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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 傅淑  刘昭霞  陈进  杨广  
以油菜品种"浙大622"为背景材料,将其外植体(子叶柄和下胚轴)分别在含0、10、20、30、40、50和100 mg·L~(-1)卡那霉素(Kan)或壮观霉素(Spe)的分化培养基中培养,根据其再生芽的生长情况,筛选出最适抗生素浓度.结果表明:外植体的愈伤鲜重、再生芽率和单个外植体再生芽数均随着Kan或Spe浓度的升高而下降;外植体的再生芽白化率随着Kan或Spe浓度的升高而上升,且子叶柄在浓度高于20 mg·L~(-1) Kan或30 mg·L~(-1) Spe中的再生芽均为白化芽,下胚轴在浓度高于30 mg·L~(-1) Kan或20 mg·L~(-1) Spe中的再生芽均为白化芽.
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 王学斌  司龙亭  孟茜  李坤  
选用再生能力较强的黄瓜自交系M8为试验材料,在再生体系建立的基础之上,采用根癌农杆菌介导法将转化酶抑制子基因转入黄瓜中。将农杆菌菌液浸泡过的子叶节分别接种在浓度梯度为1mg.L-1到10 mg.L-1的选择培养基上,研究子叶节对潮霉素的耐受性和敏感度。使用农杆菌菌液浸泡5,10,15,20min,分别接种到筛选培养基上,研究浸泡时间对转化效率的影响。结果表明:HygB的选择压浓度为6mg.L-1,侵染时间为15min时,再生频率最高,为18.9%。经PCR检测表明转化酶抑制子基因已经整合到黄瓜基因组中,转化率为2.0%。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘鹏  陈素梅  房伟民  蒋甲福  管志勇  陈发棣  
将菊花品种‘神马’的叶盘和茎段分别接种含有0、5、7.5、10、15和20 mg·L-1卡那霉素(Kan)的再生培养基和生根培养基上,以建立简单有效的转基因菊花Kan抗性株系的筛选方法。结果表明:菊花叶盘不定芽分化筛选和生根筛选的Kan临界耐受质量浓度分别为10和7.5 mg·L-1。通过农杆菌介导法转化2 400个叶盘,经Kan筛选后得到358个抗性不定芽,经Kan生根筛选后得到65个生根株系。为了有效剔除假阳性植株,用500 mg·L-1的Kan溶液浸泡菊花转基因再生株系的叶片,通过性状观察筛选出6个Kan抗性株系,且6个抗性株系都通过PCR手段得到验证。表明成功建立了简单有效的筛选转基因...
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 温玥  苏淑钗  马履一  王湘南  杨少燕  
为探索赤霉素对油茶Camellia oleifera花芽形成和果实品质的影响,以湘林系列高产油茶良种为试验材料,在油茶花芽生理分化前期,用不同质量浓度赤霉素对油茶进行叶面喷施。结果表明:不同质量浓度赤霉素对油茶新梢数量均有显著的抑制作用,其中以100 mg·L-1赤霉素对油茶新梢数量的抑制作用最大,春梢数量比对照减少38.6%;200 mg·L-1赤霉素处理下,油茶新梢节间距显著增加,比对照增加8.4%;300 mg·L-1赤霉素处理油茶,对油茶花芽形成和当年果实品质的影响最大:新梢长度和新梢长枝的比例比对照分别增加9.4%和49.2%;花芽体积和质量比对照分别增加23.1%和5.3%;油茶花...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 郭利军  曾炳山  刘英  李湘阳  裘珍飞  
以巨桉无性系Eg5叶片为外植体材料,试验了硫酸卡那霉素(kanamycin sulfate,Km)对外植体愈伤组织诱导增殖、芽分化、芽生根的影响,并且试验了头孢霉素(Cefotaxime,Cef)对外植体再生的影响及其对根癌农杆菌GV3101的抑制效果。结果表明:抑制愈伤组织增殖培养的卡那霉素浓度为17.5 mg/L,完全抑制芽分化的卡那霉素浓度为60 mg/L,完全抑制生根的卡那霉素浓度为400 mg/L;Cef在0~500mg/L范围内,0~300mg/L Cef对外植体的生长分化影响最小;共培养结束后的外植体经过500 mg/L的Cef处理后,共培养基中添加100 mg/L的Cef便可以...
[期刊] 草业科学  [作者] 张海燕  孙雪  于辉  孙强  周乐  张延辉  
分蘖是禾本科植物的生物学特征,分蘖数是草坪草密度评价的关键指标之一。狗牙根(Cynodon dactylon)是一种连续分蘖的禾本科草坪草,分蘖促进产生新枝,对于狗牙根草坪迅速返青、形成致密的草坪具有重要的作用。目前有关狗牙根分蘖还没有深入的研究报道,本研究以‘新农1号’狗牙根(‘XinnongNo.1’)为材料,分别喷施1μmol·L~(-1)赤霉素(GA3)和细胞分裂素(6-BA),对分蘖芽的形成进行组织切片,分析解剖结构和表型。结果显示:狗牙根在三叶期形成分蘖原基,在八叶期形成新的分蘖芽后突破母茎;喷施GA3和6-BA使狗牙根形成分蘖芽时间提前,GA3处理分蘖芽提前5 d在七叶期形成,6-BA处理分蘖芽提前8 d在六叶期形成;同时喷施两种激素狗牙根分蘖数和根长均增加,且6-BA处理后分蘖数增加最多,是对照的1.18倍。通过对不同激素处理下分蘖芽形成叶期的解剖结构观察,发现无论表皮厚度、皮层厚度,还是维管束直径均表现为6-BA> GA3> CK,且在6-BA处理下是GA3处理的1.28倍、2.33倍、1.34倍。研究结果表明,在狗牙根分蘖初期喷施6-BA促进分蘖芽生长发育效果优于喷施GA3。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 姜树坤  黄成  徐正进  陈温福  
【目的】通过比较控制株高及其构成因素的QTL与赤霉素和油菜素内酯合成及信号转导相关基因的关系,为明确株高的分子调控机制提供理论参考。【方法】利用沈农265和丽江新团黑谷杂交构建的粳-粳交重组自交系为作图群体,对水稻株高及其构成因素进行QTL定位,并与控制赤霉素和油菜素内酯合成及信号转导的相关基因进行比对分析。【结果】RILs群体的株高及各个构成因素均呈正态分布。株高与各构成因素间呈正相关。相邻的构成因素间呈极显著的正相关,而相距较远的构成因素间的相关性减弱甚至负相关,进一步分析表明,株高主要受倒1和倒4节间长度的影响。共检测到21个控制株高及其构成因素的QTL,分布在第1、2、3、5、6、7、...
[期刊] 华北农学报  [作者] 崔淑芳  李俊兰  葛朝红  张寒霜  
[期刊] 林业科学  [作者] 李玲  韩一凡  
植物遗传转化时,选用抗性基因作为标记基因,用来分析已转化植株的基因整合及表达。新霉素磷酸转移酶基因(neo)是在遗传工程中经常使用的标记基因,它对卡那霉素具有很高的抗性。作为杨树基因转化的显性选择记号,首先要将杨树不同种对卡那霉素的敏感性进行测定。本文报道了这方面研究的结果。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 吕孟雨  董福双  张俊敏  王海波  
为了建立简单有效地筛选抗卡那霉素标记基因玉米的方法,分别用玉米自交系"昌7-2"和杂交种"郑单958"为试验材料,用不同浓度、不同体积的卡那霉素溶液分别浸种3、4 d后播种,调查播种10 d后的玉米幼苗白化率,确定玉米对卡那霉素的抗性,结果表明用卡那霉素浸泡玉米种子,玉米苗的白化率不但与卡那霉素浓度有关,而且与浸种的用液量有关,杂交种和自交系之间差异并不大,利用100 mL浓度为200 mg/L的卡那霉素溶液浸种3 d后播种,白化苗率基本可以达到100%,用100 mL浓度为150mg/L的卡那霉素溶液浸种20粒种子3 d后播种进行抗性筛选,经过对玉米T1代转基因植株的筛选试验进行验证准确度达...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘斌  吴迪  侯文胜  
以吉林小粒1号大豆为材料进行卡那霉素梯度涂抹试验,确定卡那霉素筛选的最佳浓度和筛选临界观察时间,并在此基础上,对转基因大豆植株(含np tⅡ基因)分离后代进行卡那霉素涂抹检测和PCR检测,检验2种方法的符合度。结果表明,卡那霉素的最佳筛选浓度为500 m g/L,观察时间以3 d为宜;抗和高抗卡那霉素植株2种检测方法的符合度为90.8%,感和高感卡那霉素植株的符合度为87.1%。可见,卡那霉素叶片涂抹法完全可以用于大豆转基因植株的快速筛选。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 沈益新  石井康之  沼口宽次  伊藤浩司  
1989年早春和夏季盆栽试验,探讨了 GA_3和 CCC 处理对东非狼尾草(Pennisetum clandestinum cv.Whitet)和非洲狗尾草(Setaria anceps cv.Nandi)生长及干物质(DM)生产性能的影响.结果表明:GA_3处理显著促进了两种牧草地上部的伸长生长,特别是茎的伸长生长和 DM 积累,CCC 处理则具显著负效应;GA_3和 CCC 处理对两种牧草叶面积扩展均无显著影响;GA_3处理影响两种牧草植株体内 DM 分配,提高茎 DM 重的百分率,而 CCC 处理无此效果;GA_3处理提高了东非狼尾草的 NAR 和 RGR,从而显著提高了 CGR 和 D...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 袁玉辉  刘显军  杨柳  陆赢  官春云  刘忠松  
为建立芥菜型油菜高效遗传转化体系,以芥菜型油菜品种‘四川黄籽’的下胚轴为外植体,采用农杆菌介导法进行遗传转化,对愈伤诱导、芽分化及生根培养3个阶段的激素、硝酸银及其配比进行优化处理。结果表明:用含1.0 mg/L 2,4?D的预培养基诱导愈伤,愈伤再生率达到100%;用含3.0 mg/L 6-BA+5.0 mg/L AgNO3的分化培养基诱导芽再生,芽再生率达28.33%,平均芽丛数为1.73个;在含2.5 mg/L IBA+0.05mg/L NAA生根培养基中,不定芽生长11 d后开始生根,生根率达到100%;经PCR检测抗卡拉霉素转化苗,阳性率达到23.80%,且GUS染色呈阳性,说明建立...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 刘文明  梁坤南  潘一峰  
在 35℃高温条件下 ,赤霉素可促进柚木种实提早发芽、提高发芽率。在黑暗条件下 ,当赤霉素浓度低于 10 0mg·L- 1时发芽率较高 ,可达 80 %以上 ,且其种子腐烂率明显较低 ( 8.6% ) ,同时发芽指数也较高。播种后 2周时 ,光照强度是影响发芽率的主要因素之一。未经处理的柚木种实在黑暗条件下催芽效果较好 ,而石灰浸泡处理对催芽效果不明显。
[期刊] 华北农学报  [作者] 齐红莉  杨广  刘金兰  
采用碳二亚胺(EDC)法合成卡那霉素完全抗原,免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得3株能稳定分泌抗卡那霉素单克隆抗体的杂交瘤(5D7、6H8、7G4)。选择其中的5D7株抗体,经ELISA鉴定,细胞上清的效价达103以上,腹水效价达到5×104以上;建立了间接竞争ELISA法,通过优化,其检测限为0.5ng/mL,抗体IC50为3.7ng/mL,与妥布霉素交叉反应率为63.8%,与其他抗生素无交叉。可见ELISA具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于KAN残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。
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