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[期刊] 水产学报
[作者]
王玉生 李雅娟 于长宁 姜志强 李霞 王伟 刘博 高养春 李佳奇
为探索诱导鱼类雄核发育单倍体的新方法及形成机制,以大鳞副泥鳅为研究对象,无须卵子失活,仅用冷休克诱导雄核发育单倍体,并对其后代的早期胚胎发育、染色体数目、分裂胚细胞学观察等进行了系统分析。早期胚胎发育结果显示,0℃与3℃处理组的孵化率分别为0.83%和57.42%,二者之间孵化率差异显著(P
关键词：
大鳞副泥鳅 冷休克诱导 雄核发育 单倍体
[期刊] 淡水渔业
[作者]
康绍乐 职金华 杜启艳 常重杰
采用冷休克抑制第二极体排出的方法研究了泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)三倍体,并探讨了诱导泥鳅三倍体形成的最佳条件。结果显示:受精后3~5 min,用2℃冷水休克处理30 min,不仅可以得到较高的三倍化率,还可维持相当高的成活率。另外,本实验发现泥鳅间期细胞核Ag-NORs的最高数目与染色体组数目具有明显的对应关系,可以作为判断胚胎倍性的简单标准。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
潘英 谢卫著 夏朝林
利用紫外线诱导近江牡蛎(Crassostrea rivularis)单倍体,来用强度为1820μW/(cm2s)的紫外线(254nm)分别照射卵子0s、10s、20s、30s、40s、50s、60s、70s、80s和90s后,使之与正常精子进行授精实验。结果发现,照射50s的卵子能够保持较高的受精率(63.5%),该处理组的D形幼虫发生率为0,染色体检查结果显示此时单倍体率最高(50.4%),并出现"Hertwig"效应。由于有效地诱导雄核发育需要卵子遗传物质失活和保证较高的受精率,因此在强度为1820μW/(cm2s)的紫外线下照射50s是获得近江牡蛎雄核发育单倍体的最佳条件。研究还表明,受...
关键词：
近江牡蛎 紫外线照射 雄核发育 遗传失活
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈春山 魏凯 韩姝伊 郑伟 郭明磊 董颖 胡红霞
为探索细鳞鲑(Brachymystax lenok)三倍体育种技术的方法,采用热休克法进行了三倍体诱导实验,共分为6组,其中26℃设置4组,分别讨论不同起始时间和不同持续时间的诱导情况,其余2组选取24℃和28℃最优处理条件进行比较。结果显示:上述6个实验组均能够获得三倍体个体,24℃和28℃诱导率分别为48. 26%和57. 62%,26℃条件下平均诱导率达到82. 05%,各组间三倍体诱导率存在显著差异(P
[期刊] 中国水产科学
[作者]
袁媛 李琪 于瑞海
研究了利用6-二甲基氨基嘌呤(60μg/mL;6-DMAP)抑制第1卵裂诱导栉孔扇贝[Chlamys farreri(Jones et Pre-ston)]雄核发育二倍体的条件。雄核发育单倍体是将强度为2.8 mW/(cm2.s)的紫外线照射20 s的卵子与正常精子受精后得到的。6-DMAP不仅可以有效地抑制减数分裂,还可以有效地抑制有丝分裂;抑制第1卵裂的适宜起始时间为受精后80 min,诱导率为21.0%~22.6%。细胞学观察显示,6-DMAP抑制第1卵裂产生的雄核发育二倍体主要来源于第1卵裂中期的受精卵,由于阻止了染色体分离和原核移动,导致一个融合的二倍性雌性原核的形成;经紫外线照射的...
关键词：
栉孔扇贝 雄核发育二倍体 6-DMAP
[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘亚秋 王志坚 李新辉 常藕琴
为了解大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)肾脏发育的一般规律,利用组织学的方法,对0~50日龄大鳞副泥鳅肾脏的胚后发育进行显微观察和研究。结果显示:大鳞副泥鳅初孵仔鱼体内有一条贯穿身体的原始肾管。2日龄仔鱼前肾小管管壁细胞排列疏松;5日龄前肾小管上皮为单层立方上皮,细胞间界限不清;7日龄前肾小管之间出现散在的未分化的造血干细胞;12日龄前肾小管继续分化,可见分化雏形的肾小体,中肾近曲小管开始分化形成;15日龄后,出现肾单位,肾小球形成由间充质细胞构成网状结构,肾脏腹侧可见大血管;20日龄中肾结构致密,腹侧血管(静脉)充满血液,远曲小管分化形成;30日龄中肾小管管壁多为单层柱状上皮细胞组成,排列十分紧密;50日龄后,中肾肾小体散在分布,远曲小管、近曲小管以及集合管等肾小管结构趋于完善。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
龙良启 汤宝贵 赵振山 简运华
用从 10 0种随机引物中筛选出的 4种引物对自然群体中的泥鳅、大鳞副泥鳅进行了RAPD分析。结果表明 :4种引物 (S2 9、S96、S97、S99)分析所得泥鳅种群内遗传纯度分别为 0 .544 9、0 .4 94 6、0 .592 6、0 .642 0 ,大鳞副泥鳅遗传纯度分别为 0 .4 4 49、0 .4 30 4、0 .5159、0 .542 4 ;两者间遗传距离依次为 0 .5385、0 .5714、0 .50 2 4、0 .52 66;泥鳅特征带 1.0kb、0 .6kb、0 .9kb、0 .2kb ,大鳞副泥鳅特征带 0 .7kb、0 .52kb、0 .65kb、0 .5kb...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
叶辽辽 徐胜 袁秋芸 陈平法 温安祥
为了解十二烷基苯磺酸钠(SDBS)对大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)胚胎发育及幼鱼性腺发育的影响,将受精卵随机分成7组,分别置于0、0.1、0.3、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/L SDBS溶液中充氧孵化,统计培育周期、孵化周期、孵化率和畸形率。选取均重为3 g左右健康的大鳞副泥鳅210尾,随机分成7组,分别置于0、0.1、0.3、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/L SDBS溶液中饲养60 d,统计大鳞副泥鳅的死亡情况,取性腺制作组织切片,观察SDBS对大鳞副泥鳅
[期刊] 水产学报
[作者]
宋立民 王卫民 周小云 阎里清 王玉芬
分别采用冷、热休克抑制第二极体释放的方法诱导黄颡鱼三倍体。结果表明,在卵受精后2min,5℃处理20min,胚胎时期的三倍体率达70%左右,孵化率50%左右,幼鱼时期三倍体(含嵌合体)的检出率为25%,此条件为冷休克处理的优化参数;在卵受精后2min,40℃处理2min,胚胎时期的三倍体诱导率达58%,孵化率为39%,幼鱼时期三倍体(含嵌合体)的检出率为40%,此条件为热休克处理的优化参数。正交分析得出,冷休克条件下起始休克时间是原肠期三倍化率和孵化率的重要影响因子,温度对畸形个体的产生有重要影响;热休克条件下,参考三倍体率、畸形率、孵化期相对存活率三者而言,休克温度均是重要因素。比较观察到冷...
关键词：
黄颡鱼 冷休克 热休克 人工诱导 三倍体
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
赵岩 赵金良 罗明坤 梁从飞 李传阳 伍勇
为了提高尼罗罗非鱼和萨罗罗非鱼人工杂交种的制种效率,以尼罗罗非鱼为母本,萨罗罗非鱼为父本进行人工授精,用冷休克抑制第二极体释放的方法诱导异源三倍体。实验对人工授精后处理起始时间(timing after-fertilization,TA)、处理温度(temperature,T)、处理持续时间(duration,D)这3个参数分别进行单因素实验,并设立尼罗罗非鱼♀×尼罗罗非鱼、尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼两个对照组。在T=♂♂9℃、D=30 min下,受精后10 min处理组检测不到三倍体;在TA=7min、D=30 min下,T=5~9℃能得到97.2%~100%的三倍体诱导率;在TA=7 min...
[期刊] 水产学报
[作者]
李猛 虞炯莹 王卫民
二倍体泥鳅与大鳞副泥鳅杂交能够顺利获得杂交后代，其正反交核型都为（2n=49），但杂交后代精巢表现出明显的发育迟缓现象，杂交泥鳅自交与回交实验表明，其雄性不可育。为了初步探究二倍体泥鳅和大鳞副泥鳅杂交F1代雄性不育的原因，实验通过计算机辅助精子活力分析系统（CASA）、光学显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞技术对二倍体泥鳅（DD）、大鳞副泥鳅（PP）、其正反杂交F1代（DP）和（PD）四种泥鳅精子的形态结构与活力进行了分析。结果显示，激活30 s时，DD和PP的精子运动率分别为76.50% ± 0.70%和75.17% ± 8.60%，极显著高于DP（3.65% ± 1.75%）和PD（2.68% ± 0.63%）（P < 0.01），且杂交泥鳅的VAP、VCL、VSL等运动参数也极显著低于DD和PP（P < 0.01），说明杂交泥鳅精子的活力及其低下。应用流式细胞技术对四种泥鳅精巢内细胞进行倍性鉴定，发现DD和PP精巢内大多为1N精子，而DP和PD精巢内除了正常单倍体精子外，还有大量的2N和4N以及少量的8N细胞。通过扫描电镜和透射电镜发现，DD与PP精巢内精子细胞致密，细胞结构完整，大小均匀，其全长分别为（33.71 ± 2.12）和（34.28 ± 1.83）μm。而DP和PD精巢内的精子其头长显著高于DD和PP的精子 ，其尾长、中片长和全长皆显著低于DD和PP的精子。研究表明，杂交泥鳅的的精子与正常精子相比，在精子形态和内部DNA含量方面表现出明显多态性。这可能是是造成杂交泥鳅雄性不育的原因。杂交泥鳅中出现了大量的异常精子，如多尾精子、双核精子以及大头精子，根据测量，其头部大小表现也出明显的多态性，根据头部体积大小测量估算其倍性，其中有正常的精子即单倍体精子，同时有二倍体精子、四倍体精子、八倍体精子甚至更高倍性的精子。这些杂交泥鳅的异常精子为其精子活力低下以及雄性不育提供了重要证据。
[期刊] 水产学报
[作者]
潘光碧 胡德高 邹桂伟 罗相忠 梁拥军
采用热休克阻止受精卵第一次卵裂的方法诱导颖鲤四倍体。运用正交试验对影响热休克诱导效果的主要三个因素，即处理起始时间（TB）、处理温度（TT）及处理持续时间（TP）进行了筛选。颖鲤受精卵在受精后（水温22℃）52、55、58、61、64和67min时以40、41、42℃的高温持续处理1、1．5、2min，胚胎的四倍化率为0％－67．89％。试验表明，诱导四倍体颖鲤的较适条件为受精后58min和66min左右以40．3－41．3℃处理1－1．5min。
关键词：
颖鲤 热休克 四倍体 正交试验
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
方礼豹 周小云 崔蕾 阎里清 王卫民
利用二倍体(D)、四倍体(T)泥鳅与大鳞副泥鳅(P)间的自交与杂交,获得9种细胞型子代,分别为(♀×♂):D×D、D×T、D×P、T×D、T×T、T×P、P×D、P×T和P×P。采用流式细胞计数法和染色体制片技术分别对其进行了DNA相对含量测定和染色体组型分析。DNA相对含量结果显示:D×D、D×P、P×D和P×P属于二倍体;D×T、T×D、P×T和T×P属于三倍体;T×T属于四倍体,且3种类型DNA含量比值接近2∶3∶4。D×D的染色体数2n=50,核型为8m+6sm+36t,臂数NF=64;T×T染色体数为4n=100,抗型16m+12sm+72t,NF=128;P×P为2n=48,12m...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
许建和 尤锋 吴雄飞 郑春静 石钢德 蒋宏雷 刘伟健 徐永立 张培军
同时采用冷休克法和静水压法进行大黄鱼(Pseudosciaena croceaRichardson)三倍体诱导条件研究,同时比较适合条件下两种方法诱导效果差异以及大批量诱导组不同生长阶段三倍体检出率的差别。结果表明:(1)冷休克法和静水压法都可成功诱导出大黄鱼三倍体。冷休克法适宜诱导条件为20℃培育水温下授精后3 min,在3~4℃海水中处理8~10 min;静水压法适宜诱导条件为同样培育水温下授精后3 min,在静水压450 kg/cm2下处理3 min。三倍体诱导率受处理时刻、处理时间和处理温度(或压力)3因素的影响。(2)综合三倍体诱导率、处理后受精卵原肠期存活率和仔鱼孵化率,静水压法诱...
关键词：
三倍体 大黄鱼 人工诱导 冷休克 静水压
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