- 年份
- 2024(6018)
- 2023(8695)
- 2022(7903)
- 2021(7567)
- 2020(6346)
- 2019(14775)
- 2018(14874)
- 2017(28583)
- 2016(15888)
- 2015(17897)
- 2014(17883)
- 2013(17659)
- 2012(16085)
- 2011(14352)
- 2010(14048)
- 2009(12627)
- 2008(12037)
- 2007(10151)
- 2006(8686)
- 2005(7293)
- 学科
- 济(58229)
- 经济(58165)
- 管理(43582)
- 业(41399)
- 企(34854)
- 企业(34854)
- 方法(29534)
- 数学(25528)
- 数学方法(25245)
- 农(15354)
- 学(15075)
- 中国(13984)
- 财(13779)
- 业经(12943)
- 地方(12056)
- 理论(10454)
- 农业(10361)
- 和(10238)
- 贸(9987)
- 贸易(9982)
- 技术(9850)
- 易(9673)
- 环境(9572)
- 务(9199)
- 财务(9142)
- 财务管理(9128)
- 制(8975)
- 企业财务(8648)
- 教育(8640)
- 划(8414)
- 机构
- 大学(221292)
- 学院(219168)
- 管理(89523)
- 济(79244)
- 理学(78817)
- 理学院(77925)
- 经济(77382)
- 管理学(76540)
- 管理学院(76175)
- 研究(72850)
- 中国(50317)
- 科学(49967)
- 京(47215)
- 农(41288)
- 业大(38246)
- 所(37630)
- 研究所(35016)
- 财(34268)
- 农业(33237)
- 中心(32424)
- 江(30448)
- 北京(29164)
- 范(28777)
- 财经(28490)
- 师范(28430)
- 院(26101)
- 经(25961)
- 技术(25117)
- 州(25064)
- 师范大学(23027)
- 基金
- 项目(160760)
- 科学(125276)
- 基金(116190)
- 研究(114072)
- 家(102600)
- 国家(101770)
- 科学基金(86709)
- 社会(68413)
- 社会科(64690)
- 社会科学(64672)
- 省(64362)
- 基金项目(63154)
- 自然(59650)
- 自然科(58249)
- 自然科学(58237)
- 自然科学基金(57167)
- 划(54415)
- 教育(51915)
- 资助(47289)
- 编号(46663)
- 成果(37185)
- 重点(35780)
- 部(34454)
- 创(33846)
- 发(33796)
- 课题(31775)
- 创新(31494)
- 科研(31420)
- 计划(31248)
- 大学(29518)
共检索到299896条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
丁盛 刘清 黄志刚 周建军 萧浪涛
以籼稻品种9311为材料,研究了不同诱导培养基对籼稻9311的诱导率,以及农杆菌浓度、浸染时间和干燥处理时间对抗性愈伤率的影响,进而采用农杆菌介导的共转化方法将含有反义Waxy基因的p13W8质粒和含有潮霉素抗性标记基因的p1300质粒同时转化受体材料.结果表明:籼稻9311成熟胚在含质量浓度为3.0mg/L的2,4-D的N6基本培养基上具有较高的愈伤组织诱导率,且愈伤的胚性性状良好;愈伤组织在OD600值为0.6的农杆菌菌液中浸染10min、干燥1.5～2.0h处理后能够获得较多的抗性愈伤组织;对转化水稻的再生植株进行PCR检测表明,反义Waxy基因已整合进T0代水稻基因组中.
关键词：
籼稻 成熟胚 反义蜡质基因
[期刊] 中国农业科学
[作者]
吴顺 萧浪涛 刘清 沈革志 王若仲
【目的】利用转基因技术将反义蜡质基因导入籼稻成熟胚愈伤组织中,改良籼稻稻米直链淀粉含量。【方法】用根癌农杆菌介导的方法将p13W8质粒(含反义蜡质基因)和pCAMBIA1300质粒(含抗潮霉素抗性基因)对2个籼稻品种的成熟胚愈伤组织进行遗传共转化。【结果】供试材料愈伤组织继代培养18～24d后具有较高的转化频率和分化频率,可作为共转化的良好受体;抗性愈伤组织PCR检测结果表明,抗潮霉素抗性基因的阳性检测率为97.6%,反义蜡质基因的阳性检测率为27.1%。在46株转基因潮霉素抗性植株中,反义蜡质基因阳性株为5株,占转基因植株的10.9%。经PCR检测,发现上述4个株系T1群体中发生抗潮霉素抗性...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
黄伟奇 胡昌泉 苏军 朱祯 林文雄 王锋
ATP/ADP转运蛋白(AATP)在质体膜上负责外源ATP的转入,直接关系到质体内ATP浓度,从而可能影响质体内相关的一些重要代谢途径(如淀粉合成).本研究利用4个转基因结构(水稻aatp正反义转基因结构和菊芋aatp正反义转基因结构),采用农杆菌介导法获得了113个转基因水稻克隆.PCR、Southern Blot验证和后代遗传分析表明,外源基因多数以较低拷贝数整合到水稻基因组中.RT-PCR相对定量检测分析表明,插入基因在水稻中高水平表达,且与内源aatp基因在转录水平上存在复杂的相互干扰,反义植株aatp的转录水平比正义株系的低.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王志成 易自力 蒋建雄 覃静萍 肖亮 储成才
通过农杆菌介导,将几丁质酶基因和葡聚糖酶基因导入籼稻E32、9311、特青、盐恢559等4个栽培品种的愈伤组织中,经筛选与培养获得转基因植株.分子检测证明外源基因已整合到受体植株基因组中.抗病性鉴定的结果表明,转基因植株抗稻瘟病的能力有明显提高.
[期刊] 林业科学研究
[作者]
汪阳东 李春秀 齐力旺 张守攻
以我国重要的生物能源灌木——中间锦鸡儿枝叶和种子为材料,根据GenBank中已经发表fad2基因的同源序列,利用PCR技术克隆得到基因片段。在GenBank中Blast(GenBank登录号AY957393)所得基因片段和同属豆科的Glycine max Gmfad2-2a同源性高达88%,位于fad2基因编码区中部。将所得片段经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI121,构建了反义表达载体pBI121fad2,并利用农杆菌介导法转入烟草叶片,获得了抗卡那霉素和氨苄青霉素的再生烟草植株。初步分析结果表明:与对照烟草相比,转基因烟草种子脂肪酸含量没有明显差异,而亚油酸则减少10.3%...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
周涌 洪亚辉 王若仲 欧阳琳 周树良
将水稻DAD1基因插入Ti质粒,构建成该基因的正反义植物表达载体pWM-DAD1,pWM-antisense DAD1,转入根癌农杆菌LBA4404后,利用农杆菌介导的叶盘法转化菊花,经Hyg抗性筛选,并诱导愈伤组织和分化成苗,得到转基因菊花植株,通过PCR检测,从部分转基因植株中检测出预期的目的基因的存在.
关键词：
DAD1基因 菊花 转化 根癌农杆菌
[期刊] 华北农学报
[作者]
金迪 杨宇 徐海 马慧 陈丽静 钟鸣 徐正进 李浩戈
以常规籼系明恢86、七山占、中优早8的成熟胚为外植体,通过根癌农杆菌介导法,建立了一种光照培养条件下的新型籼稻成熟胚高效再生和转化体系。结果表明,籼稻在MS+4%麦芽糖+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1 mg/L IAA+0.5 mg/L 6-BA+2.878 g/L L-脯氨酸+1 g/L水解酪蛋白,于32℃持续光照10 d左右,可获得愈伤组织的平均诱导率约为84.9%;愈伤组织在MS+2 mg/L KT+1 mg/L IAA+2 mg/L 6-BA+1 g/L水解酪蛋白的培养基上再生率达到80.4%。建立在上述再生体系基础上的GUS基因的瞬时表达率为55.8%。
关键词：
籼稻 成熟胚 持续光照 再生 转化
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
田宏现 苑平 王曼玲 刘艺 李菁 夏新界 谭晓风
为建立猕猴桃ACC氧化酶反义基因功能研究技术平台并通过生物技术改良猕猴桃,从海沃德猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.var.deliciosa‘Hayward’)叶片中提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,并以此为模板,扩增得到ACC氧化酶(ACO)基因片段约1 kb,经限制性内切酶图谱分析,组建亚克隆并进行测序,其开放阅读框长957 bp,编码319个氨基酸,与其他已公布的ACC氧化酶cDNA的核苷酸(AB003514.1)及氨基酸序列(BAA21541.1)同源率分别高达94.0%和95.6%,证明所克隆的cDNA序列的准确性。构建该基因的反义表达载体,并通过...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
蒋开锋 张涛 杨莉 罗科 郑家奎
以82份非糯籼型杂交稻的亲本作为材料,用STS标记Wi10-1和Wi10-2检测其蜡质基因型,并测定其中65份材料的直链淀粉含量,研究STS标记的检测效果。结果表明:STS能准确检测供试材料的蜡质基因型;36份保持系/不育系中30%为WxbWxb,46份恢复系中60%为WxbWxb,16份早稻和早中熟恢复系仅25%为WxbWxb,30份迟熟恢复系中80%为WxbWxb;65份材料直链淀粉含量变幅为11.13%~28.49%,直链淀粉含量与STS标记的相关达1%显著水平(r=0.905);WxaWxa比WxbWxb材料直链淀粉含量平均高9.65个百分点,差异达1%显著水平;同一基因型的材料间直链...
关键词：
水稻 STS 蜡质基因 检测 效果
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙环星 张秀海 吴忠义 黄丛林 李文滨
phaG是生产可降解塑料PHAS的关键合成酶基因,利用来源于Burkholderia caryophylli的phaG基因BcphaG,构建了其植物表达载体pTiBHS-2,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化生产上常用的马铃薯(Solanumtuberosum)优良品种大西洋,共得到9株转基因马铃薯。经PCR检测证明外源基因已经整合到植物的基因组上,West-ern blot检测表明BcphaG基因在转基因植物体内已表达。转基因植株在再生初期,苗生长慢,根的再生也很慢,但在生根后生长情况逐渐恢复正常,说明BcphaG基因对再生转基因植株的早期生长有负面影响...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王胜军 陆作楣
根据已有的SSR分子标记对48个杂交籼稻亲本杂种优势群的划分结果,采用完全双列杂交设计和分群比较法研究了从不同类群选出的14个代表亲本相互杂交组合F1的杂种优势表现。结果表明,利用分子标记划分的4个杂种优势群及6个亚群之间存在遗传差异并构成28种可能的杂种优势模式。目前我国杂交籼稻杂种优势利用的主要模式如明恢63亚群×保持系群模式、两系恢复系亚群×保持系群模式仍然表现突出,而保持系群×温敏核雄性不育系群有可能成为新的杂种优势利用模式;两系恢复系和其他类型亲本杂交均能产生较强的杂种优势,定向改良后可能会提高籼稻杂种优势利用水平。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李兰玉 陈苇 杨清辉 罗延青 符明联 董云松 李根泽 王敬乔
利用甘蓝型油菜种子特异性贮存蛋白基因cruciferin启动子及NOS终止子构建了无选择标记基因且含有反义结构的油酸脱饱和酶基因(Fad2)的RNA i表达载体。通过农杆菌介导法,获得了无选择标记转基因植株;再生植株的PCR检测表明,外源基因已高频率地整合到油菜基因组中,而且获得的转基因种子通过脂肪酸含量分析表明,油酸含量比对照有了很大的提高。
[期刊] 华北农学报
[作者]
周延清 田苗苗 王芳 陈艳梅 张永华 苑保军
根据NCBI中大豆fad2-1序列设计引物,用PCR方法从大豆的基因组DNA中扩增大豆脂肪酸脱饱和酶基因,克隆到pMD18-Tvector中,转化大肠杆菌JM109菌株,进行测序与比对。然后,将其反向克隆到表达载体pBt,转化农杆菌菌株LBA4404,经双酶切鉴定和PCR扩增检测,获得具有该基因的农杆菌工程菌。结果表明,克隆的fad2-1基因为1 196 bp,基因序列与NCBI中已发表的fad2-1序列只有4%的差异,相似性大于95%,说明克隆的基因是大豆fad2-1基因;构建了该基因的反向表达载体,转入农杆菌内。这为利用农杆菌介导法把该反义基因转入大豆,改良脂肪酸成分奠定了基础。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
梁燕 王鸣 陈杭 陈大明
采用农杆菌介导的叶盘法 ,用胡萝卜茄红素 -β-环化酶反义 RNA基因对烟草 SRI野生类型种及Xanthi品种进行了遗传转化。 GU S检测结果表明 ,胡萝卜茄红素 -β-环化酶反义 RNA基因对两个不同烟草材料的遗传转化率均为 4 1 .7% ;Xanthi Southern杂交的阳性率为 6 7% ;转基因烟草当代叶片组织中茄红素和胡萝卜素含量与对照植株不同
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
何业华 熊兴华 林顺权 吴会桃 林良斌 何钢 陈建华
以枣树鲜食品种鸡蛋枣为材料,通过根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化,得到了转基因植株.预培养1d的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d,转移至分化选择培养基MS(1/2NO3)+0.15mg/LNAA+1.75mg/LZT+10mg/LKm+500mg/LCarb上诱导产生不定芽,将抗Km不定芽先后在15mg/LKm的生长、增殖和生根培养基上继续选择,诱导成完整植株.经PCR检测从抗Km植株中选择到7株阳性植株,进一步经Southern杂交证实有6株外源基因已整合到了枣树基因组中.Real timePCR定量检测表明,ACC合成酶反义基因在5株转基因植株中得到表达.
关键词：
枣树 ACC合成酶反义基因 转化
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
