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[期刊] 世界农业
[作者]
马志科 昝林森
单细胞蛋白开发应用进展西北农业大学马志科昝林森蛋白质资源短缺是全世界面临的重大课题，特别是发展中国家日趋严重，为此，各国都在重视加强开发蛋白质资源研究。单细胞蛋白质是食品工业和饲料工业的重要蛋白质来源，也是一条生产人类蛋白质食品资源的有效途径，目前已...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
卢向阳 饶力群 彭丽莎 向华 鲁小春 罗泽民
为了充分利用酒糟资源 ,减轻酒糟对环境的污染 ,以优良菌种 117号产朊假丝酵母、136号热带假丝酵母、白地霉和扣囊拟内孢霉混合发酵酒糟 ,生产酒糟单细胞蛋白饲料 .结果表明 :发酵最适起始 p H为 5 .0左右 ;适宜的发酵培养基配方为 80 %酒糟 ,15 %麦麸 ,3%玉米粉 ,1%豆饼 ,1%尿素 ,0 .0 5 %磷酸二氢钾 ,发酵前用适量糖化酶预处理酒糟能明显提高酒糟蛋白质含量 ,通过扩大发酵试验 ,10 0 g酒糟中粗蛋白含量由 18.1g增加到 2 8.6 g,人和成年哺乳动物必需氨基酸及钙、磷含量显著增加 ,粗纤维和单宁含量明显减少 ,酒糟单细胞蛋白饲料可作为配合饲料的新型...
关键词：
酒糟 单细胞蛋白 酵母菌 饲料 发酵
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘永生 张杰 马丽娜 陈豪泰
朊蛋白和脂筏是当今研究的热点。细胞型朊蛋白(PrPC)能够通过构象转变生成致病型的朊病毒(PrPSc),导致海绵状脑病的发生,但是目前关于PrPC的转变机制还不清楚。PrPC也是重要的信号转导蛋白,引发众多的信号转导事件。Flotillin属于新被命名为SPFH(stomatin/prohibitin/flotillin/HflK/C)的蛋白家族,是重要的脂筏标识性蛋白,它们不仅被动地担当着非胞膜窖脂筏的脚架,为蛋白质的相互作用和蛋白质复合体的组装以及信号转导提供平台,而且本身还主动地扮演着信号蛋白的角色,在许多的细胞事件中发挥重要作用。PrPC与flotillin能够发生相互作用,floti...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李莉 周燕 高述民 王瑛 刘艳
该文采用石蜡切片法对油松卵细胞发育过程中蛋白泡的动态变化进行了研究,并利用蛋白质双向电泳技术和ImageMasterTM2D Platinum软件初步分析了与卵细胞发育相关的特异蛋白.结果表明:5月初颈卵器开始形成,其内充满液泡,随着液泡的消失,蛋白泡从卵细胞的下部和边缘出现,在精核即将进入卵细胞时蛋白泡数量达到高峰,受精时蛋白泡开始减少,逐渐出现空泡现象.精卵结合之后,蛋白泡几乎全部成为空泡.伴随着蛋白泡的变化,胚内的糖类物质和蛋白质也呈现出有规律的时空变化.蛋白质双向电泳图谱表明:从颈卵器形成到卵细胞受精之后,4个新蛋白点出现,10个蛋白点消失,10个蛋白点表达量减弱.
关键词：
油松 卵细胞 蛋白泡 特异蛋白
[期刊] 中国水产科学
[作者]
董传甫 林天龙 俞伏松 龚晖
用十二烷酰肌氨酸盐抽提结合超速离心纯化,制备了19株典型嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和1株温和气单胞菌(A.sobria)的主要外膜蛋白(MOMP)。根据SDS-PAGE图谱,将其中的14株菌分为3个MOMP组,Ⅰ组的主要蛋白带为40 kD和43 kD,Ⅱ组的主要蛋白带为40 kD和50 kD,Ⅲ组的主要蛋白带为40 kD、46 kD和50kD。MOMP组和血清型间没有严格的关系。用兔抗嗜水气单胞菌体抗原为第一抗体进行免疫印迹实验,结果显示,所有被试菌株都能产生强阳性反应,其中40 kD的蛋白带为大多数菌株所共有,且具有相似的免疫原性,是构成菌体抗原的重要免疫原。用...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
赵楠 梁雪莲 谢淑燕 张新新 马婷婷 邹宏达 陈景益 房伯平 黄立飞
单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)技术是在单个细胞水平通过对mRNA进行高通量测序研究其整体水平基因表达情况的一项新技术。本研究概述了scRNA-seq技术的发展历程和创新;详细介绍了scRNA-seq技术的单细胞捕获/分选、反转录/PCR扩增、建库测序和测序数据基础分析等步骤,以及在植物单细胞图谱、非生物胁迫响应机制、细胞分化发育、转录因子调控网络等研究中的应用;剖析了该技术在甘薯中单细胞图谱、分化、抗逆和基因方面的应用潜力;最后对该技术的应用进行了展望。
关键词：
单细胞转录组测序 甘薯 细胞异质性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
吴显荣
本文总结了近年来我校木瓜蛋白酶的研究及应用进展。1)对国产木瓜乳汁粗酶进行了分离与纯化,得到了重结晶的木瓜蛋白酶和木瓜凝乳酶,结晶分别为柱状和针状;2)为了提高木瓜蛋白酶活性检测的准确性,增强国际市场的竞争能力,采用紫外分光光度法,茚三酮显色法及BAEE法对国内外不同来源的木瓜蛋白酶进行了比较,找出以上3种方法的最适反应条件、提出了在工农业生产中的应用途径;3)在研制木瓜蛋白酶的基础上,利用酶工程方法,制备了纤维素固定化木瓜蛋白酶和琼脂固定化木瓜蛋白酶,增强了酶的热稳定性及保存性,用于啤酒生产可以提高防浊效果、增进氨基酸营养;4)与广州园艺公司、广州酶制剂厂及前进食品厂等合作,进行了木瓜蛋白酶...
关键词：
木瓜蛋白酶 木瓜凝乳酶 固定化酶 嫩肉粉
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘文婷 田立宁 聂小妮 梁宗锁 何蔚娟
【目的】探讨转基因苜蓿植株根、茎、叶和体细胞胚中外源GUS的表达情况,为外源蛋白在苜蓿体细胞胚中的积累提供理论依据。【方法】以在加拿大广泛种植的N4.4.2紫花苜蓿品种的叶柄为外植体,进行农杆菌GV3101介导的苜蓿遗传转化,将感染的苜蓿叶柄外植体置于不同的转化培养基中培养,获得了适合于农杆菌介导的转基因苜蓿植株,将其用于转基因体细胞胚的诱导。采用PCR方法筛选阳性株系,并对其进行GUS组织化学染色分析,对转基因植株根、茎、叶和体细胞胚进行荧光定量分析。【结果】以苜蓿叶柄为外植体成功获得11株阳性转基因植物,转化效率为30.6%。GUS荧光定量分析结果表明,体细胞胚中GUS外源蛋白的表达量明显...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
苏良科 范红结 陆承平
采用通用的模式细胞HEp 2作黏附及黏附抑制试验 ,研究马链球菌兽疫亚种ATCC35 2 4 6株类M蛋白的黏附作用。结果表明 ,ATCC35 2 4 6株可以黏附HEp 2细胞。用重组表达的类M蛋白鼠抗血清处理ATCC35 2 4 6 ,可抑制其对HEp 2细胞的黏附 ,最大抑制率达 81 4 % ;而ATCC35 2 4 6的全菌鼠抗血清在 1∶80 0时能完全抑制它对HEp 2细胞的黏附。此外 ,热酸提取的ATCC35 2 4 6株的类M蛋白和重组表达的类M蛋白可不同程度地抑制该菌株的黏附 ,前者在 16 0μg·mL-1有最大的黏附抑制率 ( 4 0 % ) ,而后者在 6 0 μg·...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
姜蓬垒 时应娣 侯艳雯 韩兵社 张俊芳
为探索低温压力对斑马鱼细胞组蛋白修饰的影响,建立并优化使用斑马鱼(Danio rerio)成纤维细胞ZF4进行染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)的条件。本研究分别优化了ChIP过程中裂解细胞所使用的NP-40浓度、超声破碎的时间,确定了最佳NP-40浓度为0.2%,超声时间为20 min。利用针对β-actin启动子区域的引物,通过常规PCR初步验证ChIP实验是否成功。琼脂糖凝胶电泳结果显示, IgG组常规PCR产物基本无条带,H3K27me3组条带较暗, H3K4me3和H3K27ac组有较亮条带,初步说明实验可靠。使用正常培养(28℃)与长期低温驯化(18℃, 30 d)的斑马鱼成纤维细胞ZF4作为实验材料,通过优化之后的ChIP技术进行实验。分别使用qPCR和ChIP-qPCR检测低温驯化对肿瘤坏死因子b(tumor necrosis factor b,tnfb)基因表达以及其启动子区域H3K4me3、H3K27ac、H3K27me3的影响。qPCR结果显示tnfb基因经过低温驯化后上调,而ChIP-qPCR结果显示,tnfb基因启动子区域的H3K4me3、H3K27ac富集度也出现升高, H3K27me3没有明显变化,提示低温压力可能通过影响tnfb基因启动子区域的H3K4me3、H3K27ac水平来调控tnfb基因的表达。本研究建立并优化的ChIP实验条件可以用来研究ZF4细胞组蛋白修饰变化,为下一步探索低温压力对斑马鱼细胞全基因组组蛋白修饰的影响奠定基础。
[期刊] 中国科学技术大学学报
[作者]
谢可为 汪骞
细胞内物质的主动运输主要通过马达蛋白这一特殊的纳米机器来完成。在运输过程中，马达蛋白之间的协作性显著影响着距离、速度等重要的运输特性。为了理解这一机制，我们结合Gillespie模拟和理论推导，解释了单马达蛋白的力学特性如何影响了多个马达蛋白之间的协作性，进而对运输距离进行调节。我们建立了一个深度学习模型来帮助快速获得马达蛋白的运动参数。我们的结果揭示了同向马达蛋白在细胞内运输的物理本质。
关键词：
马达蛋白 胞内运输 深度学习
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘永夏 刘建柱 成子强 周栋 王振勇 刘海涛 王林 柴同杰
【目的】针对猪附红细胞体g1基因编码的MSG1表面粘附蛋白(rMSG1)和以此蛋白制备的多克隆抗体,建立相应的ELISA方法进行猪附红细胞体的临床检测,并进行效果评估,以获得一种猪附红细胞体感染的有效检测手段。【方法】将MSG1-pET28c_E.coli BL21菌株,在适宜的条件进行诱导表达,经菌体破碎、层析等步骤获取纯化的目的蛋白。以纯化的rMSG1制备免疫原接种小鼠,获取符合要求的多克隆抗体。以rMSG1和多克隆抗体建立ELISA检测方法,分析其敏感性、特异性、符合性和重复性。【结果】接种后获得了符合效价的抗血清;基于rMSG1的间接ELISA方法临床检测猪附红细胞体感染率为46.25...
关键词：
猪附红细胞体 MSG1 ELISA 建立
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
李涛 张泽坤 顾连峰
单细胞转录组测序(scRNA-seq)使研究人员能够在单细胞分辨率下研究基因的表达，了解细胞的动态发育轨迹.然而，单细胞分辨率的基因表达矩阵往往具有高维度和高稀疏性的特点，使后续数据处理面临巨大的挑战.因此，本文综述了scRNA-seq数据分析的一般流程和常用软件，这将有助于研究人员选择更合适的分析软件和流程.
[期刊] 中国科学技术大学学报
[作者]
朱洪影 易林 汪子怡 熊伟
细胞是构成生物体结构和功能的基本单位,在各种生命活动中扮演了极其重要的角色.细胞生物学研究,尤其是对单个细胞的研究,是了解生命过程的重要手段.细胞代谢在细胞生命活动中处于重要地位,并对其结构和功能产生重要影响,因此近年来细胞代谢组学受到越来越多的关注.本文介绍了数种应用于单细胞层面的分析方法,包括与荧光、电化学、色谱、质谱等多种手段结合的研究方法.其中,近年来发展的单细胞质谱检测能够对单个细胞的代谢进行精准分析,检测代谢通路中的小分子,并将细胞代谢与细胞的各种生命活动联系起来,具有直接、快速、原位取样与检测等优点,拥有广阔的应用前景.
关键词：
单细胞 代谢组学 质谱 技术进展
[期刊] 中国人力资源开发
[作者]
丁千城
公元前299年,发生了一件匪夷所思的外交事件。秦国国君秦昭王邀请楚国国君楚怀王到武关(陕西商南)举行一个小型峰会,就彼此关心的国际问题交换意见。秦国的邀请函是这么说的,但后来事态的发展出乎所有人的预料。楚怀王一到武关,秦昭王直接扣押了他,并且进一步劫持到秦国首都咸阳,强迫楚怀王割让巫郡(四川巫山)、黔中郡(湖南吉首)。楚怀王此时像条"汉子",愤怒地加以拒绝,秦昭王就永久地扣留了他。"国不可一日无君",楚国只好重新立了一个国君(楚顷襄王)。
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