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[期刊] 中国农业科学
[作者]
张磊 王燕燕 周占琴 李广 付明哲 张锁良 尹海科 张胜刚 任宝华
【目的】探讨卵巢摘除对母山羊产肉性能,血清中生长激素(growth hormone,GH)水平以及背最长肌、股二头肌、肝脏、脂肪组织中生长激素受体基因(growth hormone receptor,GHR)表达的影响,揭示摘除母山羊卵巢提高其育肥效果的原因。【方法】将体重相近的5月龄布尔山羊杂种(布尔山羊♂×关中奶山羊♀)母羊40只作为研究对象。试验开始前一个月,对所有羊只进行驱虫和防疫工作。试验开始时将母羊随机分为处理组和对照组,每组20只,摘除处理组母羊的卵巢,对照组不摘除。在试验的第0,10,20,30,40和50天早晨8:00对所有试验羊进行空腹采血,立即分离血清,采用羊生长激素酶联...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
宋天增 冯静 陈晓英 马金英 徐亚欧 张四中
研究卵巢摘除对育肥藏北山羊生长激素(GH)水平和生产性能的影响。试验用羊为2岁龄藏北母山羊,选择60只体重相近的母山羊,随机分为空白对照组和卵巢摘除试验组2组。在试验期间,2组每日均按照农牧民放牧习惯自由放牧,晚上给予补饲精料颗粒料添加量为280 g/d,燕麦青干草为自由采食;分别在母羊卵巢摘除后第0、7、14、21、28、35、42、49和56日的早晨8:00空腹称重并颈静脉采血,立即分离血清,按照羊生长激素酶联免疫分析试剂盒说明书,测定血清中GH水平;饲养56 d后,随机在试处理组和对照组中分别屠宰1
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
万露 彭方 张磊 周占琴 谢东淇 白前前 鲍文 张爱平 袁生宇
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王燕燕 陈福财 张磊 吴森 周占琴 付明哲 张锁良 尹海科 张胜刚 任宝华
【目的】研究卵巢摘除对山羊羔产肉性能的影响。【方法】将40只全舍饲条件下体质量相近的母羔羊随机分为处理组和对照组,每组20只,在试验开始时处理组母羔羊摘除卵巢,对照组未摘除。在试验0d和50d早晨对2组羔羊空腹称体质量,并在试验0,10,20,30,40和50d早晨对2组羔羊空腹采血,测定血清生长激素(GH)水平和血清生长抑素(SS)水平。饲养50d后,分别从处理组和对照组随机选取5只母羔羊屠宰,测定其胴体质量、屠宰率、净肉率、水分、粗脂肪和粗蛋白含量等指标。【结果】处理组羔羊平均日增体质量为128g,比对照组高13g,且差异显著(P<0.05)。处理组羔羊血清GH质量浓度从20d开始一直呈上...
关键词：
卵巢摘除 母山羊羔 产肉性能
[期刊] 西南农业学报
[作者]
曹冶 赵素君 谢晶 王秋实 廖党金
【目的】本研究旨在搞清楚金堂黑山羊FSH信号调节机制的作用模式。【方法】将10只生殖周期相同的健康空怀的金堂黑山羊成年母羊随机分成2组,一组为对照组,一组为试验组。在发情后的第2天对试验组金堂黑山羊进行FSH肌肉注射100IU,并在注射24 h后,摘取金堂黑山羊的卵巢;对照组发情后的第3天摘取卵巢。分别提取它们的总RNA,进行表达谱测序。【结果】经测序分析:对照组和试验组分别得到有效序列30 906 038和27 763 272条;经统计分析后,得到归一化序列30 216 946和27 124882条,与
关键词：
金堂黑山羊 FSH信号 卵巢 基因表达谱
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孙健红 赵慧英 苏正元 尹宝英 张涌
应用免疫组织化学SP法检测γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)在不同生殖周期奶山羊卵巢中的表达情况,探讨IFN-γ的变化规律及其与生殖的关系。结果显示,在间情期三级卵泡颗粒细胞胞膜、发情期三级卵泡和成熟卵泡颗粒细胞、妊娠期卵泡颗粒细胞、妊娠7周粒黄体细胞、妊娠12,16和20周膜黄体细胞胞核中均有IFN-γ的表达;在三级卵泡和成熟卵泡的卵泡液中也有IFN-γ的表达;妊娠12,16和20周粒黄体细胞上IFN-γ表达量很低。IFN-γ可能在不同类型的细胞上发挥着不同的作用。
关键词：
山羊 IFN-γ 卵巢 颗粒细胞 黄体
[期刊] 华北农学报
[作者]
王峰 刘永斌 荣威恒 田春英 达赖
为阐明BMPRIB基因在牛的卵泡发育和分化中的作用及其分子机理,首先根据其他物种BMPRIB基因的保守序列设计特异性引物,从蒙古牛卵巢中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增出蒙古牛BMPRIBcDNA序列;将此片段克隆到pGM-T载体中,提取重组质粒,经PCR鉴定和DNA序列测定分析验证;符合BMP家族基因结构特征,然后根据此序列构建cRNA探针,利用原位杂交技术检测牛卵巢BMPRIB基因mRNA的表达情况。原位杂交结果显示,牛BMPRIB基因,在初级卵泡和次级卵泡早期表达,在颗粒细胞中表达,在次级卵泡晚期也有表达。
关键词：
牛 BMP15 RT-PCR 原位杂交
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王维民 胡庭溪 李发弟 马友记 樊红樱 潘香羽
【目的】分离鉴定绵羊视黄酸受体-γ(Retinoic acid receptor gamma,RARG)基因,分析该基因的分子特征,研究其在发情周期不同阶段卵巢中的表达差异。【方法】选取年龄和体况相近、健康的甘肃高山细毛羊周岁母羊8只,通过同期发情处理,根据卵巢生理状态,将其分为两组:黄体期组和卵泡期组,各4只,屠宰后,采集卵巢组织,以周岁母羊卵巢组织RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增绵羊RARG基因并克隆到pMD18-T载体中进行测序验证。利用ORF Finder和DNAStar等生物信息学软件分析绵羊RARG基因的理化性质、同源性和预测结构域和功能。利用Q-PCR技术,检测绵羊RARG...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王希春 徐雪松 李莹 刘智 刘莉 陈亮 吴金节
为研究半胱胺对仔猪血清促生长类激素水平及不同组织中生长激素受体(GHR)表达的影响,选取临床检查健康的90头新生"杜×长×大"三元杂交仔猪,平均体重为(4.56±0.18)kg,随机分成3组,每组30头。在14日龄,分别给对照组、试验Ⅰ组、Ⅱ组仔猪饲喂基础日粮、基础日粮+120 mg/kg半胱胺及基础日粮+200 mg/kg半胱胺。试验期31 d。在14、24、32和45日龄,从每组分别选取10头仔猪经前腔静脉采血,测定血清GH、SS、T3、T4和IGF-Ⅰ水平。在45日龄时,每组选6头仔猪,屠宰取样,采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,定量分析组织中GHR mRNA的相对丰度。结果...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
庞训胜 王子玉 应诗家 张艳丽 闫益波 吴勇聪 孟立 王锋
为了从单卵泡水平建立非闭锁大小卵泡颗粒细胞基因表达的消减文库,选择繁殖性能正常、空怀高繁殖力黄淮山羊2只,以氯前列烯醇处理40h后取卵巢,计数卵泡并测量卵泡直径,钝性分离采集卵泡颗粒细胞,置于液氮内保存,取样后的卵泡部分组织采用原位缺口末端标记法(TUNEL)进行闭锁鉴定。选择直径6和4mm非闭锁卵泡,提取颗粒细胞mRNA,扩增cDNA,监测抑制消减杂交及其文库构建的试验环节。结果表明:消减文库的阳性克隆测序成功率100%,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,发现12个全新表达序列标签;应用RT-PCR对已知序列的抑制素βA亚基基因(INHBA)和谷胱甘肽S-转移酶A1基因(GS...
关键词：
山羊 卵巢 颗粒细胞 基因表达 消减文库
[期刊] 中国农业科学
[作者]
祁云霞 刘晓芳 张萍 何小龙 邢玉梅 达赖 特日格勒 刘永斌 荣威恒
【目的】全面了解绵羊卵巢组织mi RNAs表达情况,分析产单羔和产双羔绵羊卵巢mi RNAs表达差异,从而为探讨mi RNAs在繁殖力调控中的作用提供依据。【方法】应用多物种mi RNA芯片对绵羊卵巢组织mi RNA进行表达分析。首先选择经产单羔羊和双羔羊,发情后采集双侧卵巢提取总RNA,分离小片段RNA与mi RNA芯片杂交,然后进行数据分析获得绵羊卵巢组织mi RNAs表达谱;利用生物信息学软件,以q-value≤5%,且Fold Change≥2或≤0.5的标准筛选单羔羊和双羔羊卵巢差异表达mi RNAs,并利用q-PCR技术验证芯片结果;分别采用micro T和mi RDB两种方法预测...
关键词：
绵羊 卵巢 mi RNAs 芯片
[期刊] 中国农业科学
[作者]
祁云霞 刘晓芳 张萍 何小龙 邢玉梅 达赖 特日格勒 刘永斌 荣威恒
【目的】全面了解绵羊卵巢组织ｍｉ ＲＮＡｓ表达情况，分析产单羔和产双羔绵羊卵巢ｍｉ ＲＮＡｓ表达差异，从而为探讨ｍｉ ＲＮＡｓ在繁殖力调控中的作用提供依据。【方法】应用多物种ｍｉ ＲＮＡ芯片对绵羊卵巢组织ｍｉ ＲＮＡ进行表达分析。首先选择经产单羔羊和双羔羊，发情后采集双侧卵巢提取总ＲＮＡ，分离小片段ＲＮＡ与ｍｉ ＲＮＡ芯片杂交，然后进行数据分析获得绵羊卵巢组织ｍｉ ＲＮＡｓ表达谱；利用生物信息学软件，以ｑ－ｖＡｌｕｅ≤５％，且Ｆｏｌｄ ＣｈＡＮｇｅ≥２或≤０．５的标准筛选单羔羊和双羔羊卵巢差异表达ｍｉ ＲＮＡｓ，并利用ｑ－ＰＣＲ技术验证芯片结果；分别采用ｍｉＣＲｏ Ｔ和ｍｉ ＲｄＢ两种方法预测．．．
关键词：
绵羊 卵巢 mi RNAs 芯片
[期刊] 中国农业科学
[作者]
耿建军 郭青云 庞亚妙 白俊明 贺俊平
【目的】研究生长分化因子9(growth differentiation facter9,GDF9)的潜在靶蛋白Claudin-11在成年羊驼卵巢中的表达与定位,探索Claudin-11对促进卵泡发育、调节排卵的作用机理。【方法】以成年雌性羊驼为研究对象,用RT-PCR技术分析潜在靶蛋白Claudin-11在成年羊驼卵巢中的表达,并使用实时荧光定量PCR技术分析其相对表达量,采用免疫组织化学法和western blotting法对Claudin-11在成年羊驼卵巢中的表达进行定位分析。【结果】荧光定量PCR结果显示,Claudin-11在羊驼卵巢的初级卵泡中弱表达于次级卵泡;westernbl...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杜学海 曹蕊 萧鹏 李伯江 吴望军 刘红林
为研究低氧诱导因子1α(HIF1α)及其下游基因胰岛素样生长因子2(IGF-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在注射孕马血清促性腺激素(PMSG)(促排组)的促排卵巢与注射生理盐水(对照组)的普通卵巢组织中的mRNA转录水平,构建小鼠HIF1α基因真核表达载体,观察其转染的小鼠颗粒细胞中HIF1α基因的表达情况,以探讨HIF1α与小鼠卵泡发育的关系。用荧光定量PCR检测不同处理组织中HIF1α、VEGF及IGF-2 mRNA转录水平,免疫组化技术定位HIF1α在卵泡中的表达,基因重组技术构建HIF1α-pcDNA3.1真核表达载体并将其转染小鼠颗粒细胞,荧光定量PCR与Western blot...
[期刊] 华北农学报
[作者]
何小龙 刘永斌 王峰 田春英 达赖 荣威恒
在单、双羔蒙古羊卵巢组织抑制性消减杂交的基础上,以其差异表达片段ADAMTS1基因序列为种子序列,采用GenBank的BLAST检索系统首先对蒙古羊的ADAMTS1基因序列片段进行了电子延伸,其次在获得蒙古羊AD-AMTS1基因的cDNA全序列后设计引物,采用RT-PCR方法进一步克隆了蒙古羊ADAMTS1基因。结果显示,试验所得序列与电子延伸序列的同源性为99.4%,序列长为2 420 bp包括836 bp 3'UTR区域和1 578 bp的完整开放读码框,共编码525个氨基酸。Blastn比对发现蒙古羊ADAMTS1基因序列与牛、猪和人的同源性分别为94%,87%,82%;对氨基酸序列进行...
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