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[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 章玉涛  王加启  赵圣国  胡小丽  卜登攀  周凌云  
建立小鼠模型对制备的脲酶免疫刺激物进行免疫效果及其安全性评价。利用IPTG诱导脲酶基因克隆菌,大量表达脲酶UreB蛋白,用SDS-PAGE及Bradford方法对表达产物进行定性和定量分析;将脲酶UreB蛋白与弗氏(不)完全佐剂混合并乳化,制备成脲酶免疫刺激物。选择健康昆明小白鼠40只,随机分为4组,分别注射脲酶免疫刺激物、弗氏(不)完全佐剂和生理盐水,同时设置非注射为空白对照。利用间接ELISA测定特异性抗体效价,利用血常规分析仪和流式细胞仪测定小鼠血常规。结果表明:构建克隆菌株可以大量表达脲酶B蛋白,质量浓度为0.39 mg/mL。小鼠血清中特异性IgG抗体效价能达到1∶10 000以上,...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 刘金明  王美  叶萍  傅志强  蔡学忠  石耀军  陈永军  林矫矫  林邦发  施幅恢  
免疫刺激复合物(ISCOM)是 Morein 创立的一种疫苗免疫载体,其中的主要佐剂成分是 Quil A(皂素的一种成分).本研究首先用日本血吸虫中国大陆株成虫可溶性租抗原(SWA)作为免疫抗原,按改进方法结合皂素制备 ISCOM,对其在小鼠体内诱导的免疫保护力和 SWA 在 FCA/FIA、蜂胶二种佐剂条件下的免疫保护力进行了比较研究,然后对不同剂量 SWA-ISCOM 的免疫效果进行考察;最后对重组日本血吸虫中国大陆株28kD GST(rSj28GST)-ISCOM 在小鼠体内所诱导的免疫保护力进行观察.结果表明 IS-COM 在进一步应用于各种基因工程苗方面有研究价值。
[期刊] 华北农学报  [作者] 赵圣国  王加启  张春刚  卜登攀  刘光磊  张春林  章玉涛  周凌云  
为了探讨免疫刺激后昆明小白鼠乳腺pIgR基因mRNA转录和特异性IgA含量变化。选择48只健康受孕昆明小白鼠,分为A、B、C、D组,分别于分娩后第4天注射灭菌生理盐水、Lipase+灭菌生理盐水、空ISCOM和Lipase+LTB+ISCOM,每组注射12只,并于分娩后第8天和12天采集小鼠乳样、血样和乳腺组织,用间接ELISA法测定乳和血浆中的特异性IgA含量,用Real Time-PCR检测小鼠乳腺中pIgR基因的相对转录水平。结果表明,免疫刺激对小鼠血浆中特异性IgA的含量无显著性影响(P>0.05),但是免疫B组和D组中小鼠分娩后12 d的乳中特异性IgA含量显著高于8 d乳中的特异性...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 翟春生  唐雨德  顾志香  雷永红  陶开华  
猪带绦虫六钩蚴重组抗原与皂素、胆固醇、胆碱按一定比例制成猪囊虫病免疫刺激复合物疫苗.用该疫苗分别免疫昆明鼠和夏约克猪,在免疫后不同时期分别测定各动物的细胞免疫和体液免疫反应。免疫3d 后昆明鼠脾脏重量开始增大,CD8~+T 淋巴细胞阳性率为31%~66.3%,而铝胶苗和正常对照的阳性率仅为1.1%~6.6%,第21d 检测到抗体.免疫猪7d 后外周血 ANAE~+淋巴细胞增高,淋转试验显示淋巴
[期刊] 华北农学报  [作者] 杜祥月  李永亮  张俊  刘菲  张红英  王学兵  
为筛选肺气虚证小鼠模型最佳造模方法并验证其免疫功能变化,分别选用SO2法、SO2+寒冷因素刺激法、香烟烟熏法和香烟烟熏+寒冷因素刺激法重建肺气虚证小鼠模型,检测其体重、肺脏剖检及病理组织变化等指标,筛选最佳造模方法,并测定其腹腔巨噬细胞活性、体外B细胞抗体分泌能力、血清NO含量、淋巴细胞增殖能力及细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α含量、肺匀浆中sIgA、sIgM水平。结果显示,香烟烟熏+寒冷因素刺激法小鼠造模完成后出现严重的肺出血、肺组织坏死及炎性细胞浸润等病变,且与对照组小鼠相比,其体重、脾脏指数、胸腺指数分别显著下降18.35%,37.12%,19.6...
[期刊] 水产学报  [作者] 龚晖  林天龙  张晓佩  罗土炎  吴宗福  宋铁英  杨先乐  
将嗜水气单胞菌气溶素(AerA)基因定向连接到pET32a(+)表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析表明,硫氧还蛋白-气溶素融合蛋白(Trx-AerA)表达量占重组菌总蛋白量的65.5%。将上述融合蛋白与商品化的QuilA混合,分别添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇获得Trx-AerA ISCOMs。其中同时添加Mega-10、卵磷脂、胆固醇组蛋白回收率最高为10.46%,仅添加QuilA组蛋白回收率为1.82%,两者差异显著(P
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈昌福  姚娟  陈超然  李兆文  
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张荣庆  韩正康  
每天给小鼠灌服异黄酮植物雌激素芒柄花素(For)或大豆黄酮(Da)20mg/kg,连续7d,明显提高正常小鼠胸腺重量和腹腔巨噬细胞吞噬功能,提高空斑形成细胞的溶血能力和外周血 T 淋巴细胞百分率;体外试验表明:50μg/ml 的 For 或 Da 明显促进植物血凝素(PHA)诱导的甲基-~3H 胸腺嘧啶核苷(methyl-~3H Tdg)参入的淋巴细胞转化。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈昌福  姚娟  陈萱  李兆文  
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 高瑞娟  王纯洁  敖日格乐  贾知锋  
为探讨蒙药成份复方对乳腺炎模型小鼠免疫功能的影响,96只产后35d泌乳期母鼠被随机分为4组(n=24),灌药3d后,于第4d的末次灌药后1h复制小鼠乳腺炎病理模型,继续用药治疗3d。并于复制模型前0、48和72h用碳廓血清法测巨噬细胞吞噬活力;MTT法测自然杀伤细胞(Natural killer cell,NK cell)活性;脱臼处死小鼠称胸腺和脾脏湿重并计算小鼠免疫脏器指数;ELISA法测小鼠血清中白介素-4(IL-4)、干扰素(IFN-γ)含量。结果表明蒙药成份复方可以显著提高小鼠免疫脏器指数、促进
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 韩春杨  刘翠艳  
【目的】研究中药免疫调节剂对免疫抑制小鼠的组织保护作用。【方法】用环磷酰胺(Cyclophospha-mide,Cy)构建小鼠免疫抑制病理模型。分别给正常小鼠和环磷酰胺所致免疫抑制小鼠饮服自制中药免疫调节剂玉屏风散加减(ZY)和经典方剂玉屏风散(YPF),检测ZY、YPF对不同免疫状态下小鼠血液学指标(白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞体积(MCV))、体质量、脾脏指数以及肝脾组织病理学的影响。【结果】(1)ZY和YPF对健康小鼠血液学指标影响不显著(P>0.05);ZY对Cy所致的免疫抑制小鼠WBC、R...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 余树民  甘梦  左之才  崔恒敏  彭西  王娅  邓俊良  
【目的】评价自拟中药复方对免疫抑制小鼠血清细胞因子、免疫球蛋白和红细胞免疫黏附功能的影响。【方法】通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型。试验组免疫抑制小鼠分别按20,10和5g/kg剂量灌胃自拟中药复方,同时设置模型对照组(灌胃等体积生理盐水)、健康对照组(灌胃等体积生理盐水)和黄芪多糖对照组(灌胃剂量66mg/kg),连续7d,试验第0,3,7天采集血样,用血细胞自动分析仪测定小鼠血细胞数,用酶联免疫吸附试验测定血清IL-2、IgG、IgM、IL-4和IFN-γ含量,并计算IL-4/IFN-γ,用红细胞C3b受体花环(C3b RR)及免疫复合物花环(ICR)试验分析红细胞免疫黏附功能。【...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 帅学宏  胡庭俊  曾芸  李跃华  刘洪丽  苏子杰  何德凤  
为观察对免疫抑制小鼠自由基产生相关酶活性的影响,用地塞米松(Dex)为免疫抑制剂建立小鼠免疫抑制模型,分别以3种剂量的山豆根多糖(SSP)(50、100和200 mg.kg-1)腹腔注射,测定胸腺和脾脏的器官指数和组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、黄嘌呤氧化酶(XO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GP)的活性。试验结果表明:SSP能极显著提高脾脏指数(P<0.01),显著降低脾脏中MPO活性(P<0.05)、胸腺中XO活性(P<0.05),显著提高胸腺中GP活性(P<0.05)。提示:SSP通过改变机体内自由基相关酶的活性来影响体内自由基的产生和清除能力,使机体免疫器官免受过氧化损伤,拮抗Dex所致的...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 周传丽  刘铮铸  俞英  张勤  
【目的】猪源产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一类世界范围内流行的致仔猪腹泻的病原菌。依据养猪业生产实践中对致仔猪腹泻病原菌血清学鉴定结果可知,F4ac型ETEC的流行性最为广泛。到目前为止,对ETEC导致仔猪腹泻的机理已经有了比较透彻的阐释。但对ETEC培养液的免疫原性尚未有研究和描述。论文以F4ac型ETEC为研究对象,探索其菌液上清(即培养液)对仔猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)的免疫刺激作用。【方法】首先收集F4ac型ETEC菌株200培养12h后的培养液,后经4℃,4 000 r/min,离心15 min收集培养液上清,将...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张德明  戴亚斌  许立华  龚远鹰  杨仁全  李刚  陈溥言  
ICR小鼠用伪狂犬病毒 (Pseudorabiesvirus ,PRV)灭活苗免疫 ,同时每只分别注射 0 1,0 2 5和 1mg或口服 0 2 5mg法氏囊 (bursaoffabricius ,BF)提取物 (相对分子质量小于 10 0 0 )。对各试验组小鼠器官指数、白细胞数、淋巴细胞数、淋巴细胞非特异酯酶染色阳性数 (acidα naphthylacetatcesterase ,ANAE+ )、PRV抗体水平、脾脏组织学变化和攻毒试验结果等各种免疫学指标进行检测和比较 ,探讨法氏囊提取物对试验个体的免疫力影响。结果表明 :中等剂量 (每只0 2 5mg)的法氏囊提取物能够不同...
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