主要讨论动词重叠ＶＶ式已然用法的具体表现，包括其所用动词语义、语境要求、表量具体性与现实陈述性等。已然语境中的重叠ＶＶ通常使用短时肢体动作动词，需要后续语境，表达具体的短时动量意义，体现现实陈述本质。这些特征说明动词重叠内部可能存在多个构成部分。

本文在梳理分析手语情态动词定义和分类,以及相关实例研究的基础上,指出情态动词的产生和演变主要有两条语法化路径:一是从手语中某个自主实词转变为稳固的情态标记;二是从手势进入手语系统。本文还初步分析了中国手语中表示可能性的两个词语,研究结果显示,中国手语情态动词同样遵循上述两条路径。

【目的】克隆猪囊尾蚴AgB基因并在体外细胞中表达。【方法】采用RT-PCR法分别扩增AgB基因的上半段和下半段序列。采用重叠延伸PCR法(splicing overlap extension PCR method,SOE-PCR)把具有35个相同碱基的上下半段扩增为全长基因,并构建到真核表达载体pVAX1,将酶切、PCR、测序鉴定的阳性质粒经脂质体转染BHK-21细胞。通过SDS-PAGE、Western-blotting、间接免疫荧光法,检测细胞中B抗原的表达。【结果】琼脂糖凝胶电泳显示扩增的不同片段大小分别与预期的相同。重组表达载体转染BHK细胞后有荧光出现。表达的蛋白能被猪囊尾蚴病阳性血...

表达问题有时比发现问题更重要,适当的表达有助于得到上司、下属、同事、客户,甚至反对者的认可或谅解。问题管理应用的三要素是挖掘问题、表达问题、解决问题。表达问题首先是指提问和陈述问题,同时也包括表达意见、表达建议和表达方案。如果不能合适、有效地表达问题,经常会导致工作量巨增、问题扩大或事与愿违。有这样一个故事:

一、复杂的问题简明化在反映问题、提出解决问题的建议时,要化繁为简、删繁就简,善于用简明的语言表达复杂的内容,用简明的语句总结自己的观点。如果问题比较复杂,可以把问题的分析论证过程作为附件,在主报告中简明扼要地阐明观点、提出对策或建议。如果主报告无法简化,可以用一页以内的摘要把关键问题、解决方案、实施步骤总结清楚。表达问题中抓重点也是简明化的一种方式。例如,一家企业集团

基于构式搭配分析法的实证性研究显示,共有29个动词出现在Here指示构式内,且这些动词在数量、分布以及与构式的关联强度等方面都存在显著差异。这种差异源于动词与构式在语义上存在不同的兼容度。研究发现,受Here指示构式的语义限制,完成性动词与构式融合时,需要消减有界性,从而临时获得非完成性概念。同时,动词与构式的关联强度还受制于其表征事件之间的关系类型。表征Here指示构式事件子类的动词与构式的兼容度最高。与构式事件构成前提关系的动词亦可与构式形成较高的兼容性。而只能在有限条件下与构式事件相关联的动词表现出

文章聚焦现代汉语所谓"零价动词"问题。以认知语言学的原型范畴理论为理论基础,在"积小成大"原则指导下,通过原型对比的方法,综合运用形式及意义两个方面的各项指标进行检测,从而说明"下雨"类动词结构在从词到短语的连续统中更加靠近短语一端,即更加接近典型的动宾短语。基于多语言比较的类型学视角,分析了造成误判的原因。通过对是否强制、能否转指等问题的辨析,论证"地震"类实际上是一价动词。因此,现代汉语并不存在所谓"零价动词"。

管理者的脑海里充斥着各种管理工具和思想,但他并不知道遇见具体情形时该用什么方法思考,用什么工具推动工作......困惑H公司因管理发展的需要,聘请了商老师和周老师分别做精益管理和ISO体系辅导。这时,H公司的生产经理祝放感到很困惑:大学的管理学教授说过,管理的对象是"人、财、物",管理的环节是"产、供、销";现在周老师说,管理的对象是过程,管理的环节是价值链(供应链),管理的工具有QC新、旧七大手法等;而商老师说,管理的对象是现场,精益崇尚三现主义,精益管理的工具有单件流、5S、标准化、目视化、TPM、傻瓜化、问题解决、价值流图析等,工业思维在PDCA过程管理中体现。

语言和思维之间存在着密不可分的关系。中西思维模式不同,其语言表达方式也大相迥异。本文概括总结了有关中西思维模式和语言差异的主要论点,并采用对比分析的方法进行商务英语教学,使学生对此有了初步的意识。

根据语境及表达的需要,日语自动词句有时可以译为汉语中的“被”字句。本文试图对日语自动词与汉语被动式的这种不对称的语言现象进行比较分析,以进一步探讨日语自动词独特的语义功能。

情感表达抽取工作是细粒度情感挖掘的重要任务之一.中文微博中包含大量网络新词和不规范词,现有的方法在进行微博情感表达抽取任务时不能很好地处理上述情况.通过研究发现,微博中新词大量分布在文本的情感表达部分,于是提出了基于CRF的联合抽取模型,即将新词发现融入到情感表达抽取任务中,从而改进原有工作的不足.实验结果表明,新词探测对微博文本情感表达抽取有很好的指示作用,在电影领域和开放领域的微博数据集上分别进行实验,F1值均提高了2%以上.

本文首先对国外较有影响力的商业模式表达模型进行了回顾,通过对不同模型的纵向演进剖析和横向比较,分析了它们之间的联系和区别、优点和缺点,并在提取现有商业模式表达模型核心要素的基础上,提出了一个多层次的商业模式整合表达模型,最后指出了现有的商业模式表达模型研究仍存在的不足,并对未来相关研究进行了展望。

根据相近物种的同类基因设计引物,从凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei肌肉组织中克隆获得原肌球蛋白基因(TPMS),长度为901bp,其中包含长度为852bp的完整开放阅读框,编码原肌球蛋白分子量为32.8kDa;RT-PCR结果显示,原肌球蛋白在心、肝胰腺、胃、鳃、肠和肌肉组织中均有表达,在肌肉中表达量最高,在鳃中表达量最低;将原肌球蛋白基因构建原核重组表达载体TPMS-pET30a,转化受体菌株BL21(DE3)并利用IPTG诱导后能够大量表达,蛋白分子量为38.2kDa;经优化,IPTG的最适诱导浓度为0.05mmol/L,最适诱导时间为4h;经过亲和纯化后,能够得到纯度9...

【目的】类毒素过敏原蛋白(VAPs)是松材线虫侵染松树过程中分泌的一类蛋白。此类蛋白可通过抑制松树的防卫反应,从而利于松材线虫在松树内的定殖与扩散。本研究对4种类毒素过敏原蛋白进行原核表达、多抗制备和基因的表达模式分析,明确松材线虫Bx-VAPs蛋白的结构与功能,为阐明该类蛋白在松材线虫与寄主松树互作中的作用机理提供基础支撑。【方法】本研究利用聚合酶链式反应(PCR)扩增松材线虫4个Bx-VAPs基因,通过实时荧光定量(RT-qPCR)方法检测不同龄期松材线虫4个Bx-VAPs基因的表达量。同时,将扩增的4个基因全长产物分别转化至pET32b原核表达载体,构建重组质粒pET-32b-VAPs,经鉴定正确后的重组质粒转化至大肠杆菌BL21DE3进行诱导表达。利用纯化的Bx-VAPs蛋白分别免疫Balb/c鼠,4次免疫后获得多克隆抗体;采用间接酶联免疫吸附法ELISA测定抗体血清效价;利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western-blot)进行蛋白鉴定。最后,应用生物信息学方法分析这四个蛋白的理化性质、二级结构和表面特性,预测B细胞抗原表位。【结果】松材线虫4个Bx-VAPs基因在不同龄期的表达量存在显著差异,其中Bx-VAP_1和Bx-VAP_2基因在成虫期表达量较高,Bx-VAP_3和Bx-VAP_4基因在繁殖型L3时期表达量较高。构建获得的重组质粒pET-32b-VAPn诱导表达的蛋白分子量介于21～31 kDa之间,纯化后的多克隆抗体antiVAP_1、anti-VAP_2和anti-VAP_3均对松材线虫蛋白液具有较高的特异性,但anti-VAP_4抗体未能与松材线虫蛋白液结合反应。4个Bx-VAP蛋白的二级结构均以α螺旋和无规则卷曲为主,存在信号肽,具有SCP结构域,无跨膜结构域,BxVAP_1潜在的优势B细胞抗原表位较多。【结论】重组质粒pET-32b-VAPn诱导表达的蛋白大小与预测的蛋白大小一致,均为包涵体表达,制备的多克隆抗体anti-VAP_1、anti-VAP_2和anti-VAP_3效价高,特异性良好,Bx-VAP_1具有潜在的B细胞抗原表位优势,为进一步研究松材线虫VAPs蛋白的功能及其相关致病机制研究提供了实验材料和基础。

为了研究烟草Nt RAP2-7基因在非生物胁迫响应中的功能,采用同源克隆的方法,在烟草品种K326中克隆到1个ERF转录因子基因Nt RAP2-7。并利用生物信息学软件分析了该基因编码蛋白的理化性质、空间结构与系统进化关系。序列分析结果表明,该基因序列全长1 398 bp,共编码465个氨基酸残基,预测蛋白的分子量为51. 16 ku。该蛋白包含一个由3个β-折叠及1个α-螺旋组成的保守结构,并含有58个磷酸化位点。亚细胞定位预测表明,该蛋白主要定位于细胞核,并包含单分型的核定位信号序列。进化分析表明,Nt RAP2-7蛋白与林烟草RAP2-7蛋白序列同源性最高,为98%。运用q RT-PCR技术进行了该基因的表达模式分析,组织表达分析发现,Nt RAP2-7基因在烟草根、茎、叶、花中均有表达,但在根中的表达量最高。该基因的表达在低钾、高盐、干旱、ABA、H2O2处理下受到诱导和在低温处理下受到抑制,结果表明,烟草Nt RAP2-7基因参与了烟草的非生物胁迫应答反应。并利用双酶切法成功构建了p BI121-Nt RAP2-7过表达载体,为今后该基因在非生物胁迫下的功能研究奠定了基础。