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[期刊] 实验技术与管理
[作者]
罗璐 张晶 雷悦
为研究纤维基载药羊毛角蛋白支架的肠道抗癌释药性能，该文选择5-氟尿嘧啶（5-FU）作为药物模型，使用全因子矩阵实验设计，在不同酸碱环境下，通过在两水平上优化多个显著性因子的参数，提高pH敏感性释放性能。这种全因子实验设计方法既可用于确定复合生物功能系统的主要效应，也可用于研究多因素相互作用的影响。扫描电子显微镜（SEM）图像显示，在15 kV静电纺丝电压下，可得到具有均匀结构的复合纳米纤维基质；同时，傅里叶变换红外光谱（FT-IR）证实羊毛角蛋白在1 630和1 550 cm~(-1)处有特征峰。使用紫外-可见分光光度计（UV-Vis）检测药物缓释性能，测试结果表明：羊毛角蛋白与聚L-丙交酯（Poly-L-lactide, PLLA）的比例是影响药物缓释性能的主要因素。通过全因子矩阵实验设计优化后，在120 h内，含有50%羊毛角蛋白的复合载药纳米纤维在pH值为7.4的环境中释放了48.5%的药物，而在pH值为6.0的环境中释放了83.7%的药物。证明通过优化调整操作因子，实现了羊毛角蛋白纤维支架的pH响应性显著提高。
关键词：
静电纺丝 纳米纤维 羊毛角蛋白 药物缓释
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
程度 余东升 陈玉静 欧阳红群
有机硅是杂化生物材料的典型代表和发展方向之一，基于有机硅的综合实验既涵盖了无机、有机以及高分子等材料学科内部的交叉，也包含了材料与生命科学的交叉。实验合成了活性氧响应性的有机硅烷，通过反相纳米乳液和溶胶-凝胶方法制备有机硅纳米粒子，可包载和输送绿色荧光蛋白。通过核磁共振、动态光散射、荧光成像以及流式细胞术等方法评价了其理化特性和蛋白传输等性能。载蛋白有机硅纳米粒子具有粒径小、细胞吸收效率高、活性氧响应性释放、可降解和低毒性的优点。通过多学科知识的综合应用，强化对学生交叉研究能力的训练。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
史同娜 朱冰洁 施镇江 谢卫民 吴文华
电纺左旋聚乳酸（PLLA）/聚己内酯（PCL）复合纤维综合实验的设计是教研结合初探的产物。该文通过静电纺丝法制备了PLLA/PCL复合纤维，对纤维的形貌、化学结构、结晶和体外降解性能进行了一系列表征测试及胆管上皮细胞的相容性实验，讨论了组分配比对复合纤维形貌和结晶性能的影响，分析了复合纤维的降解趋势。细胞相容性实验证实了PLLA/PCL复合纤维适合胆管上皮细胞的生长，并初步探讨了PLLA/PCL复合纤维在组织工程人工胆管支架材料领域的应用前景。该综合实验可以培养学生的创新意识，激发学生的科研兴趣，提升学生的科学研究和实践能力。
[期刊] 水产学报
[作者]
任中阳 崔雅清 陈玉峰 石林凡 郝更新 杨燊 邱绪建 翁武银
大黄鱼肌原纤维蛋白（myofibrillar protein，MP）乳化性的研究尚待深入探究，以满足大黄鱼蛋白质高值化开发利用的需求。本研究旨在探究不同pH对大黄鱼MP结构性质及其乳化性的影响。采用pH分别为2、4、6、8、10、12的低盐磷酸缓冲液处理大黄鱼MP，通过SDS-PAGE分析大黄鱼MP降解情况，利用接触角测量仪和荧光分光光度计考察其疏水性变化。将不同pH下大黄鱼MP溶液与大豆油以1:1（V/V）的比例经高速均质制备乳液，并对其乳滴电位、粒径以及乳液的乳析指数进行测定，综合分析在不同pH下乳液的稳定性。SDS-PAGE电泳结果表明，在pH 4时，大黄鱼MP条带颜色较浅，在pH 6～12时，肌球蛋白重链条带基本消失，肌动蛋白条带颜色逐渐加深，且在浓缩胶顶部出现了高分子聚集物。根据接触角和荧光光谱综合分析表明大黄鱼MP疏水性随pH增加而增加。对不同pH下MP乳液特性分析显示，在pH 8时，乳滴带负电且Zeta电位绝对值大[（49.63±1.52）mV]、粒径较小、乳液稳定性较好，而pH 12条件下容易出现破乳不利于乳液的稳定。在pH 8时，大黄鱼MP结构更有利于提升乳液稳定性。pH对大黄鱼MP结构性质和乳化性的影响探究，有望为大黄鱼MP在食品工业中的开发利用提供理论依据。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
陈伟 柏正武
以微晶纤维素为原料,合成了纤维素-三(1-萘基氨基甲酸酯),再将其涂覆于氨丙基硅胶表面,制备成手性固定相。利用傅里叶变换红外光谱仪、元素分析仪、扫描电镜等方法对纤维素衍生物及固定相进行了表征。将该固定相填充于空的色谱柱中,制备成手性色谱柱,用高效液相色谱检测了所制备色谱柱对几种手性样品的对映体分离性能。本实验涉及有机合成和表征的相关知识,并结合手性药物色谱分析等应用性问题,综合性较强,可作为大学本科综合实验教学内容。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
程度 陈极峰 余东升
将较为成熟的科研实例小分子药物传输载体聚乙二醇-聚己内酯(PEG-PCL)设计为高年级本科生的综合实验,探索促进科教融合的新途径和新方法。采用辛酸亚锡催化端羟基聚乙二醇(PEG)引发己内酯开环聚合制备PEG-PCL,合成方法具有简便易行和成本较低的特点。通过自组装方法负载小分子药物,并结合聚合物和纳米材料表征手段以及生物医学评价技术,涵盖开环聚合等高分子化学、自组装等高分子物理、核磁和电镜分析技术以及纳米药物-细胞相互作用评价方法等多学科知识与技能,使学生全面了解生物材料研发的完整流程,启发和训练学生系统掌握小分子药物传输载体的研究能力。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
余树民 甘梦 左之才 崔恒敏 彭西 王娅 邓俊良
【目的】评价自拟中药复方对免疫抑制小鼠血清细胞因子、免疫球蛋白和红细胞免疫黏附功能的影响。【方法】通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型。试验组免疫抑制小鼠分别按20,10和5g/kg剂量灌胃自拟中药复方,同时设置模型对照组(灌胃等体积生理盐水)、健康对照组(灌胃等体积生理盐水)和黄芪多糖对照组(灌胃剂量66mg/kg),连续7d,试验第0,3,7天采集血样,用血细胞自动分析仪测定小鼠血细胞数,用酶联免疫吸附试验测定血清IL-2、IgG、IgM、IL-4和IFN-γ含量,并计算IL-4/IFN-γ,用红细胞C3b受体花环(C3b RR)及免疫复合物花环(ICR)试验分析红细胞免疫黏附功能。【...
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
王雁南 李维尊 孙红文 展思辉
将科学研究与本科实验教学相结合作为实验教学改革的重要手段之一,对教学水平的提升与学生的综合素质培养十分有效。基于离子液体可以溶解与再生纤维素的特性以及对再生纤维素和再生离子液体的表征,设计了一种综合研究型实验。该实验考察了离子液体在不同温度下对纤维素的溶解特性以及通过X射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱、扫描电子显微镜等仪器对原料以及产物进行表征对比分析溶解特点。通过该综合实验,可以加强学生对离子液体这一新型绿色特性溶剂的认识以及对资源化的理解,锻炼学生的综合实践能力。
关键词：
离子液体 纤维素 溶解性 综合性实验
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
汪福杰 蒋蘋 石毅新 胡文武 罗亚辉 周书娴
为提高植保机喷雾作业中的农药利用率,设计了一种在线混药系统。混药系统主要包括取水单元、取药单元、混合器和控制单元。系统工作时,控制单元控制取水单元和取药单元抽取水溶液和农药,注入混合器混合,混合液经隔膜泵加压后经过喷头喷施。基于计算流体力学理论,建立内置7块扰流板且注药口和注水口沿边壁垂直分布并正对第1块扰流板的圆柱形静态混合器模型,运用Fluent软件对模型进行数值分析,结果常压(0.1MPa)时,混合器出口处药水混合均匀性变异系数为2.2%,药水混合效果最佳,但注药口有药剂回流现象,故提出药剂加压的模拟方案。药剂加压1MPa时,注药口无药剂回流现象,药水混合均匀性变异系数为2.0%,药水混合效果优于常压。用胭脂红溶液替代农药进行试验,加压状态下,混药系统喷头处混药稳定性最大相对误差为4.301%,药水混合变异系数最大,为3.989%,混药性能优于常压,与仿真结果基本吻合;对在线混药系统进行隔膜泵变工况试验,结果水流量在35～140 L/min时,药水配比为(1∶300)～(1∶3 000)时,在线混药系统混合均匀性系数最大,为4.670%。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
姜鹏
纳米医药是当前最前沿的科学研究方向之一，但药学专业的实验课程却很少涉及相关内容。化学动力治疗是一种新型肿瘤疗法，其利用纳米材料催化Fenton反应生成羟基自由基（·OH）实现抗癌效果。该文根据培养目标设计了紫外-可见分光光度法和荧光分析法两种方法，来评估Cu基纳米药物的类Fenton催化性能。结果显示，Cu2O纳米粒子在与肿瘤微环境相似的微酸性条件下，具备催化类Fenton反应产生·OH的能力。该实验非常适合药学专业仪器分析实验课程，既能让学生掌握实验技能，又能帮助学生了解科研前沿动态，培养其创新思维和科学素养。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
芮贤义 陈小平 俞一彪
该文设计了基于高斯混合模型的说话人识别系统实验,通过录制小型语音库、提取表征说话人个性的特征参数、训练说话人模型和似然度判决,实现文本无关的说话人识别。实验以小组形式协作完成,并鼓励学生展开进阶研究,帮助学生提升团队协作精神和创新精神,以及解决复杂工程问题的能力。所建立的全过程多维度立体化的实验考核体系,着眼于对学生的方案设计、实验操作、报告撰写、演示答辩等全过程评价,有助于激发学生的创造力和学习热情。
关键词：
实验设计 说话人识别系统 实验考核
[期刊] 水产学报
[作者]
刘海燕 杨汝晴 陈玉磊 张凌晶 孙乐常 刘光明 曹敏杰
为探究大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶（MBSP）的性质。本研究采用生物信息学方法对大黄鱼MBSP进行基因检索与筛选，通过分子克隆得到大黄鱼MBSP编码区全长cDNA并构建毕赤酵母表达系统得到重组蛋白质（Lc-rMBSP），分析Lc-rMBSP的酶学性质和二级结构并通过同源建模分析Lc-MBSP的三级结构。结果显示，大黄鱼肌原纤维蛋白中存在MBSP，在55 ℃下活性最高。大黄鱼基因组中注释为类胰蛋白酶的基因有16条，对这些基因与淡水鱼MBSP进行系统进化树分析和多序列比对，得到同源性较高的基因序列（Lc-MBSP）。Lc-MBSP编码区全长735 bp，共编码244个氨基酸残基。通过毕赤酵母重组表达，分离纯化得到分子量约28 ku的重组蛋白质Lc-rMBSP。表达蛋白的最适温度和pH分别为50 ℃和8.0。圆二色谱分析表明，温度对Lc-rMBSP二级结构具有较大的影响。Lc-rMBSP在较宽的温度范围内（40～60 ℃）对MHC具有较高的水解活性。Lc-rMBSP的最适底物为Boc-Leu-Lys-Arg-MCA，并且特异性切割羧基侧的精氨酸残基，而不分解赖氨酸残基。通过同源建模得到Lc-MBSP的三维结构，催化三联体由保守的His-61、Asp-105和Ser-198构成，其底物结合口袋（Ser-192、Gly-215和Ser-225）与类胰蛋白酶的略有不同，这种差异可能是导致Lc-rMBSP与其他胰蛋白酶酶学性质不同的主要原因。本研究可为海水鱼MBSP的研究提供理论参考。
[期刊] 水产学报
[作者]
郭川 梁银龙 刘光明 苏文金 曹敏杰
肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)是最近发现的一种蛋白酶。该酶参与肌原纤维蛋白的降解及鱼糜制品弹性的下降。但是,对该酶一级结构的研究,迄今为止,未有报道。本文根据已测定的鲤MBSP N-末端氨基酸序列以及丝氨酸蛋白酶活性中心保守序列设计兼并引物,结合RT-PCR技术实现了MBSP基因片段的扩增。再根据克隆到的MBSP片段序列设计基因特异引物,用于MBSP基因的5′和3′末端快速扩增。综合以上结果,鲤MBSP的全长被确定。序列分析表明,MBSP cDNA含有一732 bp的开放阅读框,编码243个氨基酸残基,其中信号肽长度为...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨剑婷 吴彩娥 李莹莹 贾韶千 范龚健 潘红梅
【目的】对白果蛋白致敏的小鼠模型进行研究,以明确白果蛋白是否具有致敏性。【方法】以Tris-HCl缓冲液为阴性对照、卵白蛋白为阳性对照,设置白果蛋白低剂量组和高剂量组,每隔7d经口灌胃致敏1次共3次,末次致敏7d后腹腔注射激发,致使小鼠过敏。【结果】经白果蛋白及阳性对照激发后的小鼠血清产生高水平IgE及IgG抗体,体外激发小鼠致敏肥大细胞组胺释放率显著高于阴性对照,免疫期间血浆中组胺也显著升高,小鼠肠、肺、肝均见炎症病灶,高剂量处理及阳性对照的肾脏也呈炎症细胞浸润。【结论】该模型可用于研究白果蛋白致小鼠发生的IgE介导的Ⅰ型过敏反应。
关键词：
白果 蛋白 过敏 小鼠 模型
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
凌翠翠 张亚萍 李书光 张风昀 王素辛 黄柳宾
设计了"ZnO/Si异质结光响应研究"的研究型综合实验。实验设计包括前期调研、ZnO/Si异质结的制备、测量电路设计及计算结果分析讨论3部分,并在此基础上进行实验拓展能力的培养,实验内容密切联系学科发展前沿。教学实践证明,研究型综合实验有助于学生提高专业知识综合应用能力,有助于创新型、科研型人才的培养。
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