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[期刊] 渔业科学进展
[作者]
林瑞环 赵玲 曹荣 刘淇
黑变是南极磷虾(Euphausia superba)贮运流通过程中的突出问题，为探究南极磷虾与普通海捕虾在黑变进程方面的异同，选取南极磷虾和海捕鹰爪糙对虾(Trachypenaeus curvirostris)作为研究对象，对两种虾在(2±1)℃贮藏过程中的黑变进程进行了感官评价，提取其酚氧化酶(PO)并进行了纯化，对两种虾PO的生化性质进行了对比分析。结果显示，冷藏条件下，24 h时南极磷虾的黑变已非常严重，黑变部位主要集中在头胸部、腹部甲壳以及尾节部分。72 h时鹰爪糙对虾的头胸部和尾节部分开始有轻微的黑变，之后逐渐扩散到躯干。南极磷虾和鹰爪糙对虾PO粗酶液经硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶过滤后，酶的纯化倍数分别达到17.22和19.67。两种虾PO的最适温度分别为30℃和40℃，南极磷虾PO在低温下仍具有较高的活力。二者的最适pH均为6.0～7.0之间。焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、4-己基间苯二酚、L-半胱氨酸和抗坏血酸均可较好的抑制两种虾PO活力，其中4-己基间苯二酚抑制效果最好。研究结果为南极磷虾冷链物流过程中的品质控制提供了依据，同时为虾死后如何有效抑制其黑变提供了参考。
关键词：
黑变 南极磷虾 鹰爪糙对虾 酚氧化酶
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王建国 许琴瑟 王权 熊良伟 陆宏达 封琦 朱云干
以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)酚氧化酶(PO)为材料,采用L-DOPA为反应底物,分光光度计测定不同温度和pH条件下PO活力,研究克氏原螯虾PO的特性,为其免疫学研究及优化PO准确测定方法提供依据。结果显示PO活力最高时的温度为35℃,低于和高于35℃活力逐渐下降,45℃以上活力迅速下降;0℃仍具有最高活力的24%。在pH4.0～9.5内PO均具有活力,鳃组织最佳pH5.5,血清最佳pH6.5。因此测定克氏原螯虾PO活力的最佳参数为温度35℃,pH5.5(鳃)或6.5(血清)。以上结果说明冰浴终止反应法测定克氏原螯虾PO活力会影响结果的准确性,要慎用。
[期刊] 水产学报
[作者]
刘晓云 张志峰 姜明 王静凤 廖承义
The activity and location of phendoxidase (PO) in lymphatic organ of Penaeus chinensis were studied by enzyme cyto-chemical technique of electronic microscope. The results showed: 1.Few PO positive reaction in lymphatic organ of health individual was observed. 2.In the sick, the activity of PO in ly...
[期刊] 水产学报
[作者]
吴长功 周令华 相建海 刘瑞玉
使用激光扫描共聚焦显微镜对鹰爪虾与中国对虾雌虾纳精囊的形态结构进行研究。结果表明，鹰爪虾与中国对虾都具有封闭式纳精囊。鹰爪虾纳精囊表面被前后两片甲壳板所覆盖，两板中间为一开口，交配后被胶体物质所堵塞。纳精囊中部为单一的囊腔，囊腔向后部两侧延伸形成两个袋状的囊，为贮存精子囊的部位。中国对虾纳精囊内为单一的囊腔，外面覆盖有两片半圆型、左右对称的甲壳质薄片。囊腔内部由前向后伸出三个锥状的甲壳质突起，交配的雌虾，锥状突起镶嵌于精荚内，有固定精荚的作用。
关键词：
鹰爪虾 中国对虾 纳精囊 形态结构
[期刊] 中国水产科学
[作者]
章跃陵 王三英 刘光明 陈粤 邹湘辉
以采自厦门的南美白对虾(Penaeusvannamei)为研究对象,运用病原菌人工感染、血蓝蛋白浓度和酚氧化酶(phenoloxidase,PO)活性测定等方法探索南美白对虾血蓝蛋白在体内、外对其血清酚氧化酶活性的影响。结果表明,南美白对虾人工感染副溶血弧菌后,其血淋巴中血蓝蛋白浓度和PO活性的变化趋势基本一致。在体外实验中将一定量的血蓝蛋白重组蛋白添加至血清中,其PO活性可明显升高;但同时添加血蓝蛋白重组蛋白和E.coliK12超声破碎液后,其PO活力反而降低。研究提示,血蓝蛋白在一定范围内确实可以正反馈调节PO活性,但在细菌等干扰之下,其又可表现出一定的负反馈抑制活性。
[期刊] 水产学报
[作者]
赵永贞 陈秀荔 曾地刚 杨春玲 彭敏 何苹萍 李咏梅 彭金霞 韦嫔媛 陈晓汉
为研究酚氧化酶原激活因子(prophenoloxidase-activating factor,PPAF)在凡纳滨对虾感染传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)过程中所起的免疫作用,实验采用逆转录聚合酶链式反应和cDNA末端快速扩增技术克隆了凡纳滨对虾PPAF基因的全长cDNA序列,并通过实时荧光定量PCR技术分析了该基因在正常凡纳滨对虾和感染IHHNV凡纳滨对虾不同组织的表达情况。结果显示,克隆获得了1 986 bp凡纳滨对虾PPAF基因cDNA全长序列(GenBank登录号JQ684529),其中含有一个1 629 bp开放阅读框(ORF),两翼分别存在21 bp(5'端)和336 b...
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
陈国福 宋晓玲 黄倢 周进 王秀华
为考察A3α-肽聚糖(Peptidoglycan,PG)在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的养成期对其免疫酶活性的影响,设立了连续投喂、间隔投喂和浸浴共6个实验组。连续投喂组中PG的添加量分别为0(对照)、0.01%、0.05%和0.1%;间隔投喂组中PG的添加量为0.05%;浸浴组的给予方式为50mg/ml,3h/次/15d。分别在30、60和90d时,测定对虾体内及血浆上清中的酸性磷酸酶(Acid phosphatase,ACP)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)活性,另外,在60d和90d时,测定对虾血细胞内酚氧化酶(Phenoloxi...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘媛 王维娜 王安利 苗玉涛
通过在饵料中分别添加不同含量的牛磺酸, 初步研究牛磺酸对日本沼虾生长及体内酚氧化酶活性的影响。结果表明, 在饵料中添加 0 .4% ~0. 8%的牛磺酸, 日本沼虾的增重率显著增加 (P
关键词：
日本沼虾 牛磺酸 生长 酚氧化酶
[期刊] 中国水产科学
[作者]
徐鹏翔 许柳雄 孟涛 黄洪亮 张勋 周爱忠 李灵智 徐国栋
南极磷虾(Euphausua superba)是目前已知的地球上最大的单种生物资源之一,其巨大的生物量和潜在的开发价值日益受到各国的关注。本研究以中国南极磷虾捕捞船队引进的日韩小网目南极磷虾拖网为原型网,采用田内准则进行网具模型试验,比较分析其网具性能。模型网大尺度比λ分别为14(韩式网,Net B)和16(日式网,Net A),平均小尺度比约为3,速度比为3。模型试验于东海水产研究所拖曳水池中进行。模型网试验速度分别为:0.345 m/s、0.428 m/s、0.513 m/s、0.599 m/s、0.685 m/s。L/S取网具下袖端间距与下纲长度的比值,范围取0.4~0.55,以0.05...
关键词：
南极磷虾 中层拖网 模型试验 网具性能
[期刊] 水产学报
[作者]
杨留冰 潘鲁青
为研究磷脂酰丝氨酸(PS)对凡纳滨对虾血蓝蛋白合成、酚氧化酶活性的影响,并探讨PS激活凡纳滨对虾血蓝蛋白发挥酚氧化酶活性的机制,实验采用5、10和20μg/mL 3个PS浓度对凡纳滨对虾尾节肌肉进行注射,注射量为50μL,对照组注射生理盐水,各处理组设3个平行组,取样时间为0、6、12、24、36、48和60 h,分别测定了血浆血蓝蛋白含量,肝胰脏血蓝蛋白p75、p77亚基和mRNA的表达以及血浆血蓝蛋白酚氧化酶活性。结果显示:与对照组相比,血蓝蛋白含量在6 h内略有下降,6～36 h内呈峰值变化,24 h时达到最大值(P
[期刊] 淡水渔业
[作者]
朱毅菲 熊传喜 王良发
以克氏原螯虾(Procam barus clarkii)为材料,研究温度、pH对其血清酚氧化酶活力及稳定性的影响。实验以L-dopa为反应底物,在试验设计的温度范围(20,30,40,50,60,70℃)内,测得酚氧化酶活力的最适温度为20℃,随温度升高酶活力迅速下降,该酶在20~40℃范围内表现出较高的热稳定性,而30℃时最稳定;该酶的最适pH 7.0,在pH 6.0和7.0的缓冲系统中表现出较强的稳定性。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
荣雅利 周婷婷 施文正 汪之和 李燕
南极磷虾生活在在极寒环境，其体内特殊的蛋白酶系统是其维持正常新陈代谢的关键因素。羧肽酶为南极磷虾蛋白酶系统中一类主要且关键的蛋白酶，酶学性质研究对其后续基础研究开展及商业利用都具有指导意义。本研究以南极磷虾为原料，采用缓冲液提取、硫酸铵分级盐析，DEAE-琼脂糖凝胶FF阴离子层析和Sephadex G-100凝胶层析，从南极磷虾匀浆液中分离纯化出一种羧肽酶，SDS-PAGE结果显示其分子量为30ku。酶学性质研究结果显示：该酶最适温度为30℃；最适pH为8.0。热稳定性较差，即使在4℃下保温超过2h酶活性会急剧下降。金属离子Ni~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Mg~(2+)具有激活作用，且激活作用依次增强；而Ca~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)起抑制作用，Cu~(2+)抑制效果最明显。对巯基有修饰作用的抑制剂DTT、β-巯基乙醇对其有抑制作用，推测该酶活性中心存在二硫键；金属蛋白酶抑制剂EDTA、1,10-菲罗啉对该酶活性有明显的抑制作用，说明了其具有金属蛋白酶特性；而丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF对该酶抑制作用并不强烈。以脲酰-L-苯丙氨酸为底物溶液，测得该酶Km为0.0059mg/mL、Vmax为4.9091U/min。
关键词：
南极磷虾 羧肽酶 分离纯化 酶学性质
[期刊] 水产学报
[作者]
汪小锋 樊廷俊 丛日山 胡国斌
为了弄清免疫促进剂增强对虾自身免疫力的作用机理,利用脂多糖(LPS)、β 葡聚糖(β 1,3 glucan)、灭活哈维氏弧菌和灭活鳗弧菌对中国对虾血细胞的数量、形态结构以及酚氧化酶(phenoloxidase,PO)的产量与活性在刺激前后的变化进行了研究。研究结果表明,经β 葡聚糖、脂多糖、灭活哈维氏弧菌和灭活鳗弧菌刺激后,中国对虾总血细胞的数量分别增多了83.4%、52.0%、73.4%和111.3%,其中,小颗粒细胞的数量分别增多了100.4%、67.3%、57.2%和102.9%,大颗粒细胞的数量分别增多了47%、10%、127%、和173%;同时,PO的产量分别提高了81.3%、104...
[期刊] 水产学报
[作者]
王在照 相建海
提取鹰爪虾眼柄总RNA,以眼柄总RNA为模板,根据日本对虾的具有蜕皮抑制活性的神经肽Pej SGP Ⅳ的氨基酸设计兼并引物,进行RT PCR扩增,在适宜条件下得到一特异性片段。将这一特异性片段克隆到载体中进行测序,测得鹰爪虾的特异性cDNA片段由213个碱基对组成,推测的氨基酸序列由71个氨基酸组成。序列比较发现许多甲壳动物的CHH家族神经肽与它相似。在所有与该序列推测的氨基酸序列相似的甲壳动物CHH家族神经肽中,MIH与它的相似度最高,表明由鹰爪虾眼柄特异性cDNA片段推定的氨基酸序列可能是鹰爪虾的MIH片段,它相当于MIH成熟肽的第5至75个氨基酸。
[期刊] 水产学报
[作者]
李玉锋 王敬敬 檀利军 彭知云 赵晟 刘海泉 赵勇
为了提升可溶性南极磷虾蛋白的抗氧化性能，将芦丁复合到可溶性南极磷虾蛋白(SAKP)上，成功制备了SAKP-芦丁复合物，一种新型的多酚-蛋白复合物。通过测定SAKP-芦丁复合物清除二苯基苦基苯肼自由基(DPPH-)和羟基自由基(OH-)的能力来评估其抗氧化能力。同时采用H2O2诱导HepG-2细胞氧化损伤模型评价了SAKP-芦丁复合物对细胞受到氧化损伤时的保护能力。结果发现，与芦丁复合后，SAKP的抗氧化和清除自由基的能力明显增强；与天然SAKP相比，SAKP-芦丁复合物显著提升了HepG-2细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性，减少了细胞因氧化应激产生的脂质过氧化产物(MDA)含量，最终降低了氧化应激损伤对细胞的伤害。以上结果表明，SAKP-芦丁复合物是一种新型的、有希望应用于开发功能性食品的蛋白资源。
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