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[期刊] 西南农业学报  [作者] 宋爽  严亮  王宣军  郝淑美  盛军  
本文采用双向电泳技术,鉴定昆明鼠在饮用普洱茶后肝脏蛋白质组变化。结果表明,采用pH3~10胶条未达到理想的分离效果,在采用窄范围pH 4~7胶条电泳后得到16个差异蛋白,其中15个蛋白经质谱鉴定得到蛋白的信息,主要尿蛋白(Major urinary protein,MUP-1)表达显著上调,该蛋白可以作为能量代谢的生物标志物,并在近年来被证明具有调节代谢的作用。饮用普洱茶后小鼠肝脏中MUP-1上调,说明普洱茶在小鼠糖代谢中具有促进作用,这些结果从另一个角度解释过去研究中普洱茶保健作用的机理。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 安娜  赖钟雄  郭志雄  
以龙眼品种红核子LC2胚性细胞系为材料,进行体细胞胚胎(简称体胚)发生及其同步化调控,获取体胚发生过程中各个主要发育阶段的培养物(胚性愈伤组织、球形胚、子叶形胚、早期成熟胚、中期成熟胚、晚期成熟胚),采用双向电泳对体胚发生过程中特异表达蛋白进行分析.结果表明:(1)龙眼胚性愈伤组织中,pI为4-5的酸性蛋白表达种类最多,在体胚发育的过程中逐渐消失,相反,pI为5-6的微酸性蛋白的表达逐渐增多;(2)体胚发育后期,尤其是成熟胚晚期,分子质量大的蛋白大量减少,分子质量较小的蛋白增多并逐渐积累;(3)虽然在各个发育阶段都会出现一些新的特异蛋白,但是没有改变蛋白质种类逐渐减少的趋势;(4)发现了一些有...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 易克  田云  徐向利  卢向阳  萧浪涛  
为探讨水稻灌浆期间与籽粒充实相关蛋白表达的变化,建立了一套适于水稻种子胚乳蛋白双向电泳分析技术,探讨了胚乳蛋白的提取、纯化以及双向电泳的一些关键技术.结果表明,通过乙醇铵沉淀、高压等电聚焦和两步平衡等方法可以获得较好的分析结果,获得胚乳蛋白斑点数约 350 个,等电点范围在 3.0~9.0,其中大部分集中在 4.0~7.0.
[期刊] 西南农业学报  [作者] 朱佳杰  沈夏霜  付强  周宇  谭芸  甘西  
以吉富罗非鱼为研究对象,通过对其肝脏蛋白质的提取方法、等电聚焦程序和IPG胶条pH选择这几个关键环节的优化探索,建立了吉富罗非鱼肝脏蛋白质组双向电泳技术体系。结果表明:①采用液氮研磨法比匀浆器匀浆法提取蛋白质的效果更好;②聚焦时延长除盐时间至10 h,同时升高电压至8000 V,可获得清晰的电泳图谱;③通过双向电泳检测到吉富罗非鱼肝脏的蛋白点主要分布于pH值4.0~7.0之间。该技术体系的建立为今后开展罗非鱼蛋白质组学的进一步研究奠定了基础。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 谷瑞升  刘群录  陈雪梅  蒋湘宁  
对蛋白提取方法进行改良并引用毛细管等电聚焦技术,不仅大大降低了木本植物体内次生代谢物质对双向电泳结果的干扰,明显改善了分析效果,而且又经济、快捷,获得了分析木本植物蛋白较好的双向电泳方法.在对毛白杨叶片和胡杨组织分析中获得较满意的结果.
[期刊] 西南农业学报  [作者] 付小康  常纪苹  宋蕊芳  邢小龙  胡德升  胡彦民  钟立华  
实验以玉米自交系齐319幼胚进行愈伤组织的诱导及继代培养,提取继代5次和10次的胚性愈伤组织中可溶性蛋白质进行双向电泳。运用2-D凝胶图像分析软件PDQuest进行分析,探究玉米胚性愈伤组织长期继代培养的分子调控机理。结果表明,长期继代10次相比5次共有20个有明显差异的蛋白点,其中14个表达下调,6个表达上调。通过质谱分析及搜索数据库鉴定出14-3-3-like protein GF14-12和ferritin-1,chloroplastic 2个蛋白,可能是愈伤组织长期继代后细胞生长代谢途径受到影响的
[期刊] 西南农业学报  [作者] 余功明  胡春锦  魏源文  史国英  岑贞陆  覃丽萍  黎起秦  黄思良  
为建立水稻纹枯病菌菌体蛋白的双向电泳技术,获得分辨度高、重复性好的双向电泳图谱。采用了酚抽提法、TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法进行水稻纹枯病菌菌体蛋白质的提取,利用17 cm、pH 5~8的IPG胶条对样品进行双向电泳,用PDQuest 8.0软件对电泳图谱进行分析,确定电泳的最佳参数。结果显示:采用17 cm、pH 5~8的IPG胶条能得到较好的双向电泳图谱;同一样品的三种不同蛋白提取方法(酚抽提法、TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法)分别得到1278、885、827个蛋白质点。酚抽提法能有效去除样品中的盐分和小分子的干扰,得到背景清晰的蛋白图谱;TCA/丙酮沉淀法和丙酮沉淀法所得图谱有一定的杂...
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 谢进  田晓明  刘淑欣  侯佳音  盖颖  蒋湘宁  
本实验以毛白杨芽为实验材料,采用Tris-酚法、三氯乙酸-丙酮法和三氯乙酸-丙酮+Tris-酚法对其蛋白质提取方法进行比较,采用双向电泳分离蛋白质,通过PDQuest软件和质谱对这3种提取方法得到的双向电泳胶进行分析。结果显示,三氯乙酸-丙酮法得到的蛋白点数量为231±4,得到的鲜样中的总蛋白质含量为(3.57±0.618)mg/g,均高于其他两种提取方法,并且所得到的双向电泳胶更清晰,为毛白杨芽蛋白质提取的最适方法。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 刘家奇  邵宛芳  赵宝权  秦廷发  黄业伟  侯艳  
关键词:
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张瑜  郭荔  豆丹丹  任伟龙  王丽平  
[目的]P-糖蛋白(P-gp)是影响底物药物口服生物利用度至关重要的因素。本试验旨在探究脂多糖(LPS)对猪肝脏、肾脏和小肠组织中P-gp定位和表达的影响,为临床合理有效用药提供理论支持。[方法]采用免疫组织化学SABC法结合DAB显色技术,用抗P-gp的单抗C219对相关组织的P-gp进行定位,进一步采用Image-ProPlus软件对猪肝脏、肾脏、空肠和回肠中P-gp的表达进行半定量分析,检测LPS处理对P-糖蛋白定位和表达的影响。[结果]猪肝脏组织中的P-gp均主要分布于肝细胞间的胆小管细胞膜上,LPS处理3h后P-gp表达量显著上升(P<0.05),6h后可降至正常水平。猪肾脏中P-g...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 翟旭光  潘志芬  商闯  邓光兵  余懋群  
为了研究燕麦麦谷蛋白亚基组成及遗传多样性,本研究采用SDS-PAGE电泳方法对71份不同染色体组型的燕麦材料的麦谷蛋白,进行了电泳分析,并以中国春为参照,按条带迁移距离大小命名,分析条带多态性并以燕麦麦谷蛋白点泳图谱为依据对供试材料进行聚类分析。电泳结果显示燕麦麦谷蛋白主要集中在分子量较低的C区,高分子量麦谷蛋白没有检测到条带。71份燕麦材料共产生20种不同条带,条带g和条带i比较保守,出现的频率分别为64.8%和85.9%。各种条带组合形成62种不同的组合带型,多态性为87.3%。聚类结果显示燕麦麦谷蛋白的电泳谱型与材料的染色体组有很大关系,具有相同染色体组型的同种属的燕麦材料一般先聚为一类...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 宋志东  王际英  李培玉  乔洪金  张利民  郝甜甜  
为揭示饲料中添加豆肽对星斑川鲽(Platichthys stellatus)幼鱼肝脏代谢产生的影响,利用大豆蛋白肽替代24%的鱼粉并以全鱼粉饲料为对照形成两种等氮等能的实验饲料,粗蛋白为(43.98±0.14)%、能量为(19.89±0.08)k J/g。将240尾幼鱼分为两组,每组3个平行(40尾/桶),分别投喂两种饲料50 d后,提取肝脏蛋白进行双向电泳并用PDQuest分析差异蛋白。结果显示,在p H 4-7、分子量14.4-97.4 k Da范围内,共检测到448-470个肝脏蛋白点,有14个蛋白的表达呈两倍以上的差异,其中3个为结构蛋白(中间纤维蛋白、II型细胞骨架8-样异构体X2、...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 姜雪元  张树坤  张源淑  
采用双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)结合MAIDI-TOF/TOF质谱方法分析不同精粗比日粮条件下肝脏蛋白/酶表达谱的差异,探讨不同精粗比日粮条件下肝脏糖脂代谢与乳脂肪合成的关系及可能机制。8只健康的泌乳中期山羊随机分为2组,日粮精粗比分别为4∶6(低精料)和6∶4(高精料),采用2×2拉丁方设计,2次重复。取乳样,测定产奶量和乳中甘油三酯(TG)的含量,并进行活体肝脏穿刺取样,应用双向电泳技术对肝脏样品进行蛋白表达谱分析。试验结果表明:与低精料组相比,高精料组山羊日平均产奶量显著增高(P<0.05),而乳中TG含量显著降低(P<0.05)。...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 黄慧  屈常林  高洪  赵汝  严玉霖  杨建发  陈培富  邹丰才  
为研究内毒素(ET)致大鼠肝细胞凋亡变化、对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A(CA)的保护效应。将试验动物随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、ET组(Ⅱ组)和CA保护组(Ⅲ组)。3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏检测肝细胞凋亡情况和Caspase-3蛋白的表达情况。结果表明,肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白的表达成正相关的关系。ET可上调Caspase-3蛋白在肝脏的表达,诱导肝细胞凋亡,最终导致肝脏受损;而CA则能明显下调Caspase-3在肝脏的表达,抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤具有显著的保护效应。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 秦廷发  邵宛芳  肖蓉  杨兰兰  王国成  侯艳  
本试验主要研究普洱茶对试验大鼠血清中骨代谢生理生化指标的影响。选择Wistar雄性大鼠100只,按体重随机分成正常对照组,普洱生茶、熟茶和绿茶组,共10组,低、中、高剂量分别为0.5、1.0、2.0 g/(kg·dw)。灌胃90 d后,采血牺牲试验大鼠,采用ELISA方法检测大鼠血清中骨代谢的生化指标。与对照组相比,除高剂量熟茶组外,其它试验组血清甲状旁腺素含量无显著性差异(P>0.05);除中剂量熟茶组和中、高剂量绿茶组外,其它试验组抗酒石酸酸性磷酸酶活性与对照组相比无显著性差异(P>0.05);各试验组血清胶原氨基末端肽和雌二醇的含量均无显著性差异(P>0.05)。说明在本试验条件下,本批...
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