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[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
王冉 刘红
对虾繁殖性状的相关分子遗传标记一直是甲壳动物中研究极少的部分,为了筛选与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)繁殖性状(产卵与产卵量)相关的SNP(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)分子标记,为凡纳滨对虾的良种选育提供参考,选择卵黄蛋白原(vitellogenin,VG)基因作为筛选基因。本实验采用PCR产物直接测序法对VG基因进行SNP位点筛查,并与繁殖性状进行关联分析。结果表明:(1)在150个凡纳滨对虾样品中,VG基因的4个结构域一共可以检测到37个SNP位点,8个能引起蛋白质氨基酸的同义突变,3个错义突变,26个无义突变。(2)对37个位点进行分析,发现4个可能的SNP候选位点。(3)多态性分析结果显示,4个候选位点都在中等多态水平,多态信息较为丰富。(4)对4个候选位点与产卵次数、产卵总量、平均产卵量和单位体质量产卵量繁殖性状进行单因素方差分析,结果显示位点3 839与总产卵量和单位体质量产卵量存在显著性差异(P 0. 05)。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
汪春玲 梁萌青 徐后国
在饱食投喂条件下,选用鲜活饵料沙蚕(Nereis succinea)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)亲虾进行营养强化培育60 d,通过比较不同的投喂频率2次/d(F2组)、3次/d(F3组)、4次/d(F4组)对亲虾摄食、生长、繁殖性能、虾体组成和肝胰腺的消化酶活力的影响,旨在探究亲虾繁殖期间营养强化的最适投喂频率。结果显示,随着投喂频率的增加,亲虾的日摄食量逐渐增大,F2组显著低于F4组(P0.05);亲虾的增重率和体长增长率呈先升高后降低的趋势,但无显著性差异(P>0.05)。不同的投喂频率对各组亲虾的单次产卵量、相对产卵量、无节幼体I期个体数、无节幼体孵化率、蚤状幼体I期个体数、无节幼体变态率、性腺指数、初产时间和产卵间期均无显著影响(P>0.05)。亲虾全虾主要体组成分水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分含量也不受投喂频率增加的影响(P>0.05);F2组的胰蛋白酶和脂肪酶活力显著低于F3、F4组(P0.05)。结合本研究的结果和生产实际情况,建议在饱食投喂条件下,凡纳滨对虾亲虾繁殖期间营养强化的适宜投喂频率为2次/d。
[期刊] 水产学报
[作者]
王艳红 胡超群 张吕平 夏建军 任春华
对161 075条凡纳滨对虾dbEST(database of"Expressed Sequence Tags")的数据进行SSR序列筛选,搜索参数为二～六核苷酸重复6次以上(包括6次),共获得含SSR的EST序列12 600条,占整个凡纳滨对虾dbEST数据库的7.8%,其中二核苷酸重复10 104条,占总EST-SSR序列的80.2%;三核苷酸重复2 036条(16.1%),四核苷酸重复336条(2.7%),五核苷酸重复35条(0.3%),六核苷酸重复89条(0.7%)。大部分发现的微卫星序列为完美型(perfect)的重复序列。在二核苷酸所获得的SSR重复单元中,AG/CT是优势重复单元...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
樊云鹏 谭建 栾生 孟宪红 罗坤 隋娟 陈宝龙 曹家旺 孔杰
为了评估不同品系凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)雌虾繁殖性能和后代幼体发育情况,在相同养殖条件下,选取野生群体雌虾90尾,P品系雌虾166尾,S品系雌虾115尾,构建了103个家系。其中,野生群体家系56个, P家系28个, S家系19个。本研究共进行30 d,记录了整个生产周期内每尾雌虾的繁殖参数及后代幼体的发育数据。结果显示,与P品系和S品系相比,野生群体雌虾在交配率和孵化率方面具有显著优越性。在雌虾产卵性能方面, P品系雌虾产卵量极显著低于另外两个品系(P<0.01),产卵周期极显著高于另外两种品系(P<0.01)。关于幼体发育,无论是在幼体存活率还是变态时长方面,野生群体都表现出一定的优越性。分析凡纳滨对虾各繁殖性状间相关关系,发现在3个品系中均可以观察到体重与产卵量呈显著正相关(P<0.05),野生群体、P品系和S品系体重与产卵量的相关系数分别为0.364、0.278和0.553。凡纳滨对虾的受精卵孵化率与幼体变态(ZⅠ→P1)发育时长呈显著负相关(P<0.05),相关系数为-0.211,这表明凡纳滨对虾受精卵孵化率越高,其幼体变态发育时长越短。研究表明,凡纳滨对虾雌虾不同品系间的繁育性能具有较大选择潜力,在筛选高繁育性能亲虾品系的过程中可以根据雌虾繁殖力高低及后代幼体发育情况综合进行选择。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
韩旭 何玉英 李健 张海恩 周雨欣
为探究N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶基因(NAGase)对中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)耐高pH性状的影响，本研究采用直接测序法及实时荧光定量PCR法检测FcNAGase的多态性，并分析其与中国对虾耐高pH性状的相关性。结果显示，通过直接测序的方法，在FcNAGase上共检测到29个潜在的SNP位点，分布频率为1.13/100 bp，其中，内含子的突变频率为0.35/100 bp，外显子的突变发生频率为0.78/100 bp。通过荧光定量PCR方法在中国对虾耐高pH性状分离群体中共检测到14个具有多态性的SNP位点，其中，观测杂合度(H_(o))为0.2581～0.9390，期望杂合度(H_(e))为0.0595～0.4490，多态信息含量(PIC)为0.0574～0.3731；利用卡方检验进行关联性分析，发现2个与中国对虾耐高pH性状显著相关的位点(P
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘峻宇 刘均辉 孔杰 代平 于洋 孟宪红 罗坤 曹宝祥 陈宝龙 高焕 栾生
本研究基于转录组序列开发了37个SNP标记，并对22个凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)家系进行了遗传多样性、家系聚类和亲子鉴定分析，探讨SNP标记在对虾家系选择育种中的应用途径。结果显示，37个SNP位点在凡纳滨对虾22个家系中的平均期望杂合度(H_(e))和平均观测杂合度(H_(o))分别为0.38和0.34；平均多态信息含量(PIC)为0.30，属于中度多态性(0.25
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张彬 何苹萍 韦嫔媛 彭金霞 蒋小珍 熊建华 谢达祥 陈晓汉
２０１４年夏季，广西发生一起凡纳滨对虾（Ｌｉｔｏｐｅｎａｅｕｓ ｖａｎｎａｍｅｉ）亲虾持续死亡病例，患病亲虾部分个体肝胰腺明显萎缩，腹节肌肉轻微白浊，个体呈黄鳃。采用ｔＣＢｓ选择培养基从病虾和亲虾池水中分离细菌，对各分离菌株１６ｓ ｒｒｎａ基因序列进行扩增、测序，运用Ｄｎａｓｔａｒ软件进行序列分析；利用石蜡组织切片技术对病虾肝胰腺、鳃丝、肌肉、肠等器官组织进行病理分析。结果从病虾中分离到５株优势菌，均鉴定为巴西弧菌（ｖｉＢｒｉｏ ＢｒａｓｉＬｉｅｎｓｉｓ）；从亲虾池水中分离到２株巴西弧菌，１株副溶血弧菌（ｖｉＢｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏＬｙｔｉＣｕｓ），１株哈氏弧菌（ｖｉＢｒｉｏ ｈａｒｖｅｙ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
徐如卫 钱昭英 刘小林 路正 任晋东 杨福生
采用平衡巢式设计方法和人工授精技术,每个雄体配3个雌体,构建了18个父系半同胞家系和54个母系全同胞家系。分别测定了每个母系生长到5月龄60个全同胞个体的体质量、全长、体长、头胸甲长、头胸甲宽、头胸甲高、第一腹节背高、第三腹节背高和第一腹节背宽9个生长性状,应用数量遗传学原理,采用方差和协方差分析的方法,估算了5月龄凡纳滨对虾生长性状的遗传力及各性状间的遗传相关及表型相关。结果表明,利用父系半同胞组内相关法估计的遗传力是凡纳滨对虾各生长性状遗传力的无偏估计值。其中,体质量、全长、体长、头胸甲长、头胸甲宽、头胸甲高、第一腹节背高、第三腹节背高和第一腹节背宽狭义遗传力的估计值分别为0.460、0....
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
张天时 刘萍 李健 孔杰 王清印
利用分群分离分析法对中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)人工选育生长快的第6代群体生长性状发生分离的群体进行了微卫星DNA的遗传分析。7个多态性微卫星位点对分离群的大个体组和小个体组扩增时产生7个片段表现差异,扩增片段大小为0.1～1.0kb之间。同时对中国对虾人工选育的生长快群体4个连续世代进行了验证,扩增的结果显示,7个微卫星位点在4个连续世代中大部分的扩增带出现的频率相近,但是有一些扩增片段的基因频率出现差异,这些等位基因频率或增或减,这是否可作为具有良好生长特性的人工定向选育群体的遗传标记尚有待进一步研究。
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
贾智英 全迎春 梁利群 孙效文
采用小片段克隆法构建凡纳滨对虾的部分基因文库,用放射性同位素[γ-32P]ATP标记的(CA)15、(AT)12、(AG)12、(AAT)8、(AAG)8做探针筛选阳性克隆。共获得微卫星序列152个,其中二核苷酸为核心的微卫星序列:(AG)n>(AC)n>(AT)n,三核苷酸为核心的微卫星序列:(AAT)n>(CAT)n>(AAG)n。应用引物设计软件primer3.0设计引物105对。选择合成10对理论上易出现影子带的引物,筛选后用31个凡纳滨对虾个体对这些引物进行了评估,结果10对引物中有8对引物能扩增出谱带,其中1对扩增产物出现影子带,1对扩增产物为单态,有6对扩增产物出现多态。
关键词：
凡纳滨对虾 微卫星DNA 重复序列 克隆
[期刊] 水产学报
[作者]
钟箫 徐斌 刘嘉欣 王艺磊
为探究花生四烯酸(ARA)对凡纳对虾亲本繁殖、免疫及脂质代谢的影响，实验根据实际亲虾培育与幼体生产模式，选取6月龄，大小规格一致的雄虾与单侧眼柄切除的雌虾，随机分为5组，雌雄分开养殖，分别投喂含有不同含量ARA (0.03%、2.70%、4.99%、10.63%)的软颗粒饲料(分别命名为Z1～Z4组)与纯生物饵料(沙蚕)的生产组(Z5)。结果显示，摄食饲料的雌虾增重率(WGR)比生产组显著提升，亲本肝胰腺指数(HSI)随着ARA含量的增加呈现先升后降的整体趋势，在4.99%ARA影响下亲本肝胰腺发育良好，孵化率最高，幼体产量最多质量最好，且卵巢发育相关基因(Vtg、VtgR、VASA与FAMeT2)表达最高；4.99%ARA添加量还可影响雌虾肝胰腺脂质代谢水平，提高脂质利用与转运相关基因(PL、SREPB与FATB)表达，进而影响受精卵中脂肪酸成分变化，显著增加功能性脂肪酸DHA含量，同时影响其中∑n-3 PUFA与∑n-6 PUFA含量及其之间比值。因繁殖与免疫的拮抗关系，造成该ARA含量下抗氧化应激与非特异免疫水平下降。研究表明，饲料中添加不同ARA能够影响凡纳对虾亲本生长与繁殖、免疫及脂质代谢能力，在优先考虑繁殖性能下，建议在亲虾饲料中保持4.99%ARA更能促进卵巢发育与幼体生产。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张彬 韦嫔媛 熊建华 陈晓汉 赵永贞 谢达祥
研究胰酶消化法、网搓法和机械匀浆法等3种方法制备凡纳滨对虾精荚获得游离精子的效果,以每个精荚获得的精子数量和畸形精子比例作为评判标准。数据显示,网搓法和胰酶消化法获得的精子数量较高,分别为21.10×106和20.16×106个,两者无明显差异,均显著高于机械匀浆法,且机械匀浆法的精子畸形率最高,为42.83%,其次是胰酶消化法,为26.83%,网搓法的精子畸形率最低,为17.67%。结果表明,网搓法获得游离精子的方法明显优于胰酶消化法和机械匀浆法,且操作简便。探讨了不同饵料、精荚体质量和着生部位对凡纳滨对虾雄虾成熟精荚中精子质量的影响。结果表明,鲜活饵料组的精荚体质量(>53mg)明显大于商...
关键词：
凡纳滨对虾 精液制备 精子质量评价 精荚
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张建春 孔杰 曹家旺 谭建 代平 孟宪红 罗坤 傅强 陈宝龙 刘东亚 邢群 隋娟 栾生
生产中，凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)雌虾的繁殖性能表现出巨大差异。本研究以一个生产周期中雌虾产卵频次为繁殖力指标性状，以高繁殖力和低繁殖力雌虾为研究对象，对雌虾不同卵巢发育阶段(增殖期、小生长期、大生长期和成熟期)进行组织学观察。针对在前期选择清除分析中筛选到的繁殖候选基因TRX2、PARD3、PLCβ4和RERE，采用实时荧光定量PCR方法首次分析比较它们在高、低繁殖力雌虾不同卵巢发育阶段卵巢、眼柄组织中的表达规律。组织观察结果显示，低繁殖力雌虾卵巢在整个生产周期中无法发育至成熟期，高繁殖力雌虾卵巢在卵黄颗粒的形成和积累、皮质棒形成等关键过程的速度要快于低繁殖力雌虾。基因表达检测结果显示，在卵巢小生长期和大生长期，TRX2、PLCβ4和RERE基因在高繁殖力组卵巢的表达量均显著高于低繁殖力组卵巢(P<0.05)，4个基因在高繁殖力组成熟期卵巢中均维持较高的表达水平；在不同时期的眼柄组织中，低繁殖力组中TRX2、PARD3、PLCβ4和RERE基因的表达量均高于高繁殖力组。研究结果表明上述4种基因可能在凡纳滨对虾卵巢发育过程中发挥重要作用。以上结果为深入研究凡纳滨对虾雌虾繁殖力产生差异的分子机制以及分子辅助育种提供重要参考。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李丽君 宋晓红 林瑶琼 钟声平 乔莹 毛勇 苏永全 王军
为构建日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)耐高温性状的评价体系,全面了解日本囊对虾的耐热性状,本研究首先采用耐热性(upper thermal tolerance,UTT)作为评定指标,开展不同规格日本囊对虾耐热性状的分析;进一步结合临界温度法(critical thermal methodology,CTM)将日本囊对虾与脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)进行了耐热性状的种间比较。结果显示:(1)不同大小的日本囊对虾个体之间耐热性(UTT)存在差异,其体重与耐热性之间呈负相关,相关系数为-0...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
段毓佳 谭建 栾生 罗坤 王宏杰 隋娟 孟宪红 孔杰
在水产养殖中，尤其是高密度养殖情况下，缺氧会短期内造成个体的大量死亡，从而影响生产效益。本研究以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)高抗和快大2个品系作为研究对象，利用高致死溶解氧(DO)胁迫的方式对2个品系各41个家系共计6 560尾幼虾进行低氧耐受性测试，统计高致死溶解氧水平下幼虾的存活性状，分析不同品系间及同一品系不同家系间耐低氧性状的差异，评估其遗传参数；对耐受性有显著差异的家系个体的鳃、肌肉、肝胰腺组织进行组织学观察，并比较其细胞水平上的差异。结果显示，在0.3 mg/L低氧条件下，高抗品系和快大品系的家系半致死存活率SS_(50)均表现出显著差异(P<0.05)，高抗品系SS_(50)为49.30%，快大品系SS_(50)为42.52%；家系间存活时间的变异系数分别为60%和45%。利用阈值性状动物模型，以半致死时的个体存活状态作为观测值(存活为1，死亡为0)估算的遗传参数为(0.345±0.031)～(0.378±0.029)，经过转换后在连续变化的观测值尺度上的遗传力为(0.219±0.031)～(0.237±0.029)，表现为中等遗传力水平。高抗品系中低氧耐受家系和低氧敏感家系的鳃、肌肉、肝胰腺组织均出现不同程度的损伤，但不同的家系间表现出不同程度的抗逆生理特征差异，这可能与高抗不同家系抗逆耐受力强弱有关。不同家系间在低氧胁迫下的存活时间、生理特性差异以及各品系遗传力估算结果表明，凡纳滨对虾对高致死溶解氧水平的耐受性状存在丰富的遗传变异，具有选育的可行性。
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