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[期刊] 西南农业学报  [作者] 赵钦  孙亚妮  孔义波  张兴晓  姜世金  
利用副鸡禽杆菌的A、B和C 3个血清型的参考菌株Hpg-8、CCM6075和Hpg-68分别制备相应的抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到A型、B型和C型3种单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型菌株发生凝集。利用这3种单因子血清对临床上分离到的6株副鸡禽杆菌进行血清型的鉴定,结果表明6株地方分离株均为血清A型。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 袁亚宏  岳田利  高振鹏  王丽威  
 通过对嗜酸乳杆菌发酵曲线的测定,初步掌握了该菌的生长、繁殖和代谢规律。在此研究基础上进行的发酵试验结果表明,采用20g/kg接种量,37℃恒温静置培养6h,活菌数最多,菌龄处于对数生长期末期,适宜冻干;对几种复合保护剂的保护效果进行研究,得到冻干复合保护剂的最佳配比为:蔗糖40g/kg,甘油10g/kg,L-cys1g/kg和Vc1g/kg。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 马艳平  张杰  陈豪泰  马丽娜  丁耀忠  杨生海  刘永生  
副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum,HPG)是鸡传染性鼻炎的病原菌。近年来,北京、陕西、四川等地证明了该病的发生。为了了解该病在山东省的流行状况,从山东德州地区5个鸡场的20只疑似鸡传染性鼻炎鸡体内共分离到6株细菌,经细菌分离培养、生化试验、鸡胚接种试验和16s rDNA基因序列分析等方法鉴定为副鸡嗜血杆菌。并经玻片凝集试验、Dot-ELISA、血凝试验分型研究,证实6株分离菌株均为副猪嗜血杆菌A型。从而为以后鸡传染性鼻炎的免疫治疗提供理论依据。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 于长青  赵学明  姚琨  张日俊  
为降低抗生素替代品———大豆活性肽绿色饲料添加剂的生产成本 ,采用紫外线与亚硝基胍 (NTG)多重诱变的方法选育芽孢杆菌CAU2 0 8,以提高产蛋白酶能力。结果显示 :15W紫外灯最适照射时间 3min ,距离 30cm ;亚硝基胍最适质量浓度为 1mg/mL ,且效果好于前者 ,两者复合诱变比单一诱变效果好。将诱变选育的蛋白酶高产菌株No .111用于液态发酵制备大豆肽饲料添加剂 ,6 0h发酵液的水解度为 2 6 9% ,比母本菌株CAU2 0 8的水解度 18 5 %提高了 8个百分点。如果两者达到相同的水解度 (19 0 % ) ,则No .111比CAU2 0 8的发酵周期缩短约...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陈凡  何启盖  陈焕春  吴斌  刘正飞  Ross Bowle  Pat Blackall  
利用14个血清型的胸膜肺炎放线杆菌的标准菌株制备诊断抗原,通过玻片凝集试验,琼脂扩散试验和对流免疫电泳,以标准抗血清作为参考,检验各种诊断抗原的灵敏性和特异性。分别用凝集抗原、超声波处理抗原和酚水抗原对来自湖北、湖南、江西、河南、安徽5省猪场的155份送检血清进行检测。结果表明可以对送检血清快速、准确地进行鉴别诊断和血清分型。
[期刊] 草业科学  [作者] 李茜童  张文德  杨亚贤  钱秀娟  
本研究旨在建立一种利用昆虫病原线虫共生细菌培养单菌线虫的方法,可为检测线虫致病力和收集侵染期幼虫提供基础。首先分别分离了甘肃省抗低湿胁迫能力较强的卡森斯氏线虫(Steinernema kraussei) 0657L和非耐旱性短尾异小杆线虫(Heterorhabditis brevicaudis) 0641TY两个品系线虫的共生菌,然后在NBTB培养基上对分离到的共生细菌进行纯化和培养,随后将单菌落转移到LB培养基上。最后,从被侵染的大蜡螟(Galleria mellonella)体内收集种子怀卵成虫至培养有共生菌的LB上孵育,培养以收集侵染期线虫。研究结果表明,本研究所述方法简便快速地分离出了两个品系昆虫病原线虫的共生菌,并可通过培养共生菌收集侵染期线虫,筛选到一种直接从大蜡螟体内分离怀卵成虫至纯化的共生菌上孵育线虫,以快速准确获得整齐龄期的单菌线虫的简便方法。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 杜娜  顾泽茂  袁军法  林蠡  翟艳花  刘学芹  罗宇良  
根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)气溶素(aerolysin,Aer)基因的序列设计引物,以来自湖北的鱼源A.hydrophila分离株为模板扩增出aer基因的ORF序列,克隆到pMD18-T载体上进行序列测定。测序结果表明,A.hydrophila的aer基因的系统进化树中国内菌株聚为一支,国外菌株聚为一支。通过pET-32a(+)载体构建Ah15株aer基因的表达载体pET32a-15,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行诱导表达,通过SDS-PAGE分析,显示与预期大小约72.2ku相吻合的融合蛋白带,且以包涵体形式存在。浓缩后的...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 李国平  周伦江  姚金水  李沁光  李孟潮  黄沧海  
用猪致病性大肠杆菌 K88、K99、987P、F4 1 标准菌株制成的灭活油佐剂作为免疫原 ,待产蛋鸡免疫后收集高免卵黄 ,然后提取、纯化 ,精制成鸡抗猪大肠杆菌特异性高免卵黄抗体并用于临床 .结果表明该制剂安全性好 ,每头仔猪注射或口服 2-4m L剂量预防仔猪大肠杆菌性腹泻 ,效果明显
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王大鹏  吴家强  于江  丛晓燕  杜以军  孙文博  张玉玉  时建立  李俊  周顺  王金宝  
本文对副猪嗜血杆菌血清5型生长曲线进行了研究。结果表明:种子液接种后6 h开始进入对数生长期,培养24 h后活菌数达到最高峰,20~30 h活菌数维持在同一个水平,进入稳定期,30 h后活菌数呈现下降趋势,进入衰退期。该曲线提供了副猪嗜血杆菌生长规律,为疫苗研制提供了理论基础。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 蔡旭旺  刘正飞  陈焕春  吴斌  金梅林  Pat Blackall  
 从全国十多个省市送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到 32株细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定;根据副猪嗜血杆菌 16SrRNA序列设计引物进行PCR扩增, 将 822bp扩增片段连入T 载体后测序, 再与GenBank(M75065 )中的序列进行比对,表明其与国外副猪嗜血杆菌菌株 16SrRNA序列的同源性为 97%以上,确定为副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis, Hps)。将其中的 15株按Kieletein Rapp Gabriedson(KRG)琼脂扩散血清分型方法进行血清型鉴定,结果为血清 5型 3株、血清 4型 4株、血清 13型2株、...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 朱锦辉  权军利  何玉科  陈耀锋  郭东伟  李春莲  曹团武  曹新有  
研究了根癌农杆菌LBA 4404和C58C1生长的培养基类型、菌株生长状态、转化溶液、质粒与感受态细胞共放置时间、质粒加入量、液氮速冻时间及热激条件对质粒P rokⅡ转化的影响。结果表明,以70 mm o/L C aC l2作为转化溶液,YEB培养基制备的、OD600为0.5的LBA 4404感受态细胞与10 ng质粒DNA,于0℃共放置30m in,液氮速冻5 m in,37℃热激5 m in时转化率最高,达1.40×105μg-1;以70 mm o/L C aC l2作为转化溶液,YEB培养基制备的、OD600为0.5~0.6的C58C1感受态细胞与20 ng质粒DNA,于0℃共放置10 ...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 冯鑫磊  李结平  
为探究提高农杆菌侵染效率的最优制备方法,以玉米自交系‘B 104’为转化受体,分析比较YEP固体和液体培养基,AB液体培养基制备的农杆菌EHA 105(植物双元表达载体pCAMBIA 3301)瞬时侵染幼胚能力的差异。结果表明,AB液体培养基制备的农杆菌瞬时侵染率达到100%,染色面积超过30%的幼胚占比约为40%,显著高于YEP培养基制备的农杆菌(P<0.05);AB液体培养基侵染的幼胚产生胚性愈伤的比率为49%,显著高于YEP培养基制备的农杆菌(P<0.05);AB液体培养基侵染产生的转化苗阳性转化率显著高于YEP液体培养基的阳性转化率(P
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 游红  周兴苗  徐家文  李义涛  廖水姣  
选择邻苯二甲酸醋酸纤维素(CAP)为囊材,以苏云金芽胞杆菌(Bt)原粉为囊芯,探讨添加紫外线吸收剂后制备Bt微胶囊剂的工艺条件,并用生物测定的方法进行Bt微胶囊剂抗紫外线降解能力比较。结果表明,Bt微囊剂加工的最佳工艺条件为:Bt原粉/CAP/紫外线吸收剂=100/40/3,pH值3.5左右,温度25℃。生物测定结果表明,经紫外线照射处理后,Bt原粉效价活性保留率为30.7%,以CAP为囊材包被的Bt微胶囊剂效价活性保留率为54.8%,抗紫外线降解能力比Bt原粉提高约24%;以CAP为囊材,添加2种不同的紫外线吸收剂包被的Bt微胶囊剂,其中防效最佳的配方组合效价活性保留率为86.9%,抗紫外线...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 王媛媛  段玉玺  陈立杰  朱晓峰  
研究了青霉素、甘氨酸、溶菌酶浓度、酶解温度、菌龄、再生培养基对生防芽孢杆菌Snb2原生质体的形成与再生的影响。培养液中青霉素和甘氨酸的终含量分别为0.3%和1.0%时,菌株Snb2的生长量最佳;菌株原生质体形成的最佳条件是,溶菌酶浓度为2.0mg·mL-1,酶解温度为35℃,生产原生质体的最佳菌龄为对数生长中期;在最佳再生培养基HCNB培养基上,原生质体再生率为66.0%。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 宋立  宁宜宝  张秀英  沈青春  张广川  林树茂  吴好庭  赵晖  高光  冯忠武  
近几年在中国东北、华南、华中和华北地区采样,得到鸡泄殖腔拭子292份、饲料和水29份、鸡舍尘土和垫料28份,共349份。用麦康凯培养基分离大肠杆菌,共分离到大肠杆菌241株(东北地区107株;华南地区107株;华中地区12株;华北地区15株),分离率为69.1%。共有血清型67种,每种血清型1~2株,个别血清型有10株左右。呈地区性和多样性分布,有些地区有优势型,有的地区优势型不明显。细菌耐药性非常严重,以多重耐药为主,耐10~19种药物的菌株占50%以上,有一定地区性。总体上耐药率最高的是萘啶酸(88.1%),其它依次为四环素85.7%、磺胺甲基异恶唑81.0%、复方新诺明77.1%、氨苄西...
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