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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
彭开蔓 邓子新 周启
吸水链霉菌应城亚种１０－２２对外源载体ＤＮＡ显示强烈的限制性，来自变铅青链霉菌高拷贝质粒ｐＩＪ１０１的衍生载体ｐＩＪ７０２，能以较低频率转化吸水链霉菌应城亚种１０－２２的衍生菌株Ｑ１５１０。本研究先用质粒ＤＮＡ转化Ｑ１５１０，以获得一些硫链丝菌素的抗性转化子，再对这些混合转化子进行亚硝基胍和吖啶橙的多轮诱变。从经诱变后的单菌落群体中筛选获得６株对Ｃ３１敏感的个体，经鉴定均为限制和修饰基因的双突变子（Ｒ－Ｍ－）。进一步的研究证明，某些本不能转化出发菌株的质粒载体可以转化这些菌株，Ｃ３１能以高频率感染这些衍生菌株；另一个不能感染出发菌株的链霉菌噬菌体Ｒ４，也可以高频率感染这些衍生菌株；Ｃ３１和Ｒ４...
关键词：
限制-修饰 链霉菌 筛选 鉴定
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
孙军德 吴月 李海群 乔雪 姜治民
为提高不吸水链霉菌梧州专化型001菌株发酵的生物量,本研究采用响应面法对该菌株的液体发酵条件进行优化。在单因素试验的基础上,利用Plackett-Burman(P-B)试验设计证明可溶性淀粉(X1)、初始p H值(X4)以及温度(X5)3种因素对不吸水链霉菌生物量的积累存在着较为显著的影响。在响应面分析(response Surface Methodology,RSM)中,X1、二次项X42和X52均能显著影响该菌株生物量的积累。优化的最佳发酵条件组成为:可溶性淀粉34.66g·L-1、p H值7.62、温度28.29℃,此时不吸水链霉菌菌体生物量达0.0137g·L-1。验证试验结果表明:在...
关键词：
不吸水链霉菌 生物量 优化 响应面法
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张丽 秦泽荣 徐镔蕊 刘尚高 尹燕博
利用乳链菌肽抗性菌株中乳链菌肽抗性和乳糖发酵紧密连锁的原理,在含有乳链菌肽、乳糖和溴甲酚紫的选择培养基上,从205个新鲜的牛奶样品中定向筛选乳链菌肽抗性菌株。对筛选到的4株菌分析鉴定结果表明:4株菌均为革兰氏阳性菌,产乳酸,过氧化氢酶试验阴性;通过质粒的抽提和电泳,发现Lactococcuslactissubsp.lactisZL2009,ZL2010,ZL2024,ZL2030分别含有1,7,5,3条质粒带,且4株菌的质粒DAN分子大小不完全相同。
关键词：
乳酸乳球菌 乳链菌肽抗性 定向筛选 鉴定
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
魏颖颖 赵秀香 吴元华
以嘧肽霉素生物合成阻断突变株UV2136为研究对象,建立了不吸水链霉菌辽宁变种的基因转移系统。UV2136对硫链丝菌素高度敏感,选择含有该抗生素标记的质粒pIJ702和pWHM3,探索其转化UV2136的可能性。结果表明:UV2136含有较强的限制修饰系统,采取热衰减法获得原生质体、原生质体热处理、冷处理、EDTA处理、质粒DNA变性等,均不能实现质粒pIJ702向UV2136的转化。来自非甲基化宿主E.coli ET12567的pWHM3也无法实现转化,而源于E.coli DH5α的甲基化pWHM3,可以低频转化菌株UV2136,转化效率分别为4转化子.μg-1 pWHM3,经自身修饰的pW...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王世梅 黄为一 武济民
对从土壤中分离的ＮＮＤ－５２菌株的形态、培养特征、生理生化特征及其拮抗性进行综合分析，确定该菌株属于吸水链霉菌。该菌表现了对水稻纹枯菌、小麦赤霉菌等植物病原菌的抑制活性。发酵上清液对稗草、马唐等杂草显示除草活性。上清液中活性成分经提纯结晶并经紫外吸收光谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱检测及元素分析，证实其结构为除莠霉素Ａ（ｈｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ）。ＮＮＤ－５２菌株的菌丝体干粉添加于饲料中喂鸡，表现出抗鸡球虫并使鸡增重的效果。
关键词：
链霉菌 除莠霉素 生物活性
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杨旻 陶美凤
对标准的链霉菌接合转移方法进行优化建立起适用于吸水链霉菌NRRL5491的接合转移系统。40℃温浴20 min为孢子的最佳热激处理条件;整合型质粒pSET152的接合转移效率是穿梭型质粒pOJ446的3~6倍;当阿泊拉霉素覆盖浓度为1μg/mL时,pSET152的接合转移效率是50μg/mL时的4.6倍,而pOJ446接合转移效率相应提高了2.4倍;MS培养基上接合转移效率是SY琼脂培养基上的3.4倍。采用最适优化条件时,接合转移频率可达到2×10-6,足够用于基因置换等遗传操作。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
万芳芳 刘高强 赵艳 何苑嗥 周国英
以甲壳素为唯一碳源,利用对硝基-N-乙酰苯胺为显色剂,通过变色圈法从湘江河岸边的土壤中筛选到产甲壳素脱乙酰酶的霉菌7株。其中A4菌株具有较强的产甲壳素脱乙酰酶能力。结合形态学和ITS区序列特征,A4菌株初步鉴定为串珠状赤霉菌。
关键词：
甲壳素 壳聚糖 甲壳素脱乙酰酶 菌株筛选
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杨卓 李佳丽 肖乐 何璟
利用单因素试验探索了热激处理、预萌发时间、供体宿主菌的类型、供受比及ＭｇＣｌ＿２浓度对链霉菌ＳＨ１２１接合转移效率的影响，结果显示：在５０℃热激１０Ｍｉｎ，３７℃预萌发１Ｈ，以大肠杆菌ＤＣＤＡ／ｐＵＺ８００２为供体宿主菌，在供受比为１００∶１时，使用添加４０ＭＭｏｌ／ｌ ＭｇＣｌ＿２的培养基Ｍ－ｉＳｐ４，接合转移效率最高可达到每受体１．０３×１０～（－３）个接合子。利用建立好的接合转移方法，将整合型质粒ｐＳＥＴ１５２和基因敲除质粒ｐＹＺ０９成功地导入链霉菌ＳＨ１２１，证实该方法可用于后期链霉菌ＳＨ１２１活性天然产物的挖掘及其相关生物合成基因簇的研究工作。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
孙军德 乔雪 李海群 吴月 姜治民
本研究旨在从土壤中筛选能产生几丁质酶的菌株,通过优化产酶条件提高菌株酶活,为获得新的生防菌株及防治植物病害奠定基础。从土壤中共筛选出73株不同菌株,其中产几丁质酶活最高的菌株酶活达0.795U·m L-1,经形态学、生理生化及分子生物学特征分析,鉴定其为酒红色链霉菌(Streptomyces vinaceus),命名为Streptomyces vinaceus S7。通过单因素法和正交试验设计优化产酶条件,优化之后,当玉米糊精和大豆蛋白胨添加量分别为10g·L-1,温度35℃,接种量10%,装液量50m L,在此条件下培养4d,酶活达到2.25 U·m L-1,比优化前提高1.83倍。该菌株几...
关键词：
几丁质酶 筛选 酶活力 优化
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
陈志敏 吴昊鑫 曾慧芳 张绍升
采用诱捕法从烟田土壤中分离到1株腐霉(Pythium spp.),鉴定为瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum).接种试验结果表明该菌对烟草、黄瓜、辣椒具有致病性.采用对峙培养试验测定木霉菌(Trichodermaspp.)对瓜果腐霉的抑制作用,筛选出拮抗瓜果腐霉哈茨木霉(T.harzianum)菌株TGY040604,该菌株对瓜果腐霉的生长抑制率达到80%以上,其次生代谢产物对病原菌也具有一定的抑制效果.盆栽试验结果表明,该木霉菌菌株对烟草猝倒病的防效达65%,优于甲霜灵锰锌.
关键词：
烟田 瓜果腐霉 木霉
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘冰 宗兆锋 王记侠
利用重寄生链霉菌F46和生防放线菌SC11进行原生质体融合,通过菌落形态特征及颜色的差异分离获得8株融合菌株。皿内实验结果表明,包括F-S5,F-S8,F-S12,F-S15和F-S16在内的5个菌株保留了亲本 SC11较强的抑菌作用,其中F-S8只对粉红聚端孢(Trichothecium roseum)有较强的抑菌活性,抑菌率>60％;F- S12对粉红聚端孢(T.roseum)和大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)有抑菌作用,抑菌率接近60％;而其他3个菌株对5种靶标病原真菌皆有强的抑菌活性,抑菌率可达70％左右。在受抑菌丝再生能力测定中发现,菌株F-S15对粉红聚端孢(...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
叶火春 赖先文 王艳丽 刘承兰
【目的】从采自深圳近海红树林泥土中分离筛选到抑制再育镰刀菌生长和产生伏马菌素B1(FB1)的菌株,并对其进行鉴定,为控制食品中真菌毒素污染提供新途径。【方法】采用镰刀菌产毒素试验及生长对峙法,从采自红树林泥土中分离筛选目标菌株;根据菌株形态和培养特征、生理生化特性及16SrDNA序列分析,对目标菌株进行鉴定。【结果】从红树林泥土中分离到1株可抑制再育镰刀菌产生FB1和生长的菌株SZ1-6,初步确定该菌株属于卡伍尔链霉菌。菌株SZ1-6发酵液可显著抑制再育镰刀菌产生FB1,产毒抑制率达67%以上;菌株对再育镰刀菌生长也具有一定的抑制效果。【结论】筛选到1株对再育镰刀菌产FB1和生长均有抑制效果的...
关键词：
链霉菌 再育镰刀菌 伏马菌素B1
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
朱峰 田成丽 朱盼盼 王媛媛 朱晓峰 段玉玺 陈立杰
前期研究获得了6株具有杀线虫活性的链霉菌Snea253的形态突变株,为进一步明确突变株对抗生素的敏感性差异,采用杯碟法对11种抗生素的敏感性进行测定,并进行耐药性菌株的筛选。试验结果表明:突变株Snea253-A比原始菌株Snea253更敏感,而突变株Snea253-B、Snea253-F、Snea253-G、Snea253-H和Snea253-J均比原始菌株耐药性增强。6株突变株对巴龙霉素、阿布拉霉素、妥布霉素、卡那霉素、链霉素和庆大霉素均比较敏感,但对四环素、氨苄霉素、青霉素和奇霉素比较耐受,而对潮霉素反应不一致。用链霉素做为耐药菌株的筛选剂,浓度为10μg·m L-1时,突变株Snea2...
[期刊] 华北农学报
[作者]
张玉净 郝志敏 郑蒙 张金林 董金皋
本研究从400余株灰葡萄孢ATMT转化子中筛选到产孢缺陷菌株BCG-183。利用CTAB法提取野生型和BCG-183的基因组DNA,Southern杂交证实T-DNA标记在突变菌株中为单拷贝插入;对该菌株表型进行分析,发现BCG-183菌株菌落呈白色,菌丝产量较野生型大;致病性较野生型强;利用血球计数板计算产孢量,表明BCG-183不产生分生孢子;胞壁降解酶活性比野生型强。利用TAIL-PCR技术确定T-DNA插入位点侧翼序列,生物信息学分析表明,T-DNA插入到灰葡萄孢基因组超级重叠群42(Supercontig 42)中假定蛋白编码基因(BC1G_07455)的3'末端。RT-PCR结果表...
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