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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吕中一 闻家乐 刘泽远 张馨予 胡碧春 范芝蕊 关长飞 杨勇
【目的】建立君迁子(Diospyros lotus L.)组培快繁体系并进行优化,为君迁子组培苗的生产应用提供技术支持及理论依据。【方法】以污染率、褐化率、成活率为考察指标,设置体积分数10%H_2O_2消毒10,20,30 min和体积分数2%NaClO消毒5 min+体积分数10%H_2O_2消毒10 min 4个处理,筛选君迁子外植体适宜的消毒方法;分别以君迁子萌动芽、春梢、腋芽和休眠芽作为外植体,筛选最合适的外植体材料;分析DKW、(1/2N)MS、1/2MS、MS培养基对组培苗启动培养的影响,筛选组培苗生长的最适培养基;增殖培养中,激素ZT、6-BA均设0,1.0,2.0,3.0,4.0 mg/L 5个水平,IAA设0.05,0.1,0.2 mg/L 3个水平,筛选组培苗继代增殖最适激素配比;最后分析不同质量浓度IBA(0,1.0,2.0,3.0 mg/L)对组培苗生根的影响。【结果】君迁子外植体最适的消毒方法为体积分数2%NaClO消毒5 min+体积分数10%H_2O_2消毒10 min;最佳外植体材料为萌动芽,其成活率可达60.00%;在(1/2N)MS培养基上组培苗生长更加健壮,启动培养效果较好;增殖培养最佳的激素配比为3.0 mg/L ZT+0.1mg/L IAA,在此处理下,组培苗2级愈伤占比79.00%,显著高于其余处理,2级和3级株高占比分别为55.33%和44.67%,长势均匀且主茎粗壮,其增殖系数达5.83;君迁子生根培养较为适宜的IBA质量浓度为1.0 mg/L,生根率可达83.33%。【结论】初步建立了较为完整的君迁子组培体系,有助于柿砧木无性系产业化扩繁的推进。
关键词：
君迁子 外植体 组织培养 褐化 生根
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李晶 罗玉洁 张青林 罗正荣 刘继红
以君迁子（Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ ｌｏｔｕｓ ｌｉｎｎ．）休眠芽和叶片为外植体，研究基础培养基种类和外植体基因型对休眠芽初代培养的影响，比较叶片放置方式、ｔＤＺ浓度、Ｚｔ与ｔＤＺ不同浓度组合及暗培养时间对叶片愈伤组织形成和不定芽再生的影响；然后对再生芽进行生根。结果表明：君迁子休眠芽初代培养中，ＤＫＷ培养基最适合其生长发育，休眠芽生长势最佳；初代培养中，不同基因型的外植体在ＤＫＷ培养基中生长势基本相同，说明外植体基因型对其初代培养没有影响，但对继代培养影响较大。叶片下表面朝上放置在Ｍｓ＋Ｚｔ ０．１ Ｍｇ／ｌ＋ｔＤＺ２．０Ｍｇ／ｌ中暗培养２０Ｄ，愈伤组织形成率达１００％，在（１／２ｎ）Ｍｓ＋２．２．．．
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张蕾 苏晓华 张冰玉 黄秦军 张香华 李义良
以京2杨为研究对象,确定了影响其组培苗生长的关键因子及组培苗生长的最佳条件,并为其建立了稳定高效的再生体系。试验结果表明:京2杨组织培养的最适基本培养基为MS培养基,继代培养基和不定芽最佳生根培养基均为1/2MS+NAA 0.08 mg.L-1+IBA 0.08 mg.L-1;培养基中加入活性碳不利于京2杨生长;光周期对京2杨的生长影响较小,但光照强度和继代培养基pH值对其生长影响显著,最适光照强度为2 500 lx,最适pH值为6.5;无菌苗叶片最佳不定芽诱导培养基为MS+BA 1.0 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1,叶柄最佳不定芽诱导培养基为MS+BA 1.0 mg.L-1+N...
关键词：
京2杨 组织培养 再生体系
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
杨伟聪 张晨星 赵汗青 刘欣茹 庞晓明 李颖岳
【目的】以四倍体酸枣组培苗为材料，优化其组织培养体系并构建适宜的四倍体酸枣叶片离体再生体系，为该种质的保存、推广以及利用奠定基础。【方法】本研究以秋水仙素加倍获得的酸枣同源四倍体种质为材料，设计试验，利用组织培养技术探索了不同植物生长调节剂的种类、浓度对于四倍体酸枣的增殖、生根、不定芽再生的影响情况；并利用石蜡切片法对叶片不定芽再生过程进行了细胞学观察。【结果】（1）当四倍体酸枣以带顶芽的茎段作为外植体时，最佳增殖培养基为：1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+TDZ 0.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂5.9 g/L，适宜生根培养基为：1/2MS+IBA 0.8 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂5.9 g/L。生根苗经炼苗后移栽至大田，成活率可达93.33%。（2）诱导四倍体酸枣叶片离体再生不定芽的最佳培养基为WPM+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂5.9 g/L，在该培养基上叶片可通过直接再生途径再生出不定芽。（3）再生不定芽主要起源于叶脉维管束周围的薄壁细胞，在预培养8～12 d时，分生细胞的分裂能力最强且未出现分化现象。【结论】本研究优化了四倍体酸枣组培体系，并成功建立了四倍体酸枣叶片离体再生体系，同时对叶片不定芽的再生过程进行组织学研究，为酸枣多倍体培养体系完善以及后续多倍体种质的利用奠定了基础。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
暴甜 苏淑钗 高赫 陈一帆
近年来,毛梾作为油料树种,其果实油用价值被逐步开发利用,但因优株材料数量有限,传统的实生苗繁殖变异系数大,而无性繁殖技术尚不成熟,繁殖系数低,难以满足短期内提供大量苗木的需求,因此需要建立毛梾组培体系达到快速繁殖目的。目前对毛梾组培的研究仅到初代培养,污染率高诱导率低,生产中无法应用。本试验以结果盛期的优良单株为试材,选用一年生休眠枝水培出的新梢为外植体,进行毛梾优良无性系组培技术研究。结果表明,最佳消毒方式为2%次氯酸钠消毒15 min,污染率4.4%;最适基本培养基为DKW培养基,试管苗生长良好,叶片
关键词：
毛梾 组织培养 生根
[期刊] 西南农业学报
[作者]
潘丽梅 朱建华 秦献泉 彭宏祥 卢美英
应用改良的CTAB法提取龙荔基因组DNA,探讨龙荔ISSR-PCR扩增反应体系的建立和优化。结果表明,经过改良的CTAB法提取龙荔基因组DNA效果良好,所提取的DNA纯度较高,符合ISSR-PCR反应的要求;龙荔ISSR-PCR最佳反应体系(反应总体积20μl):1×Buffer缓冲液(含适量Mg2+),1 UTaqDNA聚合酶,0.20 mmol/L dNTP,0.25μmol/L引物,DNA模板70~80 ng/μl,退火温度53~54℃。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
明军 张启翔 晏小兰 邱丽娟
采用改进的SDS DNA提取方法从梅花的嫩叶和老叶中提取获得总DNA .所得DNA样品的OD2 6 0 OD2 80 值在1 7～ 1 9之间 ,琼脂糖凝胶上主带清晰、较少降解、样品纯度高、蛋白去除干净且得率高 .该体系对原提取程序作了多处简化 ,使操作简便、快捷、高效 ,适合于梅花DNA提取 ,所提取的DNA样品不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂 ,可被限制性内切酶MseⅠ和EcoRⅠ完全酶切 ,适合AFLP PCR反应应用 ,得到清晰的指纹式样 .
[期刊] 华北农学报
[作者]
焦浈 孙营 李娜 秦广雍
以禾本科作物小麦为出发材料,通过优化AFLP选择性扩增步骤的4个限制性因素:Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度和预扩产物稀释倍数,确立AFLP最佳反应体系为:预扩增产物稀释20倍吸取2μL做为选择性扩增模板,混合1.5 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,0.4μmol/L选扩引物1、U Ex Taq进行选择性扩增。应用该体系分析水稻和玉米两大类禾本科作物基因组DNA样品,同样取得理想结果,扩增出清晰可辨且适量的电泳条带。该技术体系为AFLP分子标记技术在禾本科作物遗传分析中的广泛应用奠定了基础。
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
高航洋 张启香 胡恒康 张振茹 黄坚钦
以天目杜鹃Rhododendron fortunei组培苗的不定芽为外植体,采用单因子实验从基本培养基、生长素以及蔗糖质量浓度对其适宜培养条件进行了筛选。结果表明:在1/2WPM(wood planty medium)基本培养基中,天目杜鹃组培苗的生根率、平均根长及平均根数显著高于MS(Murashige and Skoog),1/2MS和1/4MS培养基(P
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
柳晓磊 汤华 李东栋 王茜 周蓉 林艳青
为摸索适宜椰子的SSR反应体系,分析了PCR反应体系中的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板浓度以及退火温度对扩增结果的影响,建立了适合椰子的SSR反应体系。研究结果表明:在20μL反应体系中,Mg2+、引物和dNTP的最适浓度分别为2.5 mmol/L、0.3μmol/L、0.2 mmol/L;TaqDNA聚合酶的最佳使用量为1 U,模板DNA应加入50 ng,引物最佳退火温度比Tm值较小者低2~3℃。在参数优化的基础上,应用标记分析该反应体系对24个海南不同地区高种椰子样品进行SSR分析,不同样品间DNA谱带多态性丰富,本研究建立的分析体系将为今后椰子资源的S...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
崔旭东 苏晓华 张冰玉 褚延广 黄秦军 张伟溪 刘勃洋
与白杨派树种相比,黑杨派树种一直因组培再生困难而限制了其在林木基因工程研究中的应用。本文以欧美杨优良新品种———渤丰1号为试验材料,以其再生培养基中的植物生长调节剂配比、铜离子浓度、光照强度、卡那霉素选择压等方面为切入点开展研究,建立了渤丰1号杨高效组培再生体系。使用该再生体系时,外植体的分化率和生根率均达100%,叶片的平均分化芽数多达20个以上,组培苗移植成活率可达98%,40 mg.L-1卡那霉素可以抑制渤丰1号杨叶片的诱导与分化,20 mg.L-1卡那霉素可以抑制渤丰1号杨不定芽的生根;同时发现铜(Cu)元素是渤丰1号杨外植体分化再生的一个关键因素,增加Cu2+浓度能显著促进不定芽的诱...
关键词：
欧美杨渤丰1号 高效再生体系 铜元素
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
王瑞 陈永忠 王湘南 彭邵锋 陈隆升 马力 罗健 杨小胡
以油茶优良无性系"湘林1号"的茎段为外植体培养的无菌苗为材料,开展了无菌苗增殖培养研究,研究结果表明:基本培养基及外源激素均对油茶无菌苗增殖培养产生重要作用,以WPM为基本培养基,激素组合为6-BA5.0 mg/L+NAA0.01 mg/L+生物素1.0 mg/L时,增殖系数达最高值3.90;以MS为基本培养基,激素组合为6-BA1.0 mg/L+NAA0.01 mg/L+生物素0.5 mg/L时,新梢生长量达2.01 cm。
关键词：
油茶 优良无性系 组织培养 增殖体系
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
卢艳平 陈玉军 李玫 黄烈健
【目的】研究基本培养基和不同质量浓度植物生长调节剂在开放组培条件下对马占相思(Acacia mangium)芽诱导、增殖和生根的影响,为建立马占相思开放式组培体系提供技术支持。【方法】以马占相思含饱满腋芽的带叶茎段作为外植体,研究MS、1/2MS、1/4MS和1/8MS培养基加入不同质量浓度6-BA(0.5,1.0,1.5mg/L)对马占相思芽诱导的影响;采用L_9(3~4)正交试验设计,探讨不同质量浓度6-BA(1.5,2.0,2.5mg/L)、IBA(0.1,0.5,1.0mg/L)和IAA(0.10,0.25,0.50mg/L)组合对马占相思芽增殖的影响;同时,研究不同质量浓度IBA(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L)和NAA(0.1,0.5,1.0mg/L)组合对马占相思组培苗生根的影响。【结果】马占相思最佳芽诱导培养基为1/8MS+0.5mg/L6-BA+0.2g/L百菌清,芽诱导率为91.87%;影响马占相思增殖的生长调节剂主次顺序为6-BA>IAA>IBA,最佳增殖培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.1mg/LIBA+0.25mg/LIAA+0.2g/L百菌清,增殖倍数为3.38;马占相思最佳生根培养基为2.0mg/LIBA+1.0mg/LNAA+0.2g/L百菌清,生根率为80.00%。【结论】初步建立了马占相思开放式组培技术体系,为马占相思无性系产业化扩繁提供了一种新方法。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
赵亚楠 张懿 谭旭 王胜男 姜峰 李天忠 朱元娣
为解决杜梨组培苗生根率低和移栽成活率低的问题,本研究以杜梨组培苗为试材,通过不定根诱导、不定根生长培养和试管苗驯化移栽环节,筛选出最适杜梨组培苗生长的培养基配方和炼苗方式。结果表明:1)健壮组培苗在添加了1.0mg/L吲哚乙酸(IAA)和1.0mg/L萘乙酸(NAA)的NN_(69)(Nitsch&Nitsch Medium)培养基中暗培养7d后进行不定根诱导,再转接至无生长素类物质的相同培养基中光照培养,组培苗生根率达96%;2)生根组培苗闭瓶炼苗和水培炼苗3周后移栽,成活率均达90%以上。综上所述,前期"高浓度生长素和黑暗培养"和后期"无激素和光照培养"的"两步生根法"适宜杜梨组培苗的生根诱导。杜梨组培苗生根技术的优化,为杜梨无性系砧木的商业化生产提供了技术支持。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
孙小兵 郭素娟
以迁西板栗主栽品种‘燕山早丰’为试材,采集其成龄树上当年抽生营养枝的茎段为外植体,研究了取样时期、基本培养基种类及植物生长调节剂组合对板栗不定芽诱导的影响,并采用L9(34)正交试验设计对增殖培养基进行筛选。结果表明:(1)外植体最佳取材时间为新梢旺盛生长期到半木质化期,即5月初至6月上旬;(2)不定芽诱导最佳基本培养基为MS,采用正交试验设计筛选出最佳激素组合为6-BA2.0 mg/L+IBA0.1 mg/L,诱导率达80%以上;(3)最佳增殖培养基为GD+ZT2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1,增殖系数可达3.24。
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