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[期刊] 淡水渔业
[作者]
周春花 黎敏 吴小平 曾志恒
从军山湖中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)获得血清,用人A、B、AB、O型红细胞、鸡红细胞及部分细菌菌体检测了血清的凝集活力,同时进行了糖抑制、热稳定性及pH影响试验。结果显示血清能凝集人四种血型红细胞和鸡红细胞,其中对人A型红细胞凝集活力最高;能够和大肠杆菌发生凝集反应,但不能和枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌发生凝集反应;凝集条件为pH5.0~5.8、温度4~37℃;1.0%的D-葡萄糖、D-果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖均能不同程度地抑制血清与人A型红细胞的凝集作用。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘雪兰 余为一 李槿年
将中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)血清凝集素与动物(鳖、鲫鱼、鸡、鸽、兔、鼠、人A、B、O型)红细胞和细菌(八叠球菌、嗜水气单胞菌、短小芽孢杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌、假单胞菌和拟态弧菌)进行凝集反应。结果表明,中华绒螯蟹血清凝集素有明显的选择性,与小白鼠红细胞和八叠球菌的凝集活性最高(P0.05)。10 mmol/L的CaCl2和300 mmol/L的NaCl不影响凝集素与小鼠红细胞和细菌的凝集活性,600 mmol/L的NaCl可降低其活性。pH 5~9不影响蟹凝集素活性,但400 mmol/L的ED...
关键词：
中华绒螯蟹 血清凝集素 凝集价
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘雪兰 余为一 李槿年
本研究建立鼠红细胞膜吸附法纯化中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)血清凝集素的方法,并与硫酸铵盐析、凝胶过滤层析和离子交换层析等其他提取方法进行比较。实验结果表明,中华绒螯蟹血清经鼠红细胞膜吸附后,再由EDTA把结合的凝集素从膜上解离,可以获得纯化的高活性凝集素。该纯化物在PAGE中出现2个清晰的区带,一个是大分子的b带,另一个则是由3种大小相近的小分子组成的c区带;在SDS-PAGE中,则显示出3个分子量接近、约为100 000的条带。经50％饱和硫酸铵盐析或用Sephadex G200凝胶过滤层析法可浓缩但不能纯化中华绒螯蟹血清凝集素。经DEAE-Sephadex A50离子...
关键词：
中华绒螯蟹 凝集素 鼠红细胞膜吸附 纯化
[期刊] 淡水渔业
[作者]
郝珂 钱冬 刘问 潘清清
对锯缘青蟹(Scylla serrate)血清凝集素的凝集特性进行了研究。结果显示:锯缘青蟹血清凝集素对人、兔、鼠、鸽子、中华鳖、鲫红细胞均有凝集作用,其中对小鼠红细胞凝集活性最强,血凝活性可达29;凝集素活性最适pH 6.0~7.4;盐度对凝集活力有较大影响,NaC l浓度在0.4~0.5 mol/L时基本失活;未纯化血清凝集素对Ca2+、Mg2+未表现出依赖性;凝集素活性能被N-乙酰葡萄糖胺特异性抑制。对青蟹血清凝集素进行硫酸铵分级沉淀分离后,发现凝集素活性主要分布在25%饱和度硫酸铵沉淀区,该组分凝集比活比血清高27.44倍,SDS-PAGE结果表明主要蛋白带型为79 ku、75 ku、...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
姚东瑞 盘赛昆 周鸣谦 葛荣荣
采用DEAE-SepharoseFF离子交换层析和Superdex20010/300GL凝胶过滤层析技术,从泥鳅血清中分离出两种天然凝集素MSL-I和MSL-Ⅱ。SDS-PAGE检测表明,MSL-I及MSL-Ⅱ均显示两条蛋白质着色带。采用凝胶过滤法测得MSL-I相对分子质量为25000,MSL-Ⅱ相对分子质量为82000。根据凝胶过滤测定及SDS-PAGE检测结果可知,MSL-Ⅱ由相对分子质量分别为29000和13600两种亚基组成,MSL-I的亚基组成有待进一步研究。MSL-Ⅱ能结合多种糖,其中对乳糖的亲和力最强。MSL-Ⅱ具有较强的热稳定性,在pH4～11范围内具有凝集活性,最适pH为6～...
关键词：
泥鳅 血清 凝集素 分离纯化
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张黎 袁媛 王娟 顾继锐 吴江 谢显连 徐恒
从南方鲇(Silurusmeridionalis)血清分离到一种天然的凝集素分子,能够凝集多种不同的抗原物质,其组成成分为糖蛋白,具有耐热和耐酸碱性,对β-巯基乙醇敏感。凝集反应受温度、离子强度以及时间等因素的影响。经糖的专一性抑制实验显示,蔗糖和半乳糖对凝集反应有抑制作用,说明这2种糖分子是凝集素在识别和凝集过程中起一定作用的糖分子。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李思发 蔡完其 邹曙明 李晨虹 赵金良 王成辉 陈桂娟
本文对江苏省阳澄湖产中华绒螯蟹的商业品质，按商业品级和雌、雄，测定了其各部分含量和各项营养成分。该湖所产河蟹符合江南水乡青背、白肚、金爪、黄毛的大闸蟹形态特征。肌肉、肝脏及性腺三大可食部分共占体重的 ３６． ７２％，壳、鳃、胃及心脏四大非可食部分共占体重的 ５３． ２６％。另有 １０． ０２％为血淋巴和组织液。一、二级商品蟹的雌蟹可食部分各高出雄蟹 ５． ２８％和 ６． ５５％，营养成分中，雌蟹的脂肪显著高于雄蟹。在实测的９项微量元素中，雄蟹有７项高于雌蟹，雌蟹仅有磷高于雄蟹；在实测的１７种氨基酸组成中，雄蟹有１３项高于雌蟹，尤其谷氨酸、脯氨酸及丙氨酸，分别高出１６．６Ｏ，２３．３％及２８．５...
关键词：
中华绒螯蟹 营养成分 品质分析 阳澄湖
[期刊] 中国水产科学
[作者]
廖绍安 李筠 张晓华 纪伟尚 徐怀恕
用日本对虾(Penaeusjaponicus)亲虾的血清与11株弧菌和7种脊椎动物的红细胞进行凝集反应实验,其中,溶藻弧菌HW283的凝集效价最高,达4096,而产气弧菌和海蛹弧菌的凝集效价最低,仅为8;与红细胞的凝集结果显示,对虾血清与大白鼠、小白鼠、豚鼠的红细胞反应较强,与鸡、人、山羊、兔的红细胞反应较弱。表明日本对虾血清中存在自然凝集素。养成期的日本对虾经弧菌菌苗免疫后,对该致病菌株的抵抗力获得提高。病原感染组、对照组和菌苗免疫组的对虾血清分别对豚鼠、大白鼠和小白鼠红细胞的凝集强度皆为感染组>对照组>免疫组。
关键词：
日本对虾 凝集素 免疫
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
沈淑芳 朱玲 李加琦 薛素燕 李阳 陈琼琳 毛玉泽 庄志猛 方建光
通过cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of c DNA ends,RACE)技术克隆得到魁蚶(Scapharca broughtonii)C型凝集素(C-type lectin,Sb-Lec1)基因,该基因全长为700 bp,其中,5′-UTR为29 bp,3′-UTR为167 bp,开放阅读框长度为504 bp,编码167个氨基酸,包括长度为23个氨基酸的信号肽序列、129个氨基酸的糖识别结构域(CRD)以及参与二硫键形成的6个半胱氨酸。预测蛋白分子量为19.11 k Da,
[期刊] 华北农学报
[作者]
杨在君 刘玲玲 彭正松
为克隆盾叶半夏凝集素基因，并对其功能进行分析。采用ＲＡＣＥ技术从盾叶半夏中克隆得到盾叶半夏凝集素基因的全长ＣＤＮＡ序列，命名为ｐｐｌ。同时，构建了ｐｐｌ基因的原核表达载体，并成功实现了３３ ｋ ＤＡ重组蛋白在Ｅ．Ｃｏｌｉ Ｂｌ２１中的表达。纯化后的重组蛋白ｐｐｌ用于凝血和体外抗癌试验。该基因的全长ＣＤＮＡ序列为１ ５０４ Ｂｐ，其中开放性阅读框（ｏＲＦ）８１３ Ｂｐ，编码２７０个氨基酸，具有３个甘露糖结合识别位点。ｐｐｌ具有凝血活性，这种凝血活性可受甘露糖抑制。ｐｐｌ对人鼻咽癌细胞（ＣＮＥ）、人宫颈癌细胞（ＨＥｌＡ）及人乳腺癌细胞（ＢＣＡｐ－３７）的生长均具有抑制作用，其中对ＨＥｌＡ细胞的抑制．．．
关键词：
盾叶半夏 凝集素 基因克隆 功能分析
[期刊] 华北农学报
[作者]
李明想 柏素花 张玉刚 祝军 戴洪义
以苹果幼叶为试验材料,通过同源克隆和RT-PCR方法分离出B_LECTIN基因家族中的一个基因,命名为MdMBL。分析结果表明,克隆得到的MdMBL长度为1 181 bp,包括20 bp的5'非编码区、81 bp的3'非编码区和一个长度为1 080 bp编码359个氨基酸的开放阅读框,推测该蛋白质分子量为39.76 kDa,其等电点为8.72。在构建的MBL系统进化树中,MdMBL与葡萄的MBL的关系最近,其次为橹豆的MBL,与苹果的MBL2同源基因进化关系最远。相对荧光定量RT-PCR分析表明,MdMBL具有组织特异性,在茎中表达量最高,在花中表达量最低;低温胁迫促使MdMBL表达量升高,M...
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵欢
为了克隆掌叶半夏凝集素基因(Pinellia pedatisecta agglutinin,PPA),并对其进行生物信息学分析和亚细胞定位。采用PCR技术扩增掌叶半夏凝集素基因的ORF序列,构建pCAMBIA1300-35S-PPA-e GFP重组载体,导入农杆菌GV3101并在烟草中进行瞬时表达,采用激光扫描共聚焦显微镜观察其亚细胞定位。克隆获得的PPA基因全长由777个核苷酸组成,编码258个氨基酸,含有3个甘露糖结合位点和2个保守的B-lectin结构域,Gen Bank登录号为KF154981,氨
[期刊] 中国水产科学
[作者]
廖绍安 李筠 张晓华 纪伟尚 徐怀恕
日本对虾 (Penaeusjaponicus )亲虾体长 19～ 2 4 .5cm ,取其血清。 7种动物血液取自大白鼠、小白鼠、豚鼠、兔、鸡、羊、人。结果表明 :①虾血清分别在 2 8、37、5 6℃时热处理 30min ,其凝集活性不变 ,在 70℃和 80℃热处理 30min后凝集活性完全丧失。②血清在 pH为 5～ 7.5的TBS缓冲液中凝集活性稳定 ,在pH为 8～ 9之间凝集活性迅速下降。③凝集抑制实验表明半乳糖、甘露糖、L 阿拉伯糖、D 葡萄糖胺、N 乙酰 D 葡萄糖胺等 5种糖对血清凝集素都有较强的抑制作用 ,尤其D 葡萄糖胺和N 乙酰 D 葡萄糖胺的抑制作用更强。④交叉吸...
关键词：
日本对虾 血清凝集素 理化性质 凝集效价
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴超 陆承平
选取 8种常见养殖鱼 :团头鲂、二龄草鱼与 4～ 5月龄草鱼、加州鲈、银鲫、胡子鲇、鲢、鳙和黄鳝 ,采其血清 ,检测其对人和不同动物红细胞的凝集作用 ,并比较不同糖、酶、理化因素和脂溶剂等对鱼血清凝集兔红细胞的影响。试验显示 ,草鱼等 8种常见养殖鱼血清对人和不同动物的红细胞均有一定的凝集作用 ,表明均存在血清凝集素。黄鳝、二龄草鱼血清凝集效价较高 ,二龄草鱼血清凝集效价远高于 4～ 5月龄草鱼。兔红细胞经胰蛋白酶修饰后 ,不同鱼血清对其凝集效价显著升高 ;甘露糖、半乳糖和乳糖对鱼血清凝集素凝集活性有较强的抑制作用 ;EDTA、巯基乙醇与胰蛋白酶等均能导致草鱼等血清凝集素凝集活性的下降。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
蓝天一 牛东红 刘晓军 彭茂潇 李家乐
为研究缢蛏C型凝集素基因ScCTL-2的结构和功能特点,克隆了该基因的全长序列,并对其mRNA的表达模式以及重组蛋白的凝菌活性进行研究。结果显示,ScCTL-2的cDNA全长2 194 bp,共编码630个氨基酸,其氨基酸序列拥有4个C型凝集素糖识别结构域和1个N端跨膜区,这一特殊的序列结构不同于任何一种已知的C型凝集素。基因mRNA在健康缢蛏肝胰腺中的表达量显著高于其他组织,在鳃中的表达量次之,而在其余组织中的表达量没有显著性差异;金黄色葡萄球菌与鳗弧菌感染能够显著上调ScCTL-2在缢蛏血细胞中的表达。ScCTL-2的重组蛋白凝菌实验显示:在Ca~(2+)存在的情况下,rScCTL-2能够对实验所采用的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、藤黄微球菌和酿酒酵母均产生明显的凝集反应;当溶液中不存在Ca~(2+)时,凝集反应几乎不能发生,意味着rScCTL-2的凝菌活性是严格Ca~(2+)依赖的。研究表明,ScCTL-2可能是一种新的无脊椎动物C型凝集素类型,它具有无脊椎动物C型凝集素普遍具备的免疫活性,可能在缢蛏的免疫中具有重要作用。
关键词：
缢蛏 C型凝集素 凝菌
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