- 年份
- 2024(8994)
- 2023(12627)
- 2022(10645)
- 2021(9508)
- 2020(8133)
- 2019(17397)
- 2018(17021)
- 2017(31151)
- 2016(17544)
- 2015(19507)
- 2014(19243)
- 2013(18472)
- 2012(17016)
- 2011(15418)
- 2010(15370)
- 2009(14337)
- 2008(14022)
- 2007(12635)
- 2006(11138)
- 2005(10072)
- 学科
- 济(61814)
- 经济(61702)
- 管理(53632)
- 业(47880)
- 企(39525)
- 企业(39525)
- 方法(25782)
- 数学(22287)
- 数学方法(22038)
- 财(20073)
- 农(18596)
- 制(17862)
- 中国(17652)
- 学(17418)
- 业经(15237)
- 体(13338)
- 贸(12313)
- 贸易(12308)
- 务(12011)
- 易(11991)
- 财务(11978)
- 财务管理(11947)
- 银(11942)
- 农业(11926)
- 银行(11870)
- 融(11368)
- 金融(11361)
- 企业财务(11340)
- 行(11297)
- 环境(10977)
- 机构
- 大学(252620)
- 学院(250870)
- 济(97272)
- 经济(95181)
- 研究(91762)
- 管理(89056)
- 理学(77063)
- 理学院(76104)
- 管理学(74542)
- 管理学院(74116)
- 中国(67314)
- 科学(60902)
- 农(58660)
- 京(53924)
- 所(49108)
- 农业(47135)
- 财(46960)
- 业大(46664)
- 研究所(45081)
- 中心(41080)
- 江(39202)
- 财经(36671)
- 院(33337)
- 经(33330)
- 北京(33117)
- 省(31378)
- 农业大学(30970)
- 范(30527)
- 经济学(29964)
- 师范(29892)
- 基金
- 项目(176244)
- 科学(137087)
- 基金(128090)
- 研究(119203)
- 家(117259)
- 国家(116319)
- 科学基金(96964)
- 社会(75377)
- 社会科(71348)
- 社会科学(71331)
- 省(70268)
- 基金项目(67423)
- 自然(65921)
- 自然科(64435)
- 自然科学(64409)
- 自然科学基金(63315)
- 划(60433)
- 教育(55311)
- 资助(51479)
- 编号(45401)
- 重点(41009)
- 部(38212)
- 创(37384)
- 发(37031)
- 成果(36877)
- 计划(36351)
- 创新(35156)
- 科研(34829)
- 制(34295)
- 课题(33543)
- 期刊
- 济(105056)
- 经济(105056)
- 研究(69809)
- 中国(55623)
- 学报(55499)
- 农(53237)
- 科学(45444)
- 大学(40152)
- 学学(38453)
- 财(37635)
- 农业(35405)
- 管理(33574)
- 教育(26982)
- 融(21943)
- 金融(21943)
- 技术(19483)
- 业(18865)
- 财经(18720)
- 经济研究(17530)
- 业经(17123)
- 业大(16189)
- 经(16080)
- 版(15325)
- 农业大学(13961)
- 问题(13695)
- 科技(13244)
- 贸(11006)
- 技术经济(10541)
- 世界(10331)
- 理论(10329)
共检索到373749条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王水莲 薛立群 邓立新 崔先利 杨利国
【目的】探讨不同剂量的双拷贝抑制素pcISI基因免疫对肉牛生殖能力的影响。【方法】将58头同期发情肉牛随机分为6组,每组肉牛分别注射0.75(T1)、1.5(T2)、2.25(T3)、3.0mg/头(T4)pcISI质粒、3.0mg/头pcMV-S空质粒(C1)和3mL/头生理盐水(C2),初次免疫21d后进行加强免疫,以探讨抑制素pcISI基因疫苗对肉牛卵泡和黄体发育的影响。【结果】4个剂量组的大卵泡数均高于对照组,除了T1外,其它3个剂量组均与对照组差异显著(P<0.05);T3和T4的中卵泡数均高于对照组,且差异显著(P<0.05);T3和T4的小卵泡数均高于对照组,且差异显著(P<0....
关键词：
抑制素 基因免疫 卵泡 黄体 肉牛
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王水莲 杨利国 薛立群 曹迎春 陈小军
为探讨佐剂、质粒纯度和免疫次数3种因素对抗抑制素抗体效价的影响,以分析抑制素基因免疫是否使肉牛产生免疫应答,利用已构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI对肉牛进行了免疫试验.结果表明,抑制素pCISI基因免疫肉牛后佐剂处理组比无佐剂组免疫效果明显.对抗体P/N(待测血样的吸光值P与阴性血样吸光值N的比值)来说,普鲁卡因佐剂显著优于脂质体,但就抗体阳性率来说,普鲁卡因和脂质体差异不显著.无论是抗体P/N值还是抗体阳性率,高纯度组的效果略高于低纯度组,但差异不明显.随着免疫次数的增加抗体P/N值和抗体阳性率均升高,两者差异显著,说明了抑制素基因免疫肉牛可诱导产生抗抑制素抗体,纯度对抗体的产生和抗体...
关键词：
抑制素基因 免疫 抗体 肉牛 反应性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
姜卫星 刘友生 薛立群 陈小军 杨利国 王水莲
为探讨双拷贝抑制素pcISI基因疫苗纯度和剂量对肉牛黄体发育的影响,将150头同期发情的南阳黄牛随机分为8个试验组和2个对照组,试验组用pcISI按2种纯度、4种剂量(0.75、1.50、2.25、3.00 mg/头)进行免疫处理,2个对照组分别用空质粒和生理盐水进行处理;初次免疫21 d后进行加强免疫。结果表明:无论用高纯度还是低纯度疫苗免疫,2.25 mg/头剂量处理对黄体的作用效果最明显,且抗体水平与黄体发育密切相关,2.25 mg/头抑制素融合表达质粒组的黄体显著大于0.75 mg/头组(P<0.05),抗体阳性牛两侧黄体显著比抗体阴性牛的大(P<0.05)。
关键词：
肉牛 抑制素 基因免疫 黄体发育
[期刊] 中国农业科学
[作者]
岳群华 袁建龙 郝斐 靳木子 王景园 杨文亮 刘东军 仓明
【目的】构建骨骼肌特异表达目的基因卵泡抑制素(follistatin,FST)的真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red,分别转染到不同细胞系中,检测FST及下游基因在RNA和蛋白水平的表达情况,同时测定骨骼肌特异启动子SP和α-actin的启动效率,以研究FST的特异表达对肌肉发育的影响。【方法】利用脂质体分别将真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red转染到绵羊胎儿成纤维细胞(SFFCs)、骨骼肌卫星细胞(SMSCs)和SMSCs诱导肌管中,获得转基因细胞;对获得细胞的生长状况、细胞周期、细胞形态大小以及目的基因和下游基因的表达情况,分别用流式细胞仪、实时定量...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王进荣 杨利国 王元兴
用人工合成人抑制素α亚基 (1 2 6Gly .Tyr)片段与KLH连接作完全抗原免疫产蛋三黄母鸡 ,用放免法测定排卵周期外周血中雌二醇和孕酮的水平 ,观察产蛋率的变化。宰杀后卵巢称重 ,各期卵泡分类计数。结果免疫组产蛋率、大白泡、小白泡和小黄泡数比对照组高 (P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孟金柱 伍春亚 潘春威 安清明 吴震洋 赵园园
[目的]探究牛卵巢小黄体细胞(SLCs)和膜细胞(TCs)中的差异表达基因,进而筛选与TCs黄体化密切相关的基因,为深入研究SLCs、TCs特异性及TCs向SLCs分化的机制提供参考。[方法]利用R软件limma包中的DESeq2,筛选GEO芯片数据库GSE83524数据集TCs和SLCs中的差异表达基因,再用goseq软件对筛选出的差异表达基因进行GO功能富集分析,用kobas软件进行KEGG信号通路分析,使用String结合Cytoscape软件进行PPI网络互作分析。采集思南黄牛颗粒细胞(GCs)和TCs,以RPLP0作为内参基因,用荧光定量PCR法对筛选出的与TCs增殖及黄体化相关的基因进行验证。[结果]共筛选获得237个差异表达基因,其中表达上调的基因115个,表达下调的基因122个。GO功能分析结果显示,参与生物学过程的有147个基因,占差异表达基因总数的53.6%,分别富集于30个组;参与细胞组分的有125个基因,占差异表达基因总数的21.4%,分别富集于12个组;参与分子功能的有98个基因,占差异表达基因总数的25.0%,分别富集于14个组。KEGG分析共发现17条通路,其中可能与卵泡内膜细胞黄体化相关的通路为FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1等4个基因参与的卵巢类固醇生成通路。经过PPI网络互作分析,筛选出了前10位的hub基因。荧光定量PCR分析结果显示,FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1、BUB1B和KIF20A在SLCs和TCs中的转录水平与GEO芯片数据结果一致,表现为FSHR、CYP19A1和CYP17A1在TCs中的表达量极显著高于其在SLCs中的表达量(P<0.01),PLA2G4A、BUB1B和KIF20A在TCs中的表达量亦显著高于其在SLCs中的表达量(P<0.05)。[结论]差异表达基因FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1、BUB1B和KIF20A在牛优势卵泡TCs增殖分化形成黄体的过程中发挥关键作用。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
施振旦 李明 刘丽 黎敏义 秦清明
【目的】通过免疫抑制素和卵泡抑素促进精子发生,在夏季热应激状态下保持公猪精液品质。【方法】在夏季热应激状态下对精液品质出现下降的成年种公猪单独免疫抑制素、或联合免疫抑制素α亚基和卵泡抑素重组蛋白(n=6)3次,每次间隔21 d;然后在9周试验期间定期采血测定血液抗体效价、FSH和睾酮浓度,每周采精观察精子活力和精子密度作为精液品质指标。【结果】抑制素单独免疫、抑制素和卵泡抑素联合免疫都使猪血液中抗抑制素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01),联合免疫也使猪血液中抗卵泡抑素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01)。单独免疫或联合免疫都显著升高了血液FSH浓度;联合免疫还升高了血液睾酮水平。...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张红琳 杨利国 王诚
采集猪卵泡液 ,用 70 %饱和度硫酸铵溶液沉淀后 ,分别过SephadexG 2 0 0柱和SephadexG 10 0柱 ,最后用磁珠免疫亲和层析法进一步提纯 ,使抑制素纯度从 12 4 μg·mg-1升至 39 4 μg·mg-1。PAGE电泳分析证明 ,提纯物只出现一条相对分子质量为 32 0 0 0的带 ,SDS PAGE电泳分析发现有两条相对分子质量分别为 14 0 0 0～ 15 0 0 0和 170 0 0～ 180 0 0的带 ,即β、α亚基。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王水莲 薛立群 陈小军 杨利国
选择40头南阳黄牛,用3.0 mg抑制素基因重组质粒(pCIS,免疫组,n=30)或同剂量的生理盐水(对照组,n=10)间隔21 d注射2次,分别在首次免疫当天、首次免疫后第10天和第21天、加强免疫后第10天和第45天收集血清,应用放射免疫法(RIA)测定处理后不同时期血清中激素水平。结果表明:在5个采血时间点内,加强免疫后第10天抗体阳性牛比率最高,为37.5%,与其他采血时间点有显著差异。免疫组促卵泡素(FSH)平均含量比对照组高,但差异不显著;17-β雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平在加强免疫后2组有显著性差异。另外,抑制素抗体阳性牛的FSH、E2和P4比阴性牛高,但差异不显著。这些结...
关键词：
抑制素 基因免疫 肉牛 生殖激素
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张红琳 杨利国 李斌 茆达干
通过分离纯化卵泡抑制素受体,确定其受体类型,旨在为抑制素的作用机制研究奠定基础。采集30头长白猪垂体组织制备膜蛋白,用亲和层析法从该蛋白组分中分离、纯化出抑制素受体。SDS-PAGE结果发现该受体提取物中有6种蛋白,分子质量从14 ku到130 ku不等,表明抑制素受体可能不是特异性的单一受体,而是共受体。改良的ELISA结果证实,该受体提取物特异性活性为99 U/mg,能与抑制素结合,且与剂量呈正相关(R=0.993)。
关键词：
猪 抑制素 亲和层析法 受体
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
崔先利 杨利国 茆达干 王水莲 李复兴
为增强肉牛的繁殖力,应用本实验室构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI,提纯后辅以不同的免疫佐剂注入96头母黄牛体内,采用AMI-900兽用B超对其中84头发情牛进行卵泡检测,并对其中78头妊娠牛进行早期胚胎数目检测。结果发现:抑制素质粒pCISI能促进双大卵泡发育(80.95%,68/84),诱发排双卵(60.71%,51/84),诱导黄牛孪生(41.03%,32/78);普鲁卡因佐剂(48.78%)比脂质体(32.43%)效果明显。研究表明,抑制素基因免疫能有效提高黄牛的繁殖率。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李超 梅承 朱玉林 薛建华 钟寿坤 麻柱 张胜利 施振旦
【目的】研究免疫抑制素提高奶牛超数排卵的效率以提高胚胎产量。【方法】免疫组首次免疫抑制素α亚基融合蛋白(1mg·头-1)与白油佐剂混合乳液,首免后第28、56d分别进行2次加强免疫,剂量为0.5mg·头-1。对照组同时注射生理盐水与白油佐剂的混合乳液。在第二次加强免疫后10d,采用FSH四日递减法进行超排处理,并根据母牛发情表现进行人工授精,试验一使用常规冷冻精液输精,试验二使用分离的雌性精子输精,输精后第7天进行冲胚。【结果】主动免疫抑制素能够有效提高血液抗抑制素抗体效价。试验一,免疫抑制素组头均获胚/卵总数为(15.8±2.8)枚,显著高于对照组(8.3±1.5)枚(P<0.05);头均可...
关键词：
奶牛 免疫抑制素 超数排卵 胚胎产量
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
牛树理 叶荣 杨利国
为研究中和内源抑制素对排卵的影响，用猪精液抑制素粗品，对产后２￣５个月的２５头母黄牛进行主动免疫。粗制品用福氏完全佐剂乳化后间隔２０ｄ免疫两次。在配种后第１０ｄ对１１头发情母牛经直肠触摸卵巢，同时颈静脉采血。根据血清孕酮水平与排卵数之间的线性回归关系测定血清孕酮，采用直肠触摸黄体数推算排卵率。排２个以上卵的母牛占３６％（４／１１）。结果表明，用猪精液抑制素主动免疫黄牛可以提高其排卵率。
关键词：
抑制素 猪 精液 主动免疫 黄牛
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王立斌 王强龙 潘阳阳 黄振华 赵天 丁天翊 刘敏清 崔燕 余四九
【目的】研究地西泮结合抑制剂(diazepam binding inhibitor,DBI)在牦牛不同大小卵泡中的表达水平与定位,探讨DBI蛋白在牦牛卵泡发育过程中的调控作用。【方法】采集牦牛卵巢组织,分离不同大小(直径<3 mm,直径3～8 mm,直径>8 mm)的卵泡。采用实时荧光定量方法(q RT-PCR)检测DBI基因m RNA在牦牛不同大小卵泡中的相对表达量,并利用蛋白免疫印迹技术(Western-blotting,WB)检测DBI蛋白的表达情况。采用免疫组织化学方法(immunohisto chemistry,IHC)定位DBI蛋白在雌性牦牛完整成熟卵泡中的分布情况。采用免疫荧光技术(immunofluorescence,IF)检测DBI在牦牛卵母细胞中的定位。【结果】DBI基因m RNA和DBI蛋白在牦牛不同大小卵泡中均表达,但表达水平存在显著差异(P<0.05),表达量随着牦牛卵泡直径的增大而显著上升。DBI蛋白在牦牛成熟卵泡中的颗粒细胞、卵丘细胞均有分布;在卵母细胞中主要定位于细胞质、细胞核。【结论】DBI在类固醇激素合成与卵母细胞成熟过程中具有重要作用。
[期刊] 华北农学报
[作者]
李晟阳 罗光彬 张晓华 何丽华 姚汝强 纪英卓 郭建华
探讨了促性腺激素(FSH、LH)对猪卵母细胞体外成熟的影响,最终找到了其合理的使用剂量。在成熟液中添加LH浓度分别为1,5,10 IU/mL时,与没有添加FSH与LH的对照组(15.9%)相比,成熟率有显著提高,成熟率分别为49.1%,30.0%,36.3%。LH浓度为1 IU/mL的实验组成熟率最高,显著高于对照组(p
关键词：
猪卵母细胞 体外成熟 FSH LH
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
