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[期刊] 水产学报  [作者] 宋晓玲  杨绪彤  偲瀚文  王秀华  周进  陈国福  
采用三氯乙酸裂解法分离双歧杆菌细胞壁肽聚糖,得到的肽聚糖约占双歧杆菌细胞干重的8.4%,其中总糖含量约为24.2%,脂肪酸含量约为3.2%,蛋白质含量约为2.4%;氨基酸含量及组分分析结果显示:与N乙酰胞壁酸羧基连接的肽链上的甘氨酸、谷氨酸、赖氨酸和丙氨酸间的摩尔比为1∶0.7∶1.1∶6.7。将所得肽聚糖经超声波破碎后,制成0.1%和1%两种浓度的悬液,并将相应的缓冲液设置为对照组,分别注射给日本对虾和牙鲆,测定其对日本对虾和牙鲆血清酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)和溶菌酶(LSZ)5种免疫酶活性的影响。结果显示:肽聚糖可显著提高日本对虾...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 许第新  姚娟  陈昌福  
将湖北安琪酵母有限公司制备的免疫多糖 (酵母细胞壁 )作为免疫刺激剂注射到克氏原螯虾 (Pro camgbarusclarkii)体内后 ,通过定时测定供试虾血清、肌肉和肝胰腺提取液中的酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶(ALP)和过氧化物酶 (POD)的活性 ,探讨了免疫多糖 (酵母细胞壁 )对克氏原螯虾的 3种免疫相关酶活性的影响。结果表明 ,克氏原螯虾经注射免疫多糖 (酵母细胞壁 )刺激后 ,肝胰腺中的ACP和ALP活性明显增加 ,在注射后 72h ,ACP活性由对照组的 2 79U/ 1 0 0mL提高到 9 1 2U/ 1 0 0mL ,ALP活性由 3 42U/ 1 0 0mL提...
[期刊] 华北农学报  [作者] 余叶红  郭本恒  吴正钧  王荫榆  
探讨干酪乳杆菌LC2W细胞壁组分体外对小鼠巨噬细胞功能的影响。以培养液单纯培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞作为对照,研究干酪乳杆菌LC2W细胞壁主要组分磷壁酸和肽聚糖对RAW264.7细胞代谢水平、吞噬中性红能力及释放NO的影响。不同浓度磷壁酸和肽聚糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞代谢MTT能力、吞噬中性红能力有明显增强作用,并呈一定的剂量效应,在相同质量浓度时,两种细胞壁组分激活巨噬细胞能力无显著差异。同时诱导产生NO量也随着浓度增大而增加,当浓度达到50μg/mL时,磷壁酸诱导能力显现出较高的水平。干酪乳杆菌LC2W细胞壁主要组分磷壁酸和肽聚糖能激活小鼠巨噬细胞RAW264.7细...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 郭玉娟  陈学年  
为了探讨 A_(3α)肽聚糖对灭活嗜水气单胞菌疫苗免疫效果的影响,用添加肽聚糖的饲料投喂注射接 种经甲醛灭活的嗜水气单胞菌菌苗的彭泽鲫,测定鲫鱼白细胞吞噬活性、血清和体表粘液溶菌酶活性、抗体 效价以及活菌攻毒后的免疫保护率。结果表明,肽聚糖与灭活菌苗联合使用,鱼体表粘液和血清溶菌酶活性、 白细胞吞噬活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率显著提高,表明 A_(3α)肽聚糖可增强灭活菌苗的免疫效 果。
[期刊] 海洋水产研究  [作者] 陈国福  宋晓玲  黄倢  周进  王秀华  
为考察A3α-肽聚糖(Peptidoglycan,PG)在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的养成期对其免疫酶活性的影响,设立了连续投喂、间隔投喂和浸浴共6个实验组。连续投喂组中PG的添加量分别为0(对照)、0.01%、0.05%和0.1%;间隔投喂组中PG的添加量为0.05%;浸浴组的给予方式为50mg/ml,3h/次/15d。分别在30、60和90d时,测定对虾体内及血浆上清中的酸性磷酸酶(Acid phosphatase,ACP)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)活性,另外,在60d和90d时,测定对虾血细胞内酚氧化酶(Phenoloxi...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 汪成竹  姚鹃  吴凡  谭斌  熊传喜  陈昌福  
报道了口服免疫多糖(酵母细胞壁)对中华鳖(Pelodiscus sinensis)非特异性免疫功能影响的研究结果。试验中共设6个组,在各组饵料中免疫多糖的添加量依次为每千克鳖重0 mg(对照组)5、00.0 mg(试验I组)、1 000.0 mg(试验Ⅱ组)、1 500.0 mg(试验Ⅲ组)2、000.0 mg(试验Ⅳ组)和2 500.0 mg(试验Ⅴ组)。投喂28 d后,取其血液,测定了中华鳖血液中白细胞的吞噬活性、血清溶菌活力和补体活性。研究结果表明,试验I~Ⅲ组中华鳖白细胞吞噬活性和溶菌酶的活性均显著高于对照组(t测验,P<0.05),而试验Ⅳ组和Ⅴ组与对照组中华鳖血液中白细胞的吞噬活性...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 黄琴  黄怡  崔志文  李雅丽  李卫芬  余东游  
【目的】通过测定先天性免疫效应因子分泌水平的变化,研究鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)体外对巨噬细胞先天性免疫应答调节的影响。【方法】将培养好的鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分为4组,分别用PBS(CT组,对照组)、Escherichia coli K88(EC组)和Lactobacillus rhamnosus(LR组)处理12 h,以及先用Lactobacillus rhamnosus预处理1 h,再用Escherichia coli K88处理12 h(LR-EC组)。试验结束时,收集各组的细胞培养液,用ELISA检测TNF-α、IFN-γ、IL-1β、I...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 吴拥军  王嘉福  尹峻峰  
研究了适宜的双歧杆菌分离方法,从婴儿、成人粪便中分离到36株疑似双歧杆菌,经过属和种的系统生化鉴定,确认为青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadoles-centis)20株和长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)6株。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 王秀华  宋晓玲  黄倢  
按一定梯度配制5种含不同水平肽聚糖制剂的饲料,投喂南美白对虾(Litopenaeusvannamei),35d后取实验对虾血样,用于测定血清中酚氧化酶活力、磷酸酶活力、溶菌活力及超氧化物歧化酶活力。结果显示,饲料中肽聚糖质量分数为500×10-6的实验组,对虾血清中酚氧化酶活力最高,肽聚糖质量分数为2500×10-6的实验组,对虾血清中酸性磷酸酶与碱性磷酸酶活力最高,肽聚糖对对虾的血清溶菌活力影响不明显(P>0.05)。由此表明饲料中添加适量(质量分数500×10-6左右)的肽聚糖制剂可使对虾体液免疫因子总体活力达到较高水平,饲料中肽聚糖制剂含量过高对对虾非特异免疫力的作用效果反而不佳。南美白...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 萨仁娜  佟建明  何春年  高微微  张琪  
【目的】通过研究海带岩藻聚糖及其级分对肉鸡巨噬细胞免疫功能的影响,寻找海带提取物调节肉鸡免疫功能的有效级分,为饲料工业科学使用海带资源提供理论依据。【方法】采用水提醇沉的方法,从海带中提取岩藻聚糖,通过纤维柱和凝胶柱层析,对岩藻聚糖进行分级纯化。体外培养肉鸡腹腔巨噬细胞,在培养液中分别加入岩藻聚糖(200μg·ml-1)和岩藻聚糖5种级分(100μg·ml-1),采用MTT方法检测细胞存活率,采用ELISA检测细胞因子IL-1和TNF-α,同时测定巨噬细胞的吞噬活性等其它免疫指标。【结果】海带岩藻聚糖及其级分显著提高肉鸡腹腔巨噬细胞的吞噬活性,促进巨噬细胞呼吸爆发、NO的产生量和iNOS活性,...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 文榕  周君琳  王倬  张琛  王一丁  
阿尔茨海默症(alzheimer’s disease, AD)的“微生物感染假说”表明,AD的发生发展与脑部真菌感染密切相关。β淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)作为一种“抗菌肽”已被证明能够对多种病原微生物产生抗菌活性,然而其在抗真菌方面的机制仍不明确。本文主要从AD的“微生物感染假说”入手,探究几丁质等细胞壁多糖在Aβ的抗真菌活性中所发挥的作用。Aβ的聚集状态与其抗菌活性存在相关性,为探究不同聚集状态的Aβ与其抗菌活性的关系并尝试解析Aβ抗真菌的具体作用机制和靶点,选择病原真菌白色念珠菌作为研究对象,证实了Aβ中更容易发生淀粉样变性的具有42个氨基酸的Aβ42对白色念珠菌浮游菌和生物膜的代谢活力具有抑制作用,并且其抑菌效果与Aβ42浓度呈现明显的正相关。通过特异性标记真菌细胞壁的钙荧光白(calcofluor white,CFW)染色法验证了Aβ42对白色念珠菌菌丝生成具有抑制作用。体外制备获得了Aβ42的寡聚体及纤维状聚体,并通过透射电镜进行了形态验证,随后将不同聚集状态的Aβ42作用白色念珠菌。结果表明:不同聚集状态的Aβ42其抗真菌活性存在差异,当Aβ42寡聚体转变为纤维状聚体时其抗真菌活性显著降低。采用扫描电子显微镜观察到经过Aβ42处理后的白色念珠菌菌丝体减少、胞外基质丢失且细胞壁结构发生显著变化。为进一步揭示Aβ42抗真菌的相关作用机制,通过硫黄素T(ThT)荧光染色发现白色念珠菌细胞壁多糖中的几丁质和葡聚糖可能与Aβ42结合并影响其聚集,从而发挥其抗真菌的活性。此外,MTT法结果证实了细胞壁多糖的寡聚类似物片段能够通过与Aβ42的竞争性结合削弱Aβ42的抗菌效果。以上结果表明,Aβ可能通过与真菌细胞壁多糖结合并破坏细胞壁完整性发挥其抗菌活性。该研究为AD发病机制中的“微生物感染假说”提供了新的数据支持和理论依据。
[期刊] 水产学报  [作者] 张甜甜  殷海成  黄巍  
为观察不同浓度枯草芽孢杆菌肽聚糖对β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)诱导的鲤幼鱼肠上皮细胞炎性损伤的保护作用,将原代培养72 h(26°C、6%的CO2)的24孔鲤幼鱼IECs培养板随机设为6组,每组4个重复。其中1组为阴性对照,其余5组用浓度为1.0 mg/m L的枯草芽孢杆菌肽聚糖诱导24 h后,分别更换浓度为0(阳性对照)、0.15、0.30、0.45和0.60 mg/m L枯草芽孢杆菌肽聚糖培养液,相同条件培养12、24和36 h,分别检测细胞的抗超氧阴离子(ASA)和抗羟自由基(AH
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈昌福  陈萱  陈超然  梁运祥  
β -葡聚糖广泛地分布于真菌、细菌和植物体内 ,不仅在各种生物体内发挥多种生物学活性 ,而且在各种生物间的相互影响过程中也具有各种各样的功能。笔者简要叙述了 β - 1,3 -葡聚糖的结构及其对动物免疫功能的调节作用。真菌中的 β -葡聚糖分为构成细胞壁的主要成分而存在的不溶性 β -葡聚糖和能释放到菌体外的可溶性 β -葡聚糖。β -葡聚糖的重要特征是以高级结构分子存在 ,可溶性 β -葡聚糖分子主要是以 1重和 3重螺旋结构的形式存在。β -葡聚糖具有多种生物学活性 ,其中部分活性与分子的 3重螺旋结构相关 ,如刺激巨噬细胞释放一氧化氮、激活蛛G因子等 ,也有部分活性与分子的 3重结构无关...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈昌福  姚娟  吴凡华中农业大学水产学院  李兆文  熊传喜华中农业大学水产学院  
将不同剂量的免疫多糖 (酵母细胞壁 )拌在饲料中投喂经过接种灭活柱状嗜纤维菌 (Cytophagacolumnaris)菌苗的异育银鲫 (Carassiusauratusgibelio) ,通过测定受免异育银鲫的凝集抗体效价和血液中白细胞的吞噬活性 ,探讨了口服免疫多糖 (酵母细胞壁 )对受免异育银鲫免疫应答的调节效应。试验结果表明 ,在饲料中添加 15 0 0mg/kg体重的免疫多糖 (酵母细胞壁 ) ,对受免异育银鲫的免疫应答具有较强的调节效应 ,与对照组鱼相比 ,不仅血清中凝集抗体效价有所提高 ,而且血液中白细胞的吞噬百分比 (PP)和吞噬指数(PI)活性明显上升。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 薛春生  何瑞玒  肖淑芹  钮梦燕  孙佳莹  冯辉  
细胞壁降解酶是植物病原菌主要致病因子之一。提取活体内、外辣椒疫霉菌(PhytoPhthora caPsici)产生的细胞壁降解酶(cell wall degrading enzymes,cwdes),对其种类及活性进行分析。结果表明:辣椒疫霉菌在活体内能产生多聚半乳糖醛酸反式消除酶(Pgte)、果胶甲基反式消除酶(Pmte)、多聚半乳糖醛酸酶(Pg)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(Pmg)和纤维素酶(cx)5种cwdes;在活体外产生Pg、Pmg、Pmte和Pgte等4种cwdes;Ph值为5,温度为30℃和反应30min是Pg和Pmg活性的最佳反应条件,Pgte和Pmte酶活反应的最佳条件分别是Ph...
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