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[期刊] 水产学报  [作者] 宋立民  王卫民  周小云  阎里清  王玉芬  
分别采用冷、热休克抑制第二极体释放的方法诱导黄颡鱼三倍体。结果表明,在卵受精后2min,5℃处理20min,胚胎时期的三倍体率达70%左右,孵化率50%左右,幼鱼时期三倍体(含嵌合体)的检出率为25%,此条件为冷休克处理的优化参数;在卵受精后2min,40℃处理2min,胚胎时期的三倍体诱导率达58%,孵化率为39%,幼鱼时期三倍体(含嵌合体)的检出率为40%,此条件为热休克处理的优化参数。正交分析得出,冷休克条件下起始休克时间是原肠期三倍化率和孵化率的重要影响因子,温度对畸形个体的产生有重要影响;热休克条件下,参考三倍体率、畸形率、孵化期相对存活率三者而言,休克温度均是重要因素。比较观察到冷...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈春山  魏凯  韩姝伊  郑伟  郭明磊  董颖  胡红霞  
为探索细鳞鲑(Brachymystax lenok)三倍体育种技术的方法,采用热休克法进行了三倍体诱导实验,共分为6组,其中26℃设置4组,分别讨论不同起始时间和不同持续时间的诱导情况,其余2组选取24℃和28℃最优处理条件进行比较。结果显示:上述6个实验组均能够获得三倍体个体,24℃和28℃诱导率分别为48. 26%和57. 62%,26℃条件下平均诱导率达到82. 05%,各组间三倍体诱导率存在显著差异(P
[期刊] 淡水渔业  [作者] 康绍乐  职金华  杜启艳  常重杰  
采用冷休克抑制第二极体排出的方法研究了泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)三倍体,并探讨了诱导泥鳅三倍体形成的最佳条件。结果显示:受精后3~5 min,用2℃冷水休克处理30 min,不仅可以得到较高的三倍化率,还可维持相当高的成活率。另外,本实验发现泥鳅间期细胞核Ag-NORs的最高数目与染色体组数目具有明显的对应关系,可以作为判断胚胎倍性的简单标准。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 赵岩  赵金良  罗明坤  梁从飞  李传阳  伍勇  
为了提高尼罗罗非鱼和萨罗罗非鱼人工杂交种的制种效率,以尼罗罗非鱼为母本,萨罗罗非鱼为父本进行人工授精,用冷休克抑制第二极体释放的方法诱导异源三倍体。实验对人工授精后处理起始时间(timing after-fertilization,TA)、处理温度(temperature,T)、处理持续时间(duration,D)这3个参数分别进行单因素实验,并设立尼罗罗非鱼♀×尼罗罗非鱼、尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼两个对照组。在T=♂♂9℃、D=30 min下,受精后10 min处理组检测不到三倍体;在TA=7min、D=30 min下,T=5~9℃能得到97.2%~100%的三倍体诱导率;在TA=7 min...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 许建和  尤锋  吴雄飞  郑春静  石钢德  蒋宏雷  刘伟健  徐永立  张培军  
同时采用冷休克法和静水压法进行大黄鱼(Pseudosciaena croceaRichardson)三倍体诱导条件研究,同时比较适合条件下两种方法诱导效果差异以及大批量诱导组不同生长阶段三倍体检出率的差别。结果表明:(1)冷休克法和静水压法都可成功诱导出大黄鱼三倍体。冷休克法适宜诱导条件为20℃培育水温下授精后3 min,在3~4℃海水中处理8~10 min;静水压法适宜诱导条件为同样培育水温下授精后3 min,在静水压450 kg/cm2下处理3 min。三倍体诱导率受处理时刻、处理时间和处理温度(或压力)3因素的影响。(2)综合三倍体诱导率、处理后受精卵原肠期存活率和仔鱼孵化率,静水压法诱...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 华泽祥  郗啟文  陈俊  陈家磊  武祥伟  黄松茂  赵玉姣  张铭枭  
为了研究冷休克法诱导乌蒙山金线鲃(Sinocyclocheilus wumengshanensis)三倍体的方法,试验分析了不同参数的诱导效果及三倍体生长特征。结果显示:冷休克2~3℃、受精后5 min开始诱导、诱导25 min可获得受精率64.55%、孵化率60.61%、畸形率26.54%,三倍体率100%。诱导组平均孵化时间为4 d 14 h~6 d 19 h,低于对照组7 d 2 h。诱导组初孵仔鱼畸形率为17.19%~71.25%。受精后3 min与5 min开始诱导、持续诱导30 min,仔鱼死亡率最大分别为24.70%与39.38%。3~60日龄三倍体与二倍体的体重、体长均无显著性差异,180日龄三倍体的体长与体重分别为(74.00±1.58) mm、(4.46±0.30) g,分别是二倍体的1.09倍与1.27倍,体重显著大于二倍体。
[期刊] 水产学报  [作者] 邱高峰  堵南山  赖伟  
以热休克抑制受精卵第一次卵裂,进行日本沼虾四倍体诱导实验。热休克温度在38、39、40和41℃,于产卵210~230分钟后,处理1~2分钟均可获得四倍体胚胎,40℃处理1.5分钟,四倍体胚胎诱导率达36.8%,38和39℃处理2分钟所获得的嵌合体胚胎比率大于四倍胚胎比率,而热休克温度40℃时,四倍体率显著高于嵌合体比率。41℃处理时由于有丝分裂异常导致胚胎死亡率高,更适宜的处理时间有待进一步研究,以便提高四倍体育成率
[期刊] 水产学报  [作者] 潘光碧  胡德高  邹桂伟  罗相忠  梁拥军  
采用热休克阻止受精卵第一次卵裂的方法诱导颖鲤四倍体。运用正交试验对影响热休克诱导效果的主要三个因素,即处理起始时间(TB)、处理温度(TT)及处理持续时间(TP)进行了筛选。颖鲤受精卵在受精后(水温22℃)52、55、58、61、64和67min时以40、41、42℃的高温持续处理1、1.5、2min,胚胎的四倍化率为0%-67.89%。试验表明,诱导四倍体颖鲤的较适条件为受精后58min和66min左右以40.3-41.3℃处理1-1.5min。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 宋立民  袁立来  刘肖莲  王卫民  
采用流式细胞仪(Becton Dickinson FACs Calibur)测量DNA相对含量和染色体计数2种方法,对随机选出的黄颡鱼鱼苗样本进行三倍体个体的鉴定和筛选。第1种方法是采取黄颡鱼血样,经PI染色,用流式细胞仪测定其倍性,结果14尾中有8尾黄颡鱼的DNA相对含量约是对照样本(二倍体)的1.5倍,证明为三倍体个体。染色体计数采用体内注射PHA短期培养法,经鉴定,相同样本中有8尾是三倍体,此结果验证了用流式细胞仪所测定的结果。通过比较得出,在多倍体育种工作中,尤其是诱导率不高的情况下,采集血样用流式细胞仪测定鱼体倍性是一种准确、迅速的方法,同时能够避免杀死鱼体,可以用来批量筛选多倍体鱼...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 刘金兰  董少杰  孙学亮  刘美惠  杨广  
对由同一批卵繁殖的二倍体和三倍体黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的红细胞胞体和核大小及部分血液学指标进行了比较研究。结果显示:三倍体黄颡鱼的红细胞胞体及其核的长径、表面积和体积均显著地大于二倍体(P<0.01);三倍体黄颡鱼的红细胞数、红细胞比容及红细胞渗透脆性均极显著低于二倍体(P<0.01),而血红蛋白含量、红细胞沉降率及白细胞数均极显著高于二倍体(P0.05)。
[期刊] 水产学报  [作者] 王玉生  李雅娟  于长宁  姜志强  李霞  王伟  刘博  高养春  李佳奇  
为探索诱导鱼类雄核发育单倍体的新方法及形成机制,以大鳞副泥鳅为研究对象,无须卵子失活,仅用冷休克诱导雄核发育单倍体,并对其后代的早期胚胎发育、染色体数目、分裂胚细胞学观察等进行了系统分析。早期胚胎发育结果显示,0℃与3℃处理组的孵化率分别为0.83%和57.42%,二者之间孵化率差异显著(P
[期刊] 水产学报  [作者] 蔡明夷  刘贤德  武祥伟  黄铭垚  王志勇  
参照大黄鱼雌核发育诱导程序,应用冷休克抑制大黄鱼(♀)与黄姑鱼(♂)杂交受精卵的第二极体排出,培育了两个异源三倍体家系(PPN1和PPN2)。异源三倍体家系的受精率、孵化率略低于大黄鱼自繁二倍体对照家系(PP),而初孵仔鱼畸形率略高于PP家系。倍性分析显示,异源三倍体家系初孵仔鱼细胞DNA含量约为大黄鱼自繁对照家系的初孵仔鱼细胞DNA含量的1.46倍,且三倍体率达到100%。5个微卫星标记分析结果表明,父本杂合基因在异源三倍体中分离,后代分别得到父本两个等位基因中的一个,分离比符合孟德尔式遗传预期;由于基因的第二次分离被阻断,母本基因在异源三倍体中的传递表现出半四分子的特点,其中部分个体同时保...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 尤颖哲  
为了更全面地研究双斑东方鲀三倍体诱导方法,促进双斑东方鲀产业健康发展,采用静水压法,探讨了诱导双斑东方鲀三倍体的起始时间、压强大小和处理时间长度等的最适诱导条件。实验结果表明:在水温1820℃时,授精后5 min,采用1015 Mpa的压强、57 min的处理时间的静水压诱导条件,可获得96.67%以上的三倍体诱导率,孵化率亦能达77%以上。本文首次建立了双斑东方鲀的三倍体苗种静水压诱导法,获得了高效的双斑东方鲀三倍体诱导流程,并为其他东方鲀类的生产性三倍体诱导研究提供了参考。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 孔静  王昭萍  于瑞海  刘剑  张跃环  
通过低渗方法抑制受精卵第二极体(PB2)的释放,诱导太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)三倍体。在水温为23~25℃的条件下,分别采用不同低渗海水(盐度分别为4、6、8、10、12、14、16),在不同处理时机,即第1个第一极体(PB1)出现、30%的PB1出现、40%的PB1出现、50%的PB1出现以及第1个第二极体(PB2)出现时,对太平洋牡蛎受精卵进行10 min、15 min、20 min、25 min持续处理。处理后,于正常盐度海水中孵化,收集D形幼虫,通过流式细胞仪进行倍性测定,确定最佳诱导条件。结果表明,当太平洋牡蛎受精卵PB1出现40%时,在盐度为8的低渗海水中,持...
[期刊] 水产学报  [作者] 秦艳平  张跃环  周颖力  武祥伟  彭敏  喻子牛  
以三倍体率、卵裂率、D幼率、生产成本等为指标,比较了CB、6-DMAP两种化学试剂诱导香港牡蛎三倍体的效果,研究了试剂浓度、诱导时机、诱导持续时间及受精卵密度等4种因素对香港牡蛎三倍体的诱导效应。结果显示,在温度2830°C、盐度1525,受精卵密度为2.0×108个/L条件下,采用0.5 mg/L的CB在受精后1518 min处理,诱导持续时间为20 min,可产生100%三倍体;合子的卵裂率为53.16%63.00%,D形幼虫孵化率为47.32%53.09%,诱导效率指数为0.470.53,生产成本为
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