分别于试验第0,3,5,7天记录犊牛的一般临床症状,并依据BRD评分表进行打分;在试验第0,7天随机抽取各试验组犊牛12头颈静脉采血,测定血清APP(结合珠蛋白(HP)、淀粉样蛋白A(SAA)、C-反应蛋白(CRP))浓度和氧化应激指标(丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC))水平。[结果]药物组试验犊牛第0天证候积分均≥5分,符合试验要求。用药第3,5,7天临床症状积分均不同程度降低(P<0.05)。在第5天时积分均0.05),但随着治疗时间的延长,甘胆口服液治愈率与麻杏石甘散相近,用药5 d后,两药物组治愈率均达到60%以上。BRD组犊牛第0天血清HP、SAA、MDA水平显著高于健康对照组(P0.05)。经过药物治疗后,BRD组犊牛第7天血清HP、SAA、MDA水平显著下降,GSH水平和SOD活性显著上升(P<0.05)。[结论]甘胆口服液能明显改善BRD犊牛临床症状,有效缓解患BRD犊牛氧化应激状态,降低血清急性期蛋白水平。联合应用急性期蛋白和氧化应激指标可以对BRD犊牛进行早期诊断及疗效监测。