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[期刊] 华北农学报  [作者] 郭战军  马毅  李三华  韩瑞发  李胜芝  孙光  乔宝民  马腾骧  陈永福  
为探讨超急排斥反应(Hyperacute rejection,HAR)及延迟性异种排斥反应(Delayed xenograft rejection,DXR)的分子调控机制,采用优化的精子介导法(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)对建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型进行了研究。结果表明,应用树枝状聚合物(Dendrimers)优化SMGT后,2细胞胚GFP+RFP的阳性率达到4.51%,同对照组相比差异极显著(P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王菊花  解倩倩  范彩云  方富贵  周杰  曹鸿国  章孝荣  
【目的】通过对6周龄昆明小鼠腹腔内单次注射不同剂量的白消安来制作精原干细胞移植受体模型。【方法】将104只昆明小鼠随机分成4组,分别注射0(对照组,注射等量的白消安溶解液二甲基亚砜(DMSO)),10,20和30mg/kg白消安,于注射白消安后5,7,9,11和13周记录小鼠的死亡数、小鼠睾丸外观体积、小鼠睾丸质量和小鼠体质量,计算睾丸指数;通过组织学观察注射不同剂量白消安后小鼠曲细精管精子的恢复情况,并检测受体小鼠血液中红细胞和白细胞数量的变化。【结果】注射0(对照组),10,20和30mg/kg白消安13周后,小鼠死亡率分别为0(0/22),11.54%(3/26),17.86%(5/28...
[期刊] 华北农学报  [作者] 张兴芳  王荫榆  郭本恒  吴正钧  龚广予  
探讨环糊精葡基转移酶的降血糖作用,为进一步研究和产品开发提供依据。通过灌胃和腹腔给药两种方式,研究环糊精葡基转移酶对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的影响,确定其有效作用方式。环糊精葡基转移酶灌胃给药,100,200 mg/kg对血糖无明显影响。环糊精葡基转移酶腹腔给药,不同剂量0.1,1.0,10 mg/kg都可使血糖明显下降,分别下降345.4%,51.2%,43.1%。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 章玉涛  王加启  赵圣国  胡小丽  卜登攀  周凌云  
建立小鼠模型对制备的脲酶免疫刺激物进行免疫效果及其安全性评价。利用IPTG诱导脲酶基因克隆菌,大量表达脲酶UreB蛋白,用SDS-PAGE及Bradford方法对表达产物进行定性和定量分析;将脲酶UreB蛋白与弗氏(不)完全佐剂混合并乳化,制备成脲酶免疫刺激物。选择健康昆明小白鼠40只,随机分为4组,分别注射脲酶免疫刺激物、弗氏(不)完全佐剂和生理盐水,同时设置非注射为空白对照。利用间接ELISA测定特异性抗体效价,利用血常规分析仪和流式细胞仪测定小鼠血常规。结果表明:构建克隆菌株可以大量表达脲酶B蛋白,质量浓度为0.39 mg/mL。小鼠血清中特异性IgG抗体效价能达到1∶10 000以上,...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李莉  郑新民  魏庆信  魏雁  
采用显微混合注射的方法制备转人MCP(膜辅因子蛋白)和CD59(膜反应性溶解抑制物)双基因小鼠,共注射478枚受精卵,移植于21只受体,其中14只受孕,8只受孕小鼠中途流产,从6只受孕小鼠获得18只仔鼠,经检测,其中9只仔鼠单基因阳性(50%),6只仔鼠双基因阳性(33.3%)。结果表明:通过显微混合注射的方法可以获得转人MCP和CD59双基因小鼠。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 邹珍友  马晨  邹如意  成林  王金龙  智昊  李杏  王芳  王国祥  黄澜  秦川  李福亮  
检测了转基因Alzheimer病(AD)模型小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、睾丸组织中Cu、Fe、Zn的含量。结果表明:除肾脏外,AD小鼠各组织中Fe的含量都比对照组的高;骨和脑中的Cu比对照组多,其他组织中的Cu比对照组少;脾、肺中的Zn比对照多,其余组织的Zn均少于对照组。AD对过渡元素分布的影响有性别差异:雄性个体中过渡元素含量异常的组织数目比雌性的多,与正常值偏离的程度也比雌性的严重。在脑切片中,AD个体Cu、Zn、Fe的平均含量均高于对照组。对于Cu与Zn,AD组除在顶皮层PtA、梨形-杏仁核皮层区低于对照组外,在皮层其他区域以及丘脑、下丘、海马中均高于对照;AD小鼠脑皮层、海马和下丘脑...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 谢亮  孙超  彭永佳  堵斌  
【目的】研究AG490阻断肥胖模型小鼠JAK2/STAT3信号通路对脂代谢及相关基因表达的影响。【方法】以雄性昆明小鼠为供试动物,构建肥胖模型。将肥胖模型小鼠分为2组,处理组用JAK2特异性抑制剂AG490(1 mg/(kg.d))腹腔连续注射2周,对照组腹腔连续注射相同剂量的生理盐水。2周后处死小鼠,检测各组小鼠血清中总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白固醇(HDL-C)的含量;取脂肪组织提取总RNA,RT-PCR方法检测JAK2/STAT3信号通路基因(JAK2、STAT3)及脂代谢关键基因(FAS、PPARγ、HSL)的表达量。【结果】与对照组相比,AG490可显著降低小鼠...
[期刊] 华北农学报  [作者] 杜祥月  李永亮  张俊  刘菲  张红英  王学兵  
为筛选肺气虚证小鼠模型最佳造模方法并验证其免疫功能变化,分别选用SO2法、SO2+寒冷因素刺激法、香烟烟熏法和香烟烟熏+寒冷因素刺激法重建肺气虚证小鼠模型,检测其体重、肺脏剖检及病理组织变化等指标,筛选最佳造模方法,并测定其腹腔巨噬细胞活性、体外B细胞抗体分泌能力、血清NO含量、淋巴细胞增殖能力及细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α含量、肺匀浆中sIgA、sIgM水平。结果显示,香烟烟熏+寒冷因素刺激法小鼠造模完成后出现严重的肺出血、肺组织坏死及炎性细胞浸润等病变,且与对照组小鼠相比,其体重、脾脏指数、胸腺指数分别显著下降18.35%,37.12%,19.6...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 辛颖  张涛  张优优  张智英  
【目的】用慢病毒在体内感染精原干细胞,建立转基因动物生产技术平台。【方法】用三质粒慢病毒载体系统转染293T细胞包装慢病毒,转染后裂解细胞,收集携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒。将慢病毒液注射到小鼠曲细精管,获得F0代小鼠,制备小鼠睾丸组织切片,进行免疫双荧光检测。将F0代小鼠与野生型母鼠交配,获得F1代小鼠,PCR检测F1代是否为转基因小鼠。【结果】通过裂解细胞的方法成功制得慢病毒,将其注射到小鼠曲细精管,获得了10只F0代小鼠,经免疫双荧光检测,发现慢病毒可在活体上感染精原干细胞。8只F0代小鼠与野生型母鼠交配后共获得了41只F1代小鼠,经PCR检测,21只携带慢病毒基因片段,转基...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 邓冲  张维  刘群  刘晶  丁隽  
【目的】建立Balb/c小鼠感染新孢子虫的急性和亚急性发病模型,并研究新孢子虫在小鼠体内的发育过程。【方法】分别对两组小鼠腹腔接种新孢子虫8×106个/只和5×105个/只,接种后小鼠进行定时宰杀,取心、肝、肺、脑和后肢肌肉等进行组织病理学、免疫组织化学和PCR检测。【结果】发现Balb/c小鼠感染后病理变化主要表现为各器官组织的广泛性出血,非化脓性脑炎和肝细胞空泡变性。接种后第16天观察到脑组织内包囊,在其它组织中未观察到包囊样结构。PCR检测结果显示,接种后12h即可检测到肺脏和心脏组织内的新孢子虫特异性基因Nc-5,脑内最早于第8天检测到。接种25d后在肝脏、肺脏和脑内仍能检测到新孢子虫...
[期刊] 自然资源学报  [作者] 马永喜  
水资源转移利用的利益补偿不仅关系到水资源重新配置的效率和效益的实现,同样还关系到不同用水主体之间利益的公平共享和资源的可持续利用。为科学合理地测算不同用水主体之间水资源转移利用的利益补偿额度,构建了水资源转移利用利益补偿测算模型。该模型综合考虑了合作贡献、资源投入、用水效率、风险承担和社会公正等因素对收益分配的影响,并运用粗糙层次分析法(RAHP)来确定各种指标的权重,然后在此基础上对用水收益分配和利益补偿进行测算。最后,通过诸暨陈石灌区用水转移的实例应用验证了该模型的可行性和科学有效性。同时实例研究表明实践中的农业用水主体没有充分分享到因水资源转移利用而产生的增加收益,亟待提高农业节水主体应...
[期刊] 中国林业科学研究院  [作者] 王占娣  
脂溢性脱发是当今三大脱发之一,多发生于男性,且随着压力和饮食结构的改变,脂溢性脱发越来越偏向于年轻化,给年轻人的自尊带来了很大的伤害。目前国际上公认的用于治疗雄激素性脱发的药物主要为米诺地尔和非那雄胺。但是这两种药物具有明显的副作用。寻找安全性好、对脱发生物活性高的药物成为当今研究的热点。白蜡是半翅目Hemiptera蚧总科Coccoidea白蜡蚧属Ericerus的白蜡虫雄性幼虫分泌的次生代谢物质。在中国民间白蜡常用作生发剂。但是对于白蜡治疗脱发的类型及其作用机理还未见报道。白蜡高级烷醇是采用氢化铝锂或
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 高瑞娟  王纯洁  敖日格乐  贾知锋  
为探讨蒙药成份复方对乳腺炎模型小鼠免疫功能的影响,96只产后35d泌乳期母鼠被随机分为4组(n=24),灌药3d后,于第4d的末次灌药后1h复制小鼠乳腺炎病理模型,继续用药治疗3d。并于复制模型前0、48和72h用碳廓血清法测巨噬细胞吞噬活力;MTT法测自然杀伤细胞(Natural killer cell,NK cell)活性;脱臼处死小鼠称胸腺和脾脏湿重并计算小鼠免疫脏器指数;ELISA法测小鼠血清中白介素-4(IL-4)、干扰素(IFN-γ)含量。结果表明蒙药成份复方可以显著提高小鼠免疫脏器指数、促进
[期刊] 中国农业科学  [作者] 金梅  康琳  孙东禹  朴君  朴敬爱  赵凤琴  
【目的】利用慢病毒介导过表达技术,明确小鼠K26和KAP26.1基因过表达后对角蛋白关联蛋白基因KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1和对骨形态发生蛋白基因BMP-4、BMPR-IB的影响,探究小鼠绒毛细度变化的影响机制,达到人为调控(如慢病毒载体技术)使相关基因过表达,改善动物绒毛品质的目的,为哺乳动物绒毛细度调控的研究奠定理论基础,【方法】试验在辽宁省生物技术与分子药物研发重点实验室完成,小白鼠采自大连医科大学实验动物中心,选取出生后5周龄昆明种雄鼠。在Genebank查找到小鼠基因
[期刊] 中国农业科学  [作者] 焦明霞  牟彦双  格日乐其木格  张琳琳  孔庆然  付海鹏  刘忠华  
【目的】精子介导的转基因技术简单易行,其作为制备转基因动物的一种方法已经被很多科学家所认同。但是不同实验室的研究结果显示其稳定性和重复性较低,转基因效率差异极大。现将主要探讨导致这种现象的原因。【方法】小鼠精子获能后分别与0、15、30和300nmol·L-1的Cy-3标记DNA(Cy-3-DNA)在37℃共孵育30 min。其后,血细胞计数板检测小鼠精子的活率;共孵育精子进行直接涂片,DPBS洗涤后涂片,DnaseI消化后涂片,精子涂片置于荧光显微镜下,记录视野中的精子总数及显示Cy-3信号的精子数,用于统计精子结合及内化DNA的效率。精子与300 nmol·L-1的Cy-3-DNA共孵育后...
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