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[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 董婧  郭昕  杨淑华  THERESA Hickey  程荣杰  张雅楠  陈月蕾  李林  WAYNE Tilley  
犬乳腺肿瘤是犬类的一种常见肿瘤性疾病,目前治疗多为手术结合放、化疗法,但结果多易转移复发。双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)是中药提取物,近年来其抗肿瘤作用越来越受到重视。为探求双氢青蒿素是否影响犬乳腺肿瘤细胞的侵袭及其影响机制,本试验取对数增长期状态相同的犬乳腺肿瘤细胞CHMm,使用低(5μM)、中(10μM)、高(20μM)浓度DHA处理并分别培养24,48,72h。收集各组细胞,使用CCK-8法检测细胞活性;利用细胞划痕试验检测细胞迁移性;利用transwell检测细胞侵袭性
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 邱昌伟  林德贵  陈双燕  宋筱瑜  王金秋  
为探讨犬的乳腺肿瘤组织中PTEN和VEGF蛋白表达与临床病理学特征关系的相关性,采用免疫组织化学SP染色法检测了32例乳腺肿瘤组织及6例正常乳腺组织中上述2种蛋白的表达。结果发现:1)PTEN蛋白在正常乳腺组织和良性乳腺肿瘤高表达率为100%,在恶性乳腺肿瘤组织中的高表达率为67%(8/12),两者比较差异极显著(P0.05),而与淋巴结转移、组织学分级有关(P<0.01);...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 姚华  林德贵  乔富强  田克恭  遇秀玲  胡冬梅  
为便于确定肿瘤的组织学来源,推测其在兽医临床诊断中的鉴别意义,研究p63和Calponin蛋白在20例犬乳腺肿瘤(canine mammary tumor,CMT)病例中的表达,采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)SP染色方法和光学显微镜观察进行确诊。结果表明,鼠抗人单克隆抗体p63和Calponin可用于犬乳腺肿瘤病例中肌上皮的表达研究,在乳头状瘤、混合瘤及腺肌上皮瘤等犬良性乳腺肿瘤组织中p63与Calponin表达为阳性或强阳性;在乳头状癌、浸润性导管癌等恶性肿瘤组织中p63与Calponin蛋白表现为阴性或局灶阳性。选择p63与Calponin作为犬乳腺肿...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 冯子建  孙娜  郝志立  孙盼盼  张华  范阔海  尹伟  杨惠珍  钟佳  张振彪  王建中  孙耀贵  李宏全  
为建立一种快速分离犬原代乳腺上皮细胞的培养方案,本研究旨在从健康泌乳金毛犬的乳汁中分离原代乳腺上皮细胞,接种于两种不同的培养基后传代培养,探讨不同培养基下细胞的生物学特征,提供犬乳腺上皮细胞简单便捷的分离措施及适宜的培养方法。选取泌乳一周的金毛犬在无菌条件下收集乳汁,离心处理后得到乳腺上皮细胞,分别用完全培养基和基础培养基接种培养,经形态学对比观察,间接免疫荧光检测角蛋白8(Cytokeratin 8)表达情况,绘制两种培养基培养下的第3代乳腺上皮细胞生长曲线;探讨完全培养基培养的第6代乳腺上皮细胞的冻存复苏活力。结果表明:1)乳汁分离可得到大量细胞团块,分别接种两种培养基后都会出现“煎蛋样”贴壁细胞,消化传代后两者均有Cytokeratin 8的高度表达;2)接种于基础培养基的细胞前期以聚集在一起的圆形单克隆细胞团块为主,传至第4代仅有少量细胞存活,细胞随着培养时间增加而状态变差,死亡细胞增多;接种于完全培养基的细胞整体呈“鹅卵石铺路样”成片生长,随着传代次数增加细胞状态稳定,细胞生长曲线呈现“S”形;3)完全培养基培养的第6代乳腺上皮细胞冻存复苏后能快速贴壁并分裂增殖。综上,乳汁分离法成功分离犬乳腺上皮细胞,且与基础培养基相比,完全培养基可以更好地维持细胞活性,促进细胞增殖分裂,且不影响细胞冻存后复苏的活力,为后期快速分离犬乳腺上皮细胞提供较优的培养方案。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 苗晋锋  马海田  邹思湘  陈伟华  
8只泌乳期的健康睢宁白山羊,产后72 h分别用内毒素和灭菌生理盐水经乳头管灌注左右侧乳房.灌注前及灌注后0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、24 h观察山羊整体及乳房局部变化.灌注24 h后,处死动物,取乳腺组织,部分用Bou in氏液固定,部分用液氮保存.临床症状及病理切片观察均显示,山羊表现典型的急性乳腺炎症状.检测两侧乳腺组织中部分与乳腺炎症相关因子的含量及其基因表达水平的结果表明:与灌注生理盐水对照相比,灌注内毒素侧乳腺组织中N-乙酰-β-D氨-基葡萄糖苷酶(NAGase)、髓过氧化物酶(MPO)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的活性及IL-1β、IL-6的含量极显著升高(P<0...
[期刊] 华北农学报  [作者] 范尉尉  陈霞  马春红  李广敏  张香云  耿军义  
在棉花根冠细胞生物测定过程中,棉花黄萎病病菌通过提纯复壮而达到较强的侵染能力,并制备出较多的黄萎病菌粗毒素。介绍了粗毒素的简易制备、根冠细胞培养与制备过程以及染色过程中染色剂的选择、染色时间的长短。实验与传统方法相比有几点改进:总结出细胞振荡时间在1~2 min之内;之后黑暗条件下静置培养2~6 h;选用pH为6.5的0.01%中性红染色3~5 min,之后加入一滴0.2%伊文思兰染色,伊文思兰的染色时间应严格掌握在3min以内等,为根冠细胞测定方法的推广提供了一定的理论支持。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王洪荣  秦韬  王超  
[目的]青蒿素是天然青蒿属植物的提取物,它很早就在中国传统中药中被用作抗疟疾、抗肿瘤和驱虫等药物。为探讨青蒿素对反刍动物瘤胃发酵、瘤胃内环境及其瘤胃微生物蛋白质循环的影响,确定青蒿素的对瘤胃发酵调控的效果和适宜添加量,为青蒿素作为一种新的瘤胃调控剂在反刍动物生产中应用提供依据。[方法]采用4只带有瘤胃瘘管的徐淮白山羊为试验动物,饲喂以玉米、豆粕和羊草为主组成的基础日粮,在基础日粮中分别添加占日粮干物质0,0.2%,0.4%和0.6%的青蒿素,进行4×4拉丁方设计试验,研究对山羊瘤胃发酵参数、瘤胃微生物种群变化;采用DTAF荧光染料标记细菌(FLB)的一种新方法测定瘤胃原虫吞噬细菌速率和吞噬量的...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 崔晓艳  魏太云  陈新  
马铃薯Y病毒属(Potyvirus)是包含范围广、增殖过程复杂但基因组简单的一类重要病毒,对农业生产造成重大的经济损失。笔者介绍了马铃薯Y病毒属病毒的细胞生物学研究进展,并对potyviruses的复制模型、运动方式和途径等作了相关总结。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 雷曹琦  谢志雄  李小燕  
为了使教学工作紧跟科学发展前沿与热点,该项实验引入DNA损伤修复内容,并使所提出的问题均具有开放性,旨在全方位锻炼学生的自主性与创新性,提高细胞生物学实验教学效果。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 刘玉芝 李文玉 李成叶 刘玉竹 穆维维 邱昌伟  
研究不同剂量、形式、配伍的含硒复合物对犬乳腺癌细胞CTM1211的影响,以探究硒抗癌的有效剂量、形式和机制。用低、中、高剂量的CTX(环磷酰胺,1、2、4 mg/mL)、SSE(亚硒酸钠,10、20、40 μmol/L)、MSA(甲亚硒酸,10、20、40 μmol/L)、MSC(硒代半胱氨酸,200、400、800 μmol/L)、CTX+SSE(0.5 mg/mL+5 μmol/L、1 mg/mL+10 μmol/L、2 mg/mL+20 μmol/L)、CTX+MSA(0.5 mg/mL+5 μmol/L、1 mg/mL+10 μmol/L、2 mg/mL+20 μmol/L)、CTX...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 卢劲晔  顾蓓蓓  卢炜  刘静  
[目的]阐明雷帕霉素(Rapa)对大肠杆菌诱发的乳腺感染的保护作用机制,为临床上寻找乳腺炎防控新方法提供理论依据。[方法]原代培养大鼠乳腺上皮细胞,待细胞贴壁后,试验组采用100 nmol·L~(-1)的Rapa处理4 h后,细胞经感染比(MOI)为10的大肠杆菌处理2 h后用细胞刮刀刮取细胞,收集细胞上清液,用于Toll样受体4(TLR-4)及髓样分化因子(MyD88)蛋白、促炎性细胞因子表达及活性氧(ROS)释放检测。[结果]大肠杆菌刺激原代培养的乳腺上皮细胞后,TLR-4和MyD88蛋白表达显著升高;而Rapa预处理可降低MyD88蛋白表达;同时,大肠杆菌刺激后,乳腺上皮细胞中促炎性细胞因子,如肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的表达及ROS的释放均显著升高。雷帕霉素能下调促炎性细胞因子的释放,显著降低ROS的释放量。[结论]Rapa抑制MyD88信号通路后可减轻大肠杆菌诱导的大鼠乳腺炎症反应。
[期刊] 统计与决策  [作者] 桑秀丽  李哲  吕梁  
为准确对乳腺肿瘤进行分类诊断,减轻病患痛楚,提出基于邻域粗糙集与遗传算法修正的LS-SVM解析模型的乳腺肿瘤分类诊断模型。文章对1569例乳腺癌患者数据在邻域粗糙集约简基础上,建立LS-SVM解析模型,利用遗传算法对LS-SVM解析模型参数修正并将修正后的模型对乳腺肿瘤进行分类诊断,与现有的方法对比发现,组合模型精确度高于LS-SVM、神经网络等模型。基于邻域粗糙集与修正LS-SVM解析模型的乳腺肿瘤分类诊断模型具有较好的临床诊断价值,其应用为乳腺肿瘤的诊断提供了一种新思路。
[期刊] 统计与决策  [作者] 桑秀丽  李哲  吕梁  
为准确对乳腺肿瘤进行分类诊断,减轻病患痛楚,提出基于邻域粗糙集与遗传算法修正的LS-SVM解析模型的乳腺肿瘤分类诊断模型。文章对1569例乳腺癌患者数据在邻域粗糙集约简基础上,建立LS-SVM解析模型,利用遗传算法对LS-SVM解析模型参数修正并将修正后的模型对乳腺肿瘤进行分类诊断,与现有的方法对比发现,组合模型精确度高于LS-SVM、神经网络等模型。基于邻域粗糙集与修正LS-SVM解析模型的乳腺肿瘤分类诊断模型具有较好的临床诊断价值,其应用为乳腺肿瘤的诊断提供了一种新思路。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 郭亮  杜娟  狄和双  李忠浩  王根林  
用细胞流式、台盼蓝染色、免疫组织化学等方法研究单一高温(40℃1 h)或连续高温(40℃1 h.d-1)3~7 d对乳腺上皮细胞细胞周期、凋亡及热休克蛋白(HSP70)表达的影响。结果表明:40℃1 h单一高温处理乳腺上皮细胞后24 h,G2比例极显著高于对照组(37℃)(P<0.05)。结果提示:高温诱...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张书霞  陈万芳  鲍恩东  
用SPF来杭鸡复制MD肿瘤模型 ,取MD肿瘤组织和相同日龄鸡的正常组织 ,制成单个细胞悬液 ,碘化丙锭染色后 ,用流式细胞仪检测细胞DNA含量和细胞凋亡率。结果 :(1)MD肿瘤有二倍体肿瘤和异倍体肿瘤 ,31例MD肿瘤中2 6例为二倍体肿瘤 ,5例是异倍体肿瘤 ;(2 )MD肿瘤细胞动力学特点是 :DNA合成期 (S期 )细胞比例明显增加 ,肾、肝、卵巢和睾丸MD肿瘤细胞S期分别为 12 13 % ,11 30 % ,12 31%和 15 2 6 % ,相应组织细胞依次为 1 37% ,1 2 7% ,1 5 4%和 0 0 7% ,增殖指数 (proliferationindex ...
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