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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
吉璐 胡瑞波 蒋建雄 周功克 易自力
对南荻MINAC13基因进行了克隆、亚细胞定位和转录激活试验,并用实时荧光定量PCR方法,检测了在盐胁迫、干旱胁迫、低温和脱落酸、茉莉酸甲酯、水杨酸处理下的MlNAC13基因在南荻根部的表达模式。结果:1)获得了南荻MINAC13的全基因序列;2)用N端融合YFP进行亚细胞定位试验的结果证明,MlNAC13位于细胞核,MlNAC13可能在细胞核内行使功能;3)MlNAC13的C端及全长具有转录激活活性,N端没有转录激活活性,说明它是转录因子,且转录激活域位于C端;4)除水杨酸外,脱落酸、茉莉酸甲酯均能诱导MlNAC13基因的表达,说明MlNAC13基因可能参与南荻的多种逆境胁迫响应。
[期刊] 水产学报
[作者]
郭丹丹 郑国栋 陈杰 邹曙明
苹果酸脱氢酶（mdh）基因与肌肉的生长密切相关，可以通过影响骨骼肌的能量代谢来调节肌纤维的生长及类型转化，为探索mdh基因在团头鲂中的功能及作用，实验利用CRISPR/Cas9技术对团头鲂mdh基因进行敲除，并对敲除突变体的表型及基因表达变化进行了研究。结果显示，CRISPR/Cas9可成功应用于团头鲂mdh基因的敲除，与对照组相比，敲除突变体明显小于正常对照组个体，生长性状数据测量显示其体质量、体长都发生了显著的变化。qPCR结果显示，敲除突变体中mdh基因的表达水平显著低于对照组，并且，在敲除突变体中随着mdh基因表达水平的下降，生肌决定因子及肌纤维类型因子MyoG、MyHCⅡa也发生了显著的降低，而MyHCⅡb的表达并没有发生明显的变化。研究表明，CRISPR/Cas9可用于团头鲂基因的高效、快速编辑，也证明mdh基因敲除后可能会抑制团头鲂的生长，在团头鲂的生长过程中起着促进作用。这一研究结果为团头鲂的生长性状研究提供了一定的理论基础，有利于mdh基因在团头鲂分子育种中的合理应用。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
吉璐 陈智勇 肖亮 易自力
克隆南荻ＭＩＮＡＣ２基因的Ｃ ＤＮＡ序列，该序列全长为９３３ ｂｐ，编码产物含３１０个氨基酸残基，其蛋白质理论相对分子质量为３４ ４２７．８，等电点（ｐ Ｉ）为５．８５，不稳定系数为３４．８４，为稳定蛋白，具有保守的ＮＡＭ基序，无信号肽和跨膜结构域，可推测其为亲水性蛋白。亚细胞定位试验结果表明，Ｍｌ ＮＡＣ２定位于细胞核，可能在细胞核内行使功能。转录激活试验结果表明，Ｍｌ ＮＡＣ２是一个转录因子蛋白，且转录激活域位于Ｃ端。荧光实时定量ｐＣＲ分析结果表明，高盐、干旱、脱落酸、茉莉酸甲酯和机械伤害均能诱导Ｍｌ ＮＡＣ２基因在南荻根部的表达上调，而低温处理时表达下调。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
詹栎 胡贞洁
以水杨酸处理后的拟南芥(Col-0)为材料,采用高通量测序技术分析拟南芥在水杨酸处理后的转录组变化,发现了12个受水杨酸下调的新基因。以Col-0幼苗的cDNA为模板克隆其中一个基因NG314,并对其功能进行研究。NG314的cDNA序列总长为1 097bp,基因组DNA包含1个内含子。荧光定量PCR结果表明,NG314的表达量随着水杨酸处理时间延长而逐渐下降,病原菌侵染也能抑制NG314的表达。NG314可能是一个长链非编码RNA或新的miRNA基因,可能通过抑制其靶基因的表达调控植物的抗病反应。
[期刊] 华中农业大学学报(自然科学版)
[作者]
欧阳号锋 易少奎 张龙 杨思琦 李艳和
为探究硫酸软骨素N-乙酰半乳糖胺基转移酶-1(chondroitin sulfate N-acetylgalactosaminyltransferase-1,CSGalNAcT-1)在克氏原螯虾免疫反应中的作用，利用RACE技术成功获得克氏原螯虾CSGalNAcT-1基因完整cDNA序列，并通过荧光定量PCR分析该基因在各组织中的表达模式以及在CpG寡脱氧核苷酸（ODN）、嗜水气单胞菌和白斑综合征病毒（WSSV）刺激后的表达情况。结果显示，克氏原螯虾CSGalNAcT-1基因在中肠中的相对表达量最高，其次是近胃段肠，在心脏、胃、肌肉和围食道神经中的相对表达量较低。克氏原螯虾肝胰腺、血细胞中CSGalNAcT-1基因表达量在嗜水气单胞菌和WSSV刺激下呈现出下调及上调，而在注射免疫刺激剂CpG ODN后，CSGalNAcT-1基因表达水平在大部分组织中呈现上调。表明克氏原螯虾CSGalNAcT-1基因可能在抵御外界病原侵染以及增强自身免疫反应的过程中发挥重要作用。
[期刊] 中国林业科学研究院
[作者]
徐向东
光敏色素相互作用因子(Phytochrome Interacting Factor,PIF)是碱性螺旋-环-螺旋(basic Helix-Loop-Helix,bHLH)转录因子家族的一员,参与了植物光信号传导。拟南芥基因组共编码7个PIFs,在种子萌发、下胚轴伸长、植物蔽荫反应和叶片衰老等过程具有重要功能,通过调控生长素的合成与分布是其影响植物生长发育的重要途径。木本植物具有不同于草本植物的生长发育过程,因此对光信号的应答也存在差异。研究杨树中PIF基因功能有助于揭示树木光信号响应机制。本研究分析了杨树
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
展敏月 王建 范纯新
为了探究TNFSF和TNFRSF在硬骨鱼中的表达和功能，克隆了小体鲟Ar-tnfsf10和Ar-tnfrsf10基因，并对小体鲟Tnfsf10和Tnfrsf10序列进行进化分析以及蛋白高级结构预测。结果表明，小体鲟Tnfsf10和Tnfrsf10在进化树中位于辐鳍亚纲的基部，虽然与四足动物的Tnfsf10和Tnfrsf10同源性不高，但其三维结构与人的Tnfsf10和Tnfrsf10相近。原位杂交的结果显示：Ar-tnfsf10和Ar-tnfrsf10均在小体鲟躯干水平肌隔、眼部的眶下管、前鳃盖管和腹侧吻端的神经丘处有较强表达。经Tnfrsf10特异性激活剂Bioymifi处理后，小体鲟仔鱼整体结构无显著变化，但神经丘中毛细胞显著增多。综上结果表明：小体鲟Tnfsf10和Tnfrsf10代表了硬骨鱼同源蛋白的原始形式，可能特异性参与侧线神经丘毛细胞的发育。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
彭波 孔冬艳 庞瑞华 孙艳芳 宋晓华 李慧龙 王青林 韩爽 郭桂英 李金涛 周棋赢 段斌 宋世枝
【目的】香稻中香味的产生是由于水稻第8染色体上面Badh2基因的功能缺失而导致2-乙酰-1-吡咯啉(2AP)前体物质的增多,进而2AP积累使稻米产生香气。【方法】本研究利用Badh2基因开发的7个功能标记,针对豫南地区16份香稻品种进行了检测与分析。【结果】4份香稻品种属于第2外显子突变类型,2份香稻品种属于第45外显子突变类型,5份香稻品种属于第7外显子突变类型;并没有发现Badh2基因启动子区及第1214外显子突变类型的香稻品种。【结论】通过Badh2基因功能标记的检测与分析,本研究鉴定了豫南香稻品种
关键词：
香稻 Badh2基因 功能标记 检测
[期刊] 华北农学报
[作者]
彭陈 王瑞 李万昌 郭士伟
TALEN(Transcription activator-like effector nuclease)和CRISPR/Cas系统(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR.CRISPR-associated,Cas)是近年来发现的基因功能研究的新方法,且已经成功地在动物、植物及微生物等多个领域得到成功应用。它们可以对DNA双链进行切割,从而启动细胞内的DNA修复机制,以此来实现对靶位点的基因修饰。相较于传统方法,它们具有特异性高、操作简便及打靶效率高等特点。主要从结构、功能及作用机制等方面阐述这2种新基...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
唐开媛 梁昆 张彦军 王兴荣 邱法展
为鉴定和发掘玉米渍水胁迫抗性基因，克隆玉米ERF家族成员ZmEREB46(Zm00001d015759)基因，同时对该基因进行重测序分析、功能变异位点鉴定以及表达模式分析，并进一步在模式植物拟南芥中初步探究ZmEREB46参与耐渍的功能。结果显示，ZmEREB46编码1个AP2/EREBP类转录因子；相较于耐渍自交系A3237,ZmEREB46基因编码区及启动子区在渍水敏感自交系A3239中分别存在1个G/A的转换以及1个911bp片段插入，911 bp片段的插入显著抑制了渍水敏感自交系A3239中ZmEREB46基因的表达；亚细胞定位结果显示，ZmEREB46定位在细胞核中；荧光定量PCR结果显示，ZmEREB46受渍水胁迫诱导上调表达，渍水处理8 h后ZmEREB46在耐渍自交系A3237中的表达量是渍水敏感自交系A3239中的2倍。结果表明，ZmEREB46在拟南芥中过量表达提高了拟南芥苗期的耐渍性。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
周纳宇 曹丹丹 王志刚 张全启 齐洁 王旭波 于海洋
本研究分析了CD59基因在牙鲆(Paralichthys olivaceus)感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)前后的表达模式。结果显示,感染前,CD59基因在检测的4种免疫器官中均不表达;感染后,该基因均有不同程度的表达,其中,肾脏的表达量最高。对牙鲆CD59基因进行原核表达,构建原核表达载体pET-32a-CD59,并将其转化入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,使用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得约为29 kDa的重组蛋白pET-32a-CD59。
关键词：
牙鲆 CD59 原核表达 抑菌活性
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
司瑜 王宣刚 王梦娅 王欣桐 于海洋 张全启 王志刚
本研究利用实验室已建牙鲆(Paralichthysolivaceus)转录组数据库,得到牙鲆JNK2基因(Po JNK2)并利用PCR技术进行序列验证。PoJNK2的开放阅读框长度为1263 bp,编码420个氨基酸;通过SMART服务器对PoJNK2的结构域进行预测,显示PoJNK2具有典型的丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶催化结构域S_TKc。利用q RT-PCR分析PoJNK2在牙鲆成体不同组织中的表达水平,发现其在牙鲆免疫组织中均有表达,因此,初步推测PoJNK2在牙鲆免疫应答方面可能发挥作用。本研究设计了体内迟缓爱德华氏菌(Edwardsiellatarda)侵染实验和体外免疫刺激细胞实验以探究PoJNK2在牙鲆免疫反应中的作用。在迟缓爱德华氏菌体内注射牙鲆成体后,PoJNK2在脾脏、头肾和鳃中有不同程度的表达上调。同时,使用迟缓爱德华氏菌、Poly I:C和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激牙鲆鳃细胞系后,发现PoJNK2在不同时间点表达上调。除此之外,通过细胞转染实验在牙鲆鳃细胞系中过表达PoJNK2,发现其对下游炎症细胞因子的表达及激活蛋白Activator protein-1 (AP-1)的转录活性具有显著的上调作用,进一步阐明了PoJNK2在调节牙鲆免疫应答方面的作用。
关键词：
牙鲆 JNK2 迟缓爱德华氏菌 先天免疫
[期刊] 中国高教研究
[作者]
陈斌 张维雅 郑剑
大学"引领文化"功能的提出进一步丰富了大学功能的内涵与外延。由于文化的广义性和大学的多层次性,大学对文化的作用绝非"引领"一义。为此,探究城市文化内涵,深度把握大学服务城市文化的内容与特征,将大学服务城市文化功能分为引领、辐射、创新城市文化三个层次,并在此基础上,讨论了不同层次大学的服务城市文化功能的定位。
关键词：
大学 服务 城市文化 定位
[期刊] 会计之友
[作者]
张巧良 张磊 徐月军
本文在论证内部审计服务对象的基础上,分析了相关客户的需求,并研究了内部审计实现其增值目标的途径。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张旸 吴佳岩 吴雅妮 汤明威 解莉楠
被子植物表皮细胞的形态学建成是目前研究工作中较为流行的生物学现象，其大致包括：表皮细胞形状的改变、表皮细胞附属衍生物的形成、根毛和毛状体的分化等方面，根据大量的试验结果总结发现ＭＩＸＴＡ及其同源基因的生物学功能与该现象密切相关。ＭＩＸＴＡ是编码一个具有Ｒ２Ｒ３ ＭＹＢ结构域的转录因子，自从１９９４年首次报道在金鱼草中被克隆以来，已经受到广泛的关注并在不同种属试验材料中被更深入地研究和讨论。ＭＩＸＴＡ最早被证实的调节功能是促进金鱼草花瓣表皮细胞发生锥形化，使花瓣内表皮具有天鹅绒状质感，野生型金鱼草花瓣表面的锥形细胞在ＭＩＸＴＡ突变时形状发生显著扁平化，花瓣内表皮的天鹅绒状质感消失，异位表达的ＭＩ．．．
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