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[期刊] 水产学报
[作者]
王思琪 陈娟娟 杨锐 骆其君 吴玮 崔晓山 陈海敏
为研究几种经济红藻中茉莉酸合成途径的关键物质,实验采用液相色谱—质谱联用技术(LC-MS)对茉莉酸生物合成途径相关物质建立检测方法,并对龙须菜、坛紫菜受到机械损伤时各物质的变化情况进行检测。以100%甲醇提取茉莉酸(JA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、12-氧-植物二烯酸(12-OPDA)和13-氢过氧化亚麻酸(13-HpOTE),利用XBridge TM C18色谱柱,以甲醇/水为流动相分离4种物质。优化条件下4种物质得到良好分离,加标回收率为81.23%～90.25%,检测限为0.04～0.56 ng/mL,灵敏度高。坛紫菜、龙须菜和真江蓠3种红藻中,坛紫菜中未检测到JA和13-HpOTE,4种物质均在另外2种藻中检测到。龙须菜受机械损伤胁迫后,4种物质在短时间内得到积累,其中13-HpOTE响应迅速。研究表明,红藻中可能存在类似于植物的茉莉酸合成途径,并参与对损伤的胁迫响应。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王静 邬晓红 其乐木格 特日格乐 祁智 亢燕
对拟南芥根中的茉莉酸(Jasmonic acid,JA)生物合成和信号转导途径及JA对根结线虫发病机制所起的作用进行了研究。研究发现根结线虫的侵染显著诱导拟南芥根中JA和JA-异亮氨酸共轭物(JA-Ile)的合成,分别为AOS1、OPR3和JAR1基因调控。根结线虫在JA缺失突变体和JA-Ile缺失突变体(aos1、opr3、jar1)根中的生殖活性明显低于野生型,但是在缺失JA信号转导核心基因的突变体coi1和jin1的根中同野生型没有显著区别。使用外源JAIle可以使根结线虫在jar1根中的生殖能力恢复到在野生型根中的水平。这些结果证明,拟南芥根中JA的合成途径为根结线虫侵染所必需。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
崔伟康 杨鹏 廉法卓 夏明 徐金 尤华才 陈冬梅 宋圆圆
以过表达前系统素转基因番茄（３５Ｓ∷ｐｒｏＳｙＳ）、茉莉酸合成突变体番茄（Ｓｐｒ２）和野生型番茄（ＷＴ）为试验材料，研究了其被棉铃虫取食后叶片保护酶活性和防御反应基因表达情况，以及对棉铃虫抗性的影响．结果表明：棉铃虫取食不同基因型番茄叶片后，多酚氧化酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶和脂氧合酶活性在３５Ｓ∷ｐｒｏＳｙＳ植株中最高，在ＷＴ植株中次之，在Ｓｐｒ２植株中最低．荧光定量ｐＣｒ检测表明，棉铃虫取食不同基因型番茄叶片后，脂氧合酶基因、丙二烯氧化物环化酶基因和蛋白酶抑制剂基因的转录水平在３５Ｓ∷ｐｒｏＳｙＳ植株中最高，在ＷＴ植株中次之，而在Ｓｐｒ２植株中这些抗性基因的表达未受到虫害的诱导．生物测．．．
关键词：
番茄 棉铃虫 茉莉酸信号途径 诱导抗虫性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘亚洲 张翠 孙一丁 杨奕 李铷 卢红 郭怡卿
[目的]肉桂酸-4-羟化酶(C4H)是苯丙烷合成途径次生代谢的重要酶,通过对不同化感潜力水稻中4个C4H基因:Os01g0820000、Os02g0467000、Os02g0467600、Os05g0320700的表达分析,研究它在不同化感潜力水稻中的区别,有助于揭示水稻化感抗(耐)性的内在机制。[方法]选用非化感水稻Lemont和化感水稻PI312777,进行水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)处理,通过q-PCR对4个C4H基因的表达进行分析比较,同时以水稻叶片水浸提液测定其对稗草根生长的影响。[结果]经过JA和SA处理的非化感水稻Lemont叶片水浸提液对稗草根生长的抑制率分别提高了22%和18%,而化感水稻PI312777的抑制率分别提高了40%和28%。q-PCR结果表明,JA和SA处理后,Os01g0820000和Os02g0467000在2种水稻中相对表达量相似;而Os02g0467600和Os05g0320700两个基因在PI312777中相对表达量上调程度均高于Lemont,表明这2个基因在PI312777中可能更多的参与到C4H的合成代谢。[结论]JA和SA处理后的2种水稻化感潜力增强,Os02g0467600和Os05g0320700在PI312777和Lemont中表达差异较大,因此推测这2个基因是造成2种水稻化感潜力不同的重要因素。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
曹晓蔓 张亚光 张峰
[目的]本文旨在建立JAZ与NINJA蛋白离体和活体互作以及2个蛋白复合体晶体筛选的体系，并获得2个蛋白复合体晶体。[方法]采用酵母双杂交和双分子荧光互补法用于活体条件下JAZ与NINJA蛋白互作区域的验证；在离体条件下，通过氢氘交换质谱(HDX) 和Alpha Screen验证JAZ与NINJA蛋白的互作区域并进一步筛选两个蛋白互作的最小区域；使用原核（大肠杆菌）表达系统，亲和层析和凝胶过滤层析纯化等手段获得NINJA截短蛋白。将NINJA截短蛋白与JAZ多肽按照物质的量比1:1.5混合并孵育一段时间，通过坐滴结晶方法进行复合体结晶，并最终获得复合体晶体。[结果]成功创建了JAZ与NINJA离体和活体互作体系；分别在0.2 mol·L~(-1) 二水氯化钙、0.1 mol·L~(-1) BIS-TRIS pH6.5、45%2-甲基-2，4-戊二醇；0.2 mol·L~(-1) 醋酸铵、0.1 mol·L~(-1) Tris pH8.5、45%2-甲基-2，4-戊二醇两个条件下获得JAZ多肽与NINJA(342-406)的复合体晶体。[结论]JAZ蛋白ZIM结构域的TIFY基序和羧基端与NINJA(342-406）是JAZ与NINJA蛋白互作所必需的；JAZ蛋白ZIM结构域是JAZ同源和异源互作所必需的；成功获得了JAZ与NINJA复合体晶体。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
朱丽娟 张崇涛 王耀伟 江朝杨 解晓盈 白雅妮 韩艳红
茉莉H病毒(JaVH)是一种天竺葵黄斑病毒属病毒,可引起严重的茉莉病毒病害.该病毒基因组含有5个开放阅读框,分别编码2个复制相关蛋白、2个运动蛋白和1个外壳蛋白(CP),其中,CP可能是一个RNA沉默抑制子,并且与致病性密切相关.构建JaVH CP瞬时表达重组质粒pXT-CP,将其与pGDG混合浸润本生烟,浸润第5天利用紫外灯照射,观察到浸润区域仍具强烈荧光,表明CP是一个较强的沉默抑制子.为进一步鉴定CP的关键功能位点,将JaVH外壳蛋白与同属其他病毒进行比对后构建了18个pXT-CP突变体,利用农杆菌共浸润瞬时表达系统和Western blot明确了13个影响JaVH的CP功能的关键氨基酸位点,包括Trp 28、Arg 40、Arg 58、Gly 75、Ile 83、Thr 84、Val 108、Phe 111、Ser 115、Lys 123、Tyr 124、Arg 132和Lys 200.
关键词：
茉莉H病毒 外壳蛋白 RNA沉默抑制子
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张立宁 程继鸿 杨瑞 孙中华 吴春霞 王绍辉
【目的】研究茉莉酸合成相关基因Spr2与LePrs对番茄抗根结线虫的影响,探讨茉莉酸在番茄抗根结线虫病中的作用。【方法】以番茄茉莉酸合成突变体spr2、茉莉酸过量表达转基因番茄35S::PS及野生型CM为试材,研究外源喷施茉莉酸甲酯及不同番茄试材相互嫁接对接种根结线虫后番茄根结数、蛋白质酶抑制剂PI-Ⅱ表达及Spr2、LePrs基因转录水平的影响。【结果】番茄茉莉酸合成突变体spr2较野生型与茉莉酸过量表达转基因番茄35S::PS容易感染根结线虫,外源喷施茉莉酸甲酯降低了番茄根结数。以茉莉酸过量表达转基因番茄35S::PS为砧木,可以提高嫁接植株对根结线虫的抵抗能力。【结论】Spr2突变降低了...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
袁书艳 胡青 陈雪梅 李悦 蒋湘宁
以胡杨悬浮培养细胞为材料 ,研究茉莉酸在细胞抗盐性中的作用 .经 10 0mmol LNaCl处理 3d ,部分胡杨细胞发生质壁分离 .NaCl处理的同时加入 10 - 3mg L茉莉酸 (jasmonicacid ,JA)处理 3d ,罕有细胞发生质壁分离 ,说明JA在一定程度上可以缓解NaCl对胡杨细胞造成的渗透胁迫 .经 10 - 3mg LJA和 10 0mmol LNaCl分别处理培养 ,两处理悬浮培养的细胞内的可溶性蛋白发生了明显变化 .JA处理诱导出 6 0 ,4 0 ,30 ,2 6和 2 4kD蛋白 ,NaCl处理诱导出分子量约为88,6 8,6 0 ,5 0和 33kD蛋白...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘艳 潘秋红 战吉宬 黄卫东
【目的】研究内源茉莉酸类(JAs)和水杨酸(SA)对机械伤害的响应特点。【方法】以豌豆幼苗为试材,设置机械伤害、外施茉莉酸(JA)和SA3个处理,分别采用ELISA、HPLC和分光光度法测定内源JAs与SA含量,及其合成关键酶活性。【结果】伤害处理后30min,内源JAs含量显著增加,随后迅速下降;JAs生物合成关键酶脂氧合酶(LOX)和丙二烯氧化物合成酶(AOS)活性增加滞后于JAs含量增加。伤害处理后24h,内源JAs含量又有小幅升高,此时LOX和AOS活性也维持在较高水平。与此相对应,内源自由态SA在JAs突发时呈下降趋势。外源JA处理后内源SA和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化同伤害处...
关键词：
水杨酸 茉莉酸类 机械伤害 豌豆
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张占芳 李睿 仲天庭 朱昌华 夏凯 甘立军
为了探索茉莉酸(jasmonic acid,JA)是否参与调控水稻细胞质雄性不育性状,以协青早A和协青早B为材料,通过分析茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)的生理效应,比较2种材料对于外源MeJA敏感性的差异;通过检测机械伤害和幼穗发育过程中内源JAs(JA+MeJA)含量的变化,比较它们内源JAs合成的差异。结果表明:较低浓度的外源MeJA抑制协青早A的种子萌发,但不能抑制协青早B的种子萌发;MeJA抑制水稻的第2叶生长,协青早B表现出更强的抑制效应;MeJA诱导的离体叶片衰老进程2种材料无明显差异。当水稻叶片受到机械伤害后,协青早B内JAs含量的上升幅度明显高于协青早...
[期刊] 课程教材教学研究(教育研究)
[作者]
王爱卿
将凌乱的想法变成一篇优秀的文章不是朝夕之功,持续不断的写作实践是培养写作能力不可或缺的条件。成熟的写作者写作时会经历构思、列提纲、起草和修改的过程,教师在引导学生遵循写作流程、培养规范的写作习惯的同时,还应给予尚处于起步阶段的初中生具体、详细的写作指导。写作训练要讲求系统化,从形式到内容,按照由简到繁、由易
[期刊] 水产学报
[作者]
王鑫威 王丽丽 龚一富 金思 李林 陈东瑞
雨生红球藻是一种能产生重要次生代谢产物———虾青素的单细胞绿藻,茉莉酸甲酯(MeJA)等诱导因子可促进植物次生代谢产物的积累。以雨生红球藻为研究对象,研究了不同浓度MeJA对雨生红球藻细胞生长、虾青素含量和dxs基因表达的影响。结果表明,MeJA在抑制雨生红球藻细胞生长和总虾青素产量的积累的同时,却能促进雨生红球藻单位细胞虾青素的合成能力。当MeJA浓度为800μmol/L时,单位细胞虾青素合成能力可达1.75×10-9mg,相比对照组(1.42×10-9 mg)增加23.24%。RT-PCR分析结果表明,dxs基因的表达受MeJA的诱导,800μmol/L MeJA处理条件下,dxs基因的表...
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
刘东超 扈博 周姣 李德海 王占斌
【目的】研究茉莉酸甲酯（Methyl jasmonate, MeJA）与油酸协同诱导作用下粗毛纤孔菌菌丝体中防御酶变化与三萜类化合物合成量的相关性，为揭示诱导子促进生物体内次生代谢物合成奠定一定的理论基础。【方法】将50μmol/L MeJA、3%油酸及复配的2%油酸与100μmol/L MeJA分别添加到粗毛纤孔菌菌丝体培养液中，采用pH计、电导率仪、紫外分光光度计等仪器分析粗毛纤孔菌菌丝体的pH值、电导率、过氧化氢、丙二醛、抗氧化酶活性和三萜含量的变化。【结果】与对照组相比，各试验组培养液的pH值、电导率值均显著增高（P <0.05），其中复配组在第8天菌丝体三萜含量增幅最大，比同期对照组增加了129.41%。【结论】在MeJA与油酸的诱导下粗毛纤孔菌菌丝出现了氧化应激反应，导致抗氧化酶活性升高，进而引起菌丝体发生防御性反应，最终提高了细胞内三萜类物质的合成量。基于对防御酶干预的MeJA与油酸诱导粗毛纤孔菌三萜类化合物合成的研究，为提高菌丝体培养次级代谢产物产量提供了理论依据。
关键词：
粗毛纤孔菌 总三萜 诱导剂 防御体系
[期刊] 中国农业科学
[作者]
黄俊宝 何永明 曾晓春 向妙莲 付永琦
【目的】水稻颖花开放是由浆片膨大所启动的,并与花丝伸长和花药开裂同步发生。脂类衍生的茉莉酸(JA)激素在植物生殖发育中发挥重要调控作用。本文分析水稻颖花开放过程中花器官JA水平及浆片JA信号基因表达的动态变化,以进一步揭示内源JA信号在水稻颖花开放中的作用。【方法】以粳稻中花11颖花自然开放前18 h(18 h BF)和临近开放时0 h(0 h BF)的颖花器官(小穗梗、内外稃、浆片、雄蕊、雌蕊)为试验材料。100 mg液氮研磨的样品经甲醇﹕水﹕乙酸(80﹕19﹕1,体积比)混合液提取、氮气浓缩和0.22μm滤膜过滤后,直接应用超高速液相色谱-电喷雾-质谱系统(UFLC-ESI-MS)测定JA...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈大清 王雪英 李亚男
选用马铃薯Mira和N552继代脱毒苗为材料,在人工诱导条件下研究水杨酸 (SA)、茉莉酸甲酯 (MJ)对试管马铃薯形成的作用,结果表明:适宜浓度的SA和JA均能提高微薯的结薯率,其中SA的最佳浓度为10. 0×10-1mol/L,MJ的最佳浓度为 10×10-6 mol/L,但Mira和N552对SA和MJ诱导反应的敏感程度有差异。SA对Mira和N552的单株结薯数影响较小,但对提高两品种的单株结薯重有明显作用。MJ对Mira的单株结薯数和单薯重有显著促进效应,但对N552的作用不显著。与对照比较, SA和MJ处理均导致茎叶和微薯的可溶性糖含量的降低,但对淀粉含量表现为茎叶中的下降,微薯...
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