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[期刊] 西南农业学报
[作者]
陈紫玉 高文科 李明海 何弟南 龙艺丹 黄蕾 王梓然
【目的】果实色泽作为重要的外观品质，在一定程度上决定其商品价值。就无花果育种前景而言，紫色果皮的品种相比于绿色果皮的品种，具有较好的外观品质及较高的商品和保健价值。因此，对调控无花果果皮颜色的相关基因进行功能性研究具有重要意义。【方法】以‘紫宝’无花果为材料，利用VIGS技术将果皮中类黄酮生物合成调控相关转录因子FcMYB114进行基因沉默，并对其功能进行研究。【结果】系统进化树表明，无花果FcMYB114（c42269＿g1）与红皮梨PyMYB114的亲缘关系最近，序列相似性高达83.12%。VIGS技术应用沉默后的果皮中，花色苷含量约为对照的38.5%，类黄酮生物合成代谢途径相关结构基因和FcMYB114转录因子表达量均发生改变，其中FcDFR、FcANS和FcUFGT表达量均显著下调。【结论】FcMYB114基因可能正向调控无花果果皮花青素合成，为深入研究无花果时空着色差异机理提供理论依据。
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘军 周晓慧 冯翠 武文 庄勇
黄萎病是影响茄子生产的一种重要土传性病害,挖掘利用抗病基因对茄子抗黄萎病育种具有重要的意义。Ve类基因是已知的植物抗黄萎病基因之一。采用同源法从抗黄萎病野生茄中分离Ve类基因的同源序列,构建重组载体TRV2-SlVe,经农杆菌介导侵染植株并接种黄萎病病菌,结合表型观察和半定量RT-PCR技术对结果进行了分析。结果发现,TRV2-SlVe成功地抑制了野生茄中Ve基因的表达,接种植株表现出明显的黄萎病症状。以上结果表明,野生茄中的Ve类基因具有抗黄萎病的特性。
关键词：
野生茄 VIGS 黄萎病 Ve基因
[期刊] 华北农学报
[作者]
王新博 任永哲 岳慧芳 李乐 吕伟增 史校艳 辛泽毓 王志强 林同保
为了进一步研究Ta EF-1α基因在小麦响应干旱胁迫中的作用,首先在正常灌水和干旱胁迫2个处理下对Ta EF-1α基因在转录水平上的表达量进行了验证,并利用VIGS(Virus induced gene silencing)技术将Ta EF-1α基因进行沉默,对其功能进行研究。结果表明,Ta EF-1α基因在m RNA水平上的表达量与其蛋白水平上的变化趋势一致,均受干旱诱导上调表达。与正常灌水且未进行VIGS沉默处理的植株相比,干旱处理且未进行VIGS沉默处理的植株中Ta EF-1α基因表达量极显著升高,其叶片相对含水量也极显著降低、相对电导率和丙二醛(MDA)含量则极显著升高;干旱条件下,与未进行VIGS沉默的对照植株相比,VIGS沉默后的植株中Ta EF-1α基因表达量极显著下降,其叶片相对含水量也极显著降低、相对电导率和丙二醛(MDA)含量则极显著升高,植株表现出叶片下垂、对干旱胁迫敏感的表型。综合干旱处理和VIGS沉默Ta EF-1α基因后小麦植株的表型和生理指标变化,说明干旱胁迫诱导小麦植株中Ta EF-1α基因上调表达,敲低Ta EF-1α基因表达后小麦抗旱性显著下降,因此,Ta EF-1α基因在小麦响应干旱胁迫中可能发挥了重要作用。
[期刊] 水产学报
[作者]
郭丹丹 郑国栋 陈杰 邹曙明
苹果酸脱氢酶（mdh）基因与肌肉的生长密切相关，可以通过影响骨骼肌的能量代谢来调节肌纤维的生长及类型转化，为探索mdh基因在团头鲂中的功能及作用，实验利用CRISPR/Cas9技术对团头鲂mdh基因进行敲除，并对敲除突变体的表型及基因表达变化进行了研究。结果显示，CRISPR/Cas9可成功应用于团头鲂mdh基因的敲除，与对照组相比，敲除突变体明显小于正常对照组个体，生长性状数据测量显示其体质量、体长都发生了显著的变化。qPCR结果显示，敲除突变体中mdh基因的表达水平显著低于对照组，并且，在敲除突变体中随着mdh基因表达水平的下降，生肌决定因子及肌纤维类型因子MyoG、MyHCⅡa也发生了显著的降低，而MyHCⅡb的表达并没有发生明显的变化。研究表明，CRISPR/Cas9可用于团头鲂基因的高效、快速编辑，也证明mdh基因敲除后可能会抑制团头鲂的生长，在团头鲂的生长过程中起着促进作用。这一研究结果为团头鲂的生长性状研究提供了一定的理论基础，有利于mdh基因在团头鲂分子育种中的合理应用。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
段新玲 任东岁 赵书珍
以无花果展叶腋芽、休眠腋芽、室外嫩茎和水培芽为外植体 ,通过初始培养获得无菌苗后 ,选取无菌苗的不同部位作外植体 ,如茎段、叶片、愈伤组织等 ,经过诱导培养、分化培养及生根培养 ,形成再生植株。研究了激素种类及浓度、培养基种类对诱导的影响 ,提出了无花果的最佳培养条件 ,并讨论了影响移栽成活的一些因素
[期刊] 华北农学报
[作者]
彭陈 王瑞 李万昌 郭士伟
TALEN(Transcription activator-like effector nuclease)和CRISPR/Cas系统(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR.CRISPR-associated,Cas)是近年来发现的基因功能研究的新方法,且已经成功地在动物、植物及微生物等多个领域得到成功应用。它们可以对DNA双链进行切割,从而启动细胞内的DNA修复机制,以此来实现对靶位点的基因修饰。相较于传统方法,它们具有特异性高、操作简便及打靶效率高等特点。主要从结构、功能及作用机制等方面阐述这2种新基...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘俊清 陈立勇 陈尚武 张文 马会勤
本试验以无花果的根、茎、叶、果作为材料,比较了CTAB法和Trizol法对无花果材料RNA的提取效果。以CTAB法提取的不同无花果材料的RNA为模板,反转成cDNA第一链,通过半定量RT-PCR,研究了植物常用内参基因18SrRNA、Actin和Tubulin的表达量变化。结果表明:CTAB法是适合不同无花果材料的RNA提取法;18SrRNA在无花果不同组织中的表达水平较高,且相对稳定,Tubulin在无花果不同组织中相对表达量较低,且相对稳定,是研究无花果不同组织基因表达水平较为适宜的内参基因。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张帅 张明 寇天舒 马俊莲 唐霞 张子德
为进一步利用基因工程手段调控无花果乙烯的合成,以无花果果肉为材料提取基因组DNA,根据已报道的无花果ACC合成酶基因序列设计引物,采用PCR技术扩增得到一条约600 bp的特异片段,将该片段克隆到pGM-Teasy vector上经PCR、酶切和测序鉴定。序列分析结果表明,基因全长590 bp,编码196个氨基酸,该序列与GenBank上已登陆的Masui Dauphine-ACS1的cDNA序列同源性达99%,氨基酸同源性达98%。结果表明,成功克隆到了无花果ACS基因片段。
关键词：
无花果 ACC合成酶 基因克隆 序列分析
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘小红
以水杉原生种为材料，提取其幼嫩植株的根、茎和叶的总RNA，经m RNA纯化、反转录、全长转录组文库构建等过程，再采用SMRT技术测定其全长转录本序列，运用生物信息学对获得的原始转录组数据进行分析。结果显示：提取的总RNA符合建库要求；全长转录组测序共获得了包含5 914 711个亚读段(subreads)的14.0 Gb的数据，质量控制处理后包括236 130个全长非嵌合读段(reads)和97 626个一致性reads；转录本经去冗余处理后共获得61 057个全长一致性读段(unigenes)，其中有54 099个被成功注释到7个数据库中，注释比达88.60%；对水杉unigenes作CDS(coding sequence)长度分布及转录因子分析，其CDS长度范围为144～6477 nt，平均长度约为679 nt；共检测到2386个转录因子，这些转录因子可以归类为29个家族。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘小红
以水杉原生种为材料，提取其幼嫩植株的根、茎和叶的总RNA，经m RNA纯化、反转录、全长转录组文库构建等过程，再采用SMRT技术测定其全长转录本序列，运用生物信息学对获得的原始转录组数据进行分析。结果显示：提取的总RNA符合建库要求；全长转录组测序共获得了包含5 914 711个亚读段(subreads)的14.0 Gb的数据，质量控制处理后包括236 130个全长非嵌合读段(reads)和97 626个一致性reads；转录本经去冗余处理后共获得61 057个全长一致性读段(unigenes)，其中有54 099个被成功注释到7个数据库中，注释比达88.60%；对水杉unigenes作CDS(coding sequence)长度分布及转录因子分析，其CDS长度范围为144～6477 nt，平均长度约为679 nt；共检测到2386个转录因子，这些转录因子可以归类为29个家族。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张旸 吴佳岩 吴雅妮 汤明威 解莉楠
被子植物表皮细胞的形态学建成是目前研究工作中较为流行的生物学现象，其大致包括：表皮细胞形状的改变、表皮细胞附属衍生物的形成、根毛和毛状体的分化等方面，根据大量的试验结果总结发现ＭＩＸＴＡ及其同源基因的生物学功能与该现象密切相关。ＭＩＸＴＡ是编码一个具有Ｒ２Ｒ３ ＭＹＢ结构域的转录因子，自从１９９４年首次报道在金鱼草中被克隆以来，已经受到广泛的关注并在不同种属试验材料中被更深入地研究和讨论。ＭＩＸＴＡ最早被证实的调节功能是促进金鱼草花瓣表皮细胞发生锥形化，使花瓣内表皮具有天鹅绒状质感，野生型金鱼草花瓣表面的锥形细胞在ＭＩＸＴＡ突变时形状发生显著扁平化，花瓣内表皮的天鹅绒状质感消失，异位表达的ＭＩ．．．
[期刊] 物流技术
[作者]
韩雅菘 张耀荔 陈静
通过应用HACCP质量管理体系对鲜无花果的流通过程进行危害分析,确立采收、包装、保鲜和贮藏是鲜无花果品质安全控制的四个关键控制点,通过制定详细的HACCP计划表,为鲜无花果在流通中的质量安全控制措施提供依据。
关键词：
无花果 流通 HACCP
[期刊] 华中农业大学学报(自然科学版)
[作者]
欧阳号锋 易少奎 张龙 杨思琦 李艳和
为探究硫酸软骨素N-乙酰半乳糖胺基转移酶-1(chondroitin sulfate N-acetylgalactosaminyltransferase-1,CSGalNAcT-1)在克氏原螯虾免疫反应中的作用，利用RACE技术成功获得克氏原螯虾CSGalNAcT-1基因完整cDNA序列，并通过荧光定量PCR分析该基因在各组织中的表达模式以及在CpG寡脱氧核苷酸（ODN）、嗜水气单胞菌和白斑综合征病毒（WSSV）刺激后的表达情况。结果显示，克氏原螯虾CSGalNAcT-1基因在中肠中的相对表达量最高，其次是近胃段肠，在心脏、胃、肌肉和围食道神经中的相对表达量较低。克氏原螯虾肝胰腺、血细胞中CSGalNAcT-1基因表达量在嗜水气单胞菌和WSSV刺激下呈现出下调及上调，而在注射免疫刺激剂CpG ODN后，CSGalNAcT-1基因表达水平在大部分组织中呈现上调。表明克氏原螯虾CSGalNAcT-1基因可能在抵御外界病原侵染以及增强自身免疫反应的过程中发挥重要作用。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
韩萌萌 盛安琪 李海峰
AGAMOUS LIKE6(AGL6)基因家族是植物MADS-BOX基因中一个古老的亚家族,近几年关于AGL6基因研究已取得了很多新进展,特别是对水稻、玉米、矮牵牛等物种的AGL6基因功能解析。文章从AGL6基因的起源、进化及表达模式和生物学功能等方面,综述了近年来有关AGL6的主要研究进展,并对该基因家族的研究趋势进行了展望。
关键词：
MADS-BOX AGL6 水稻 玉米
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
周非凡 刘瑜 常鑫磊 林拥军
通过反向遗传学研究方法,构建OsCPK12基因敲除和超表达突变体,用150 mmol/L的NaCl进行盐胁迫处理,结果显示:超表达株系无论株高、根长还是叶片状态都优于野生型,而基因敲除突变体相比于野生型株高明显矮化,根的发育形态差,叶片枯黄,证实OsCPK12对水稻耐盐有正调控作用。用real-time PCR对突变体株系的根、叶鞘、叶片多个部位的激素信号转导路径基因的表达量进行分析,结果显示:超表达株系的多个激素受体编码基因和下游调控基因表达量显著上调,说明OsCPK12参与激素的信号转导并影响水稻抗逆反应。为进一步研究OsCPK12的基因功能,通过在水稻原生质体中表达融合蛋白进行OsCPK12的亚细胞定位,确定OsCPK12定位于质膜。用酵母双杂交的方法在水稻中花11膜蛋白文库中筛选到2个水通道蛋白OsPIP1-1和OsPIP2-7,且酵母点对点验证为阳性,推测OsCPK12可能通过与OsPIP1-1和OsPIP2-7互作,调控水分子进出细胞,提高了水稻的耐盐性。
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