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[期刊] 水产学报
[作者]
陈松林 李文龙 季相山 谢明树 徐营 邓寒
针对半滑舌鳎雌雄个体生长差异过大、雌性性腺发育成熟后腹部凸起影响舌鳎生长和商品鱼质量等问题,开展了人工诱导半滑舌鳎三倍体的研究。采用静水压处理抑制半滑舌鳎受精卵第二极体排出进行染色体加倍,筛选出有效的静水压处理强度及其持续时间。结果表明,孵化水温23℃左右时,授精后5 min,采用36 MPa的静水压压力,休克处理4 min,三倍体诱导率最高,达到100%。采用该诱导条件,大批量获得了半滑舌鳎三倍体鱼苗。采用流式细胞仪分析了三倍体鱼苗细胞DNA含量,表明三倍体鱼苗细胞DNA含量为二倍体对照鱼苗的1.5倍。通过染色体分析表明,三倍体鱼苗的染色体数为63条,而二倍体鱼苗的染色体数为42条。
关键词：
半滑舌鳎 三倍体 静水压处理
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李文龙 陈松林 季相山 谢明树 徐营 邓寒
采用静水压法处理半滑舌鳎(Cynoglossus semiliaevis)受精卵以抑制其卵裂并进行染色体加倍,筛选出有效的静水压处理起始时间、处理强度及其持续时间。结果表明,孵化水温(23±0.2)℃时,授精后21.5 min,采用40 MPa的静水压压力,休克处理4.5 min,四倍体诱导效果最好,鱼苗四倍体率达到68.3%。采用流式细胞仪分析了四倍体鱼苗细胞DNA含量,表明四倍体鱼苗细胞DNA含量为二倍体对照鱼苗的2倍。通过染色体制作分析表明四倍体鱼苗的染色体数为84条,而二倍体对照鱼苗的染色体数为42条。本研究采用静水压方法,在国内外首次建立了半滑舌鳎四倍体诱导方法。本项技术的建立旨在为...
关键词：
半滑舌鳎 四倍体 人工诱导 静水压
[期刊] 水产学报
[作者]
季相山 陈松林 武鹏飞 田永胜 姜运良
为探讨在雌核发育研究中紫外灭活的异源精子的细胞质等是否对"受精"卵的发育产生影响,本文对紫外灭活的异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育过程进行了比较研究。结果显示,在胚盘形成期、二细胞期、多细胞期和囊胚期,异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育时序及形态无显著差异。之后,灭活的异源精子诱导的单倍体胚胎发育速度比同源精子诱导的单倍体胚胎要慢,至受精后18 h 48 min已慢1个发育时期,说明在发育前期,异源精子诱导的单倍体胚胎发育阻力更大。肌节期后,同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育也严重受阻,与异源精子诱导的单倍体胚胎发育速度无显著差异;且单倍体胚胎陆续大量死亡,但异源精子诱导的...
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
田永胜 陈松林 邵长伟 刘本伟 庄志猛
半滑舌鳎是分布在我国黄、渤海的特有鱼类,雌鱼明显具有较雄鱼生长快的特点,利用雌核发育方法诱导产生半滑舌鳎超雌鱼,通过与正常雄鱼交配,最终可培育生长速度快、个体大的全雌性后代,对于提高养殖效益具有重要的意义。为此利用冷冻保存的异源鲈鱼精子诱导半滑舌鳎卵产生雌核发育二倍体、单倍体、杂交胚胎,利用同源精子受精产生普通二倍体,在Olympus显微镜下对它们的胚胎发育进行了观察比较。冷冻解冻的鲈鱼精子,在1000μj/cm2紫外线下照射0·2~1min,诱导半滑舌鳎卵受精,在受精后2~5min将卵置于2~5℃的水浴冷休克20min,获得了雌核发育的胚胎和鱼苗,在21·7~23·6℃水温中,雌核发育胚胎经...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
孙建华 鲍宝龙
对体色相关通路基因的9个错义突变位点进行了测序调查，在体色黑化、体色白化和体色正常的半滑舌鳎小样本群体中，发现其中3个突变位点与体色白化存在显著性相关，进一步通过扩大样本验证，显示B型内皮素受体第160位的C/T位点(ertB-160-C/T)与体色白化呈极显著性相关（P0.05），而在无眼侧皮肤中的表达明显高于有眼侧皮肤（P<0.01）。在白化半滑舌鳎中tyr在有眼侧色素部分和非色素部分的表达水平均显著高于无眼侧（P<0.01）。此外，白化半滑舌鳎中无眼侧alox5的表达水平均显著高于有眼侧（P<0.05），有眼侧白化区alox5的表达水平明显高于有眼侧白色皮肤（P<0.01），首次鉴定出与半滑舌鳎养殖群体体色白化相关的突变位点，为今后半滑舌鳎的体色选育提供了分子基础。
关键词：
半滑舌鳎 体色异常 白化 突变位点
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
孙建华 鲍宝龙
对体色相关通路基因的9个错义突变位点进行测序调查，在体色黑化、体色白化和体色正常的半滑舌鳎小样本群体中发现3个突变位点与体色白化存在显著性相关，进一步通过扩大样本验证，显示B型内皮素受体第160位的C/T位点(ertB-160-C/T)与体色白化呈极显著性相关，酪氨酸酶第473的G/A位点(tyr-473-G/A)和花生四烯酸5-脂氧合酶的第1 178位的C/T位点(alox5-1178-C/T)与体色白化呈显著性相关。这3个突变位点分别位于蛋白Periplasmic＿Binding＿Protein＿type1、Tyosinase C-terminal和Lipoxygenase结构域。qRT-PCR检测表明：ertB在白化半滑舌鳎中有眼侧正常和白化皮肤表达没有显著差异，而在无眼侧皮肤的表达显著高于有眼侧皮肤；在白化半滑舌鳎中tyr在有眼侧正常和白化皮肤的表达水平均显著高于无眼侧；白化半滑舌鳎中无眼侧alox5的表达水平均显著高于有眼侧，有眼侧白化区alox5的表达水平明显高于有眼侧正常皮肤。这些与半滑舌鳎养殖群体体色白化相关的突变位点可为今后半滑舌鳎的体色选育提供分子基础。
关键词：
半滑舌鳎 体色异常 白化 突变位点
[期刊] 中国水产科学
[作者]
孙中之 柳学周 徐永江 兰功刚 曲建忠 马学坤 蔡文超 关健
对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)采取控温控光和营养强化培育等措施,使67尾经过驯养的野生亲鱼性腺全部发育,并自然产卵和受精,其中,32尾雌鱼产卵14350 mL,包括浮卵4635 mL,浮卵率32.5%。在水温(23±1)℃,盐度30±2,pH 8.0~8.2的孵化条件下,32~36 h孵化出仔鱼,初孵仔鱼约350万尾,总孵化率82.6%。90尾2+龄人工亲鱼中,部分亲鱼性腺发育成熟,其中,雌鱼占13.2%,雄鱼占30%,但均未产卵或排精。12个鱼苗培育池先后放入人工初孵仔鱼199万尾,在(23±2)℃水温条件下,经过70 d的培育,共培育出全长30~50 mm的商品...
关键词：
半滑舌鳎 工厂化人工育苗 工艺技术
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
粟子丹 李晋 史成银
２０１２和２０１３年，山东某育苗场１５–２０日龄的半滑舌鳎（Ｃｙｎｏｇｌｏｓｓｕｓ ｓｅｍｉｌａｅｖｉｓ ｇüｎｔｈｅｒ）鱼苗出现暴发性大规模死亡，７ ｄ内死亡率高达９０％–１００％。本研究调查了疾病的发生情况和临床特征，采集病鱼样品进行了组织病理学检查，并运用ｒｔ－ＰＣｒ方法进行了病原的检测和基因序列分析。结果发现，半滑舌鳎鱼苗一般在７月和８月发病，发病时养殖水温为２２–２４℃。病鱼游泳行为异常，表现为上下翻游、螺旋性游动、全身大幅度波浪状浮动症状，但病鱼体表无出血和溃疡症状。组织病理检查发现，病鱼脑和视网膜组织出现严重的空泡化及坏死。病鱼样品的ｒｔ－ＰＣｒ检测结果全部呈鱼类神经坏死病毒阳性．．．
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
于瑞海 王昭萍 邸炜鹏 张晨晨 高倩 段金龙
通过低盐海水浸泡海湾扇贝受精卵抑制受精卵第二极体释放的方法诱导海湾扇贝产生三倍体。当海湾扇贝的受精卵40%出现第一极体时,立即用不同盐度梯度即22.5、20、17.5、15、12.5、10、7.5、对照组(盐度30)的海水对受精卵进行处理10、15min后,马上将处理的受精卵移入正常海水中孵化。实验结果表明,不同梯度低盐海水可以诱导海湾扇贝产生三倍体,盐度为20以上时,三倍体诱导率小于2.91%,但随着盐度的下降,三倍体诱导率迅速提高,当盐度为12.5时,三倍体诱导率高达85.91%。当盐度低于7.5时,由于D形幼虫极少,三倍体诱导率无法测出。在处理时间上,15min的处理效果比10min处理...
关键词：
海湾扇贝 低盐度 三倍体 D形幼虫孵化率
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨春玲 陈晓汉 李咏梅 彭敏 蒋伟明 韦嫔媛 王大鹏 杨彦豪
采用6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)抑制受精卵第二极体排放法诱导近江牡蛎产生三倍体,通过6-DMAP浓度、诱导时机、诱导持续时间3因素3水平正交试验设计,得出近江牡蛎三倍体诱导3因素最优水平组合,即当30%受精卵出现第一极体时,将受精卵浸泡在含6-DMAP 450μmol/L的海水中20 min;3因素影响诱导率的主次顺序为:6-DMAP浓度→诱导时机→诱导持续时间。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
孙衍旭 龚小玲 邵长伟
为探究dnmt3a基因在半滑舌鳎性逆转过程中的调控作用，开发适用于半滑舌鳎的DNA甲基化编辑系统，克隆了半滑舌鳎dnmt3a基因的CDS区序列，并通过生物信息学分析其结构域特点以及进化过程中的保守性，利用qPCR分析了其在半滑舌鳎不同性别中的表达模式，探究了DNA甲基化酶抑制剂5-Aza-dC处理对dnmt3a基因表达的影响。结果表明，dnmt3a基因全长3063bp，编码1020个氨基酸，包括三个核心结构域（PWWP结构域、ADDz结构域和AdoMet＿MTases超家族），dnmt3a基因结合结构域（PWWP结构域、ADDz结构域）相对保守，催化活性结构域（AdoMet＿MTases超家族）与哺乳动物和爬行动物有较大差异。基因表达模式分析表明，雌性半滑舌鳎性腺组织dnmt3a基因表达量显著高于雄性和伪雄性。5-Aza-dC处理后，dnmt3a基因表达显著升高。本研究表明dnmt3a基因在DNA 甲基化调控半滑舌鳎性别决定与分化过程中发挥重要作用，为阐明半滑舌鳎性逆转机制和实现半滑舌鳎单基因靶向DNA 甲基化编辑提供参考。
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
柳学周 庄志猛 马爱军 陈四清 孙中之 梁友 刘寿堂 翟介明 曲建忠
总结了2003～2004年作者对半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis Günther)工厂化育苗技术的开发研究结果,论述了半滑舌鳎苗种生产过程的关键技术。通过改进亲鱼培育条件和强化培育、受精卵孵化条件的综合调控、加强饵料的合理搭配和投喂、水环境调控等技术措施,提高了苗种成活率,完善了半滑舌鳎苗种生产技术工艺,取得了良好的育苗效果。两年间在莱州、海阳、胶南3个试验基地分别培育出全长30～40mm的半滑舌鳎苗种84.8万尾、131万尾和61.5万尾,单位面积平均出苗量分别为1696尾/m2、1985尾/m2和2050尾/m2,苗种成活率分别达到20.2%、25.5%和30.9%。在...
关键词：
半滑舌鳎 苗种培育 技术开发
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈春山 魏凯 韩姝伊 郑伟 郭明磊 董颖 胡红霞
为探索细鳞鲑(Brachymystax lenok)三倍体育种技术的方法,采用热休克法进行了三倍体诱导实验,共分为6组,其中26℃设置4组,分别讨论不同起始时间和不同持续时间的诱导情况,其余2组选取24℃和28℃最优处理条件进行比较。结果显示:上述6个实验组均能够获得三倍体个体,24℃和28℃诱导率分别为48. 26%和57. 62%,26℃条件下平均诱导率达到82. 05%,各组间三倍体诱导率存在显著差异(P
[期刊] 中国水产科学
[作者]
孟庆磊 黄晓婷 赵海波 赵婷 李宁 王昭萍 胡晓丽 胡景杰 包振民
荧光显微观察表明,20℃水温下,栉孔扇贝(Chlamys farreri)的卵与海湾扇贝(Argopecten irradians)的精子可以正常受精和发育,具备人工诱导三倍体的可行性。亲贝充分促熟后,分开催产,以20:1的精卵比授精;在50%的受精卵排出第1极体时,以60mg/L6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)处理受精卵10-25min,可诱导75.23%-92.14%的三倍体;6-DMAP处理15min综合诱导效果最好,三倍体诱导率可达88.56%,孵化率可达53.52%。得到的三倍体幼虫经基因组原位杂交(Genomic in situ hybridization,GISH)验证,为含有...
[期刊] 水产学报
[作者]
范超 张学开 张兴志 唐黎明 李金龙 李琼珍 王昭萍
三倍体技术在水产动物育种中应用广泛且产生了巨大的经济效益。为了探究不同盐度对诱导合浦珠母贝三倍体的效果，本研究首次利用低渗方法诱导合浦珠母贝(Pinctada martensii) 三倍体，通过控制变量法从不同盐度、诱导时机以及诱导时间中探究最适诱导条件。同时对合浦珠母贝卵裂率、孵化率以及存活率、壳长、三倍体率的变化进行了探究。结果表明：在盐度14、50%受精卵释放第一极体（PBⅠ）及诱导15 min时D形幼虫的三倍体率最高，分别为64.16%±6.92%、65.87%±6.51%以及65.14%±1.93%。三倍体幼虫并未表现出明显优势；低渗对胚胎造成的影响使幼虫存活率和三倍体率有所下降。通过对卵裂率、孵化率和15日龄存活率、壳长及三倍体率进行主成分分析，在三种诱导条件中均保留了前两个主成分，且保留的主成分的累积方差贡献率均超过了85%。盐度14、50%受精卵释放PBⅠ及诱导15 min分别在各自实验中的综合评价得分分别为第6、第1和第1。该研究表明合浦珠母贝三倍体幼虫在生长方面的优势不明显，50%受精卵释放PB Ⅰ及诱导15 min两个诱导条件适合合浦珠母贝三倍体诱导。本研究可为合浦珠母贝三倍体育种提供一种新的思路，有助于提高生产效益。
关键词：
合浦珠母贝 低渗 三倍体 主成分分析
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