【目的】研究内生菌（Bacillus velezensis BHZ-29、Bacillus atrophaeus SHZ-24）和根际细菌（Bacillus subtilis SHT-15、Bacillus vanillea SMT-24）在灭菌土与非灭菌土中对棉花的促生作用及诱导抗病效果。【方法】以棉花植株为试材，通过测量内生菌和根际细菌处理后第50天棉花的株高、根长、根毛数、叶片数，分析内生菌及根际细菌对棉花的促生作用；同时测定第50天棉花叶片过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性及丙二醛（MDA）含量和木质素含量，探究内生菌和根际细菌处理对棉花诱导抗性作用。【结果】接种内生菌及根际细菌后，均能提高灭菌土与非灭菌土棉花株高、根长、增加根毛数和叶片数。在灭菌土中，SHZ-24处理组株高最高为24.78 cm，是对照组的1.21倍，SHT-15处理组根长最长，是对照组的1.14倍，根毛数和叶片数最多，分别是对照组的1.71和1.18倍；在非灭菌土中，SMT-24处理组株高最高为24.33 cm，是对照组的1.11倍，叶片数最多，是对照组的1.18倍，SHT-15处理组根长最长，根毛数最多，分别是对照组的1.07和1.78倍；此外，在灭菌土中，棉花叶片中的CAT、POD、PPO、SOD、PAL活性和木质素含量均有不同程度提高，丙二醛含量下降。【结论】在灭菌土与非灭菌土中，内生菌及根际细菌对棉株具有明显促生作用，能诱导棉花体内防御酶活性的表达，降低丙二醛含量，增强棉株抗病能力。

从棉花根际中分离到的大量细菌，经多次盆栽和田间试验，筛选到６株对棉花具有防病促长作用的菌株，编号为ＣＳ８５、ＺＲ、ＰＦ２、ＺＳ１、１８和Ｓ１４。根据它们的形态和培养特征以及生理生化特性等的鉴定结果，将６株菌分别归属为荧光假单胞杆菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓＣＳ８５）、恶臭假单胞杆菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐｕｔｉｄａＺＲ）、假单胞杆菌ＰＦ２（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．ＰＦ２）、野油菜黄单胞菌（ＸａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＺＳ１）、枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ１８）和腊状芽孢杆菌（ＢａｃｉｌｕｓｃｅｒｅｕｓＳ１４）。

棉花根际促生菌的分离和筛选王春霞，王道本，周启（华中农业大学植保系，武汉４３００７０）（华中农业大学微生物学系，武汉４３００７０）关键词棉花，根际促生菌，菌株，生防ＩＳＯＬＡＴＩＯＮＡＮＤＳＥＬＥＣＴＩＯＮＯＦＴＨＥＰＬＡＮＴＧＲＯＷＴＨＰＲＯＭＯＴ...

【目的】棉花枯萎病(Fusarium wilt)是棉花种植中较为严重的土传病害之一,主要采用化学方法进行防治,但对环境和人畜安全造成一定影响。生物防治因其专一性强、安全性高的特点,成为防治棉花枯萎病的重要途径。本研究旨在获得一株高效拮抗细菌,并明确其防治机理,为棉花枯萎病生物防治提供技术支持。【方法】前期获得一株能够破坏β-1,4糖苷键的棉花内生蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)YUPP-10,通过平板对峙培养、共培养法和悬滴法分别测试其对棉花枯萎病菌(尖镰孢,Fusarium oxysporum)菌丝生长、产孢和孢子萌发的影响;利用YUPP-10菌液浸种处理,研究其对棉花生物量的影响;以尖镰孢菌土为基质种植棉花,生长1周后,用LB液体培养基培养的YUPP-10制成不同浓度(分别为1×10~8、1×10~7和1×10~6 cfu/mL)的生防菌剂灌根处理棉苗,于温室中进行棉花枯萎病的防治效果研究;通过Fosmid文库筛选到了YUPP-10关键抑菌物质为环糊精糖基转移酶(CGTase,EC 2.4.1.19),研究其对尖镰孢菌丝生长、产孢和孢子萌发的影响;利用拟南芥花序侵染法将其转化拟南芥,获得能够稳定表达CGTase的转基因株系,研究转基因拟南芥对枯萎病的抗性,以及在病原胁迫下部分防御基因的转录。【结果】YUPP-10菌株发酵液对尖镰孢菌丝生长、产孢和孢子萌发具有显著的抑制作用,随着发酵液浓度的升高,对尖镰孢产孢量和孢子萌发的抑制率越高,最高抑制率分别为98.41%和51.65%。低浓度的YUPP-10菌液能促进棉花种子发芽、出苗和地上部分的生长。YUPP-10发酵液灌根处理后,棉苗的病情指数和病株率显著降低,其中,1×10~7 cfu/mL的YUPP-10发酵液对棉花枯萎病的防治效果最高,达到45.11%。YUPP-10菌株的关键抑菌物质CGTase能够水解羧甲基纤维素和葡甘聚糖,表明其具有破坏β-1,4糖苷键的能力,进而检测了其对尖镰孢的抑制效果,结果表明CGTase对尖镰孢的菌丝生长、产孢和孢子萌发具有显著的抑制作用,对产孢和孢子萌发的最高抑制率分别达到62.63%和30.83%。转CGTase的拟南芥提高了对枯萎病的抗性,过表达CGTase的拟南芥在病原胁迫下部分防御基因的转录水平升高。【结论】蜡状芽孢杆菌YUPP-10菌株能抑制尖镰孢的生长、促进棉花部分生物量指标的增长并控制枯萎病的危害,CGTase能够抑制尖镰孢的生长,转CGTase拟南芥对枯萎病的抗性增强。

1996～1998年间自棉花根际土壤中分离到了一株植物根际促生菌(PGPR)拮抗菌XX-3,经过多点小区试验,结果显示,XX-3不仅具有很强的抗病效果,而且具有明显的促生作用。当每株接种量为5×10~8 cfu时,增产可达9.5％～26.5％,抗病效果可达50％以上。

【目的】探索杀菌剂和化肥对生防菌防病、促生作用的影响，为综合利用生防菌防治植物病害、促进植物生长提供依据。【方法】利用平板对峙法，测定生防菌Ｓｃ１１、１５３和Ｆｏ４７对尖镰孢萎蔫专化型的皿内拮抗作用及其发酵液的抑菌作用，通过盆栽试验测定生防菌与杀菌剂、化肥结合对棉花枯萎病的防治效果及对棉株的促生作用。【结果】放线菌Ｓｃ１１和１５３的发酵液对尖镰孢萎蔫专化型皿内抑制作用显著，抑制率分别为６７．５％和５５．０％；盆栽试验结果表明，生防菌与杀菌剂、化肥结合对棉花枯萎病的防效高于单因素处理，菌株Ｓｃ１１和菌株Ｆｏ４７分别与多菌灵溶液结合对棉花枯萎病的防治效果最佳，抑制率为６４．９９％和５７．１０％。【．．．

【目的】棉花黄萎病(Verticillium wilt)是世界性难以防治的病害,筛选有效的生防微生物资源成为解决棉花黄萎病的重要途径之一,本研究旨在分离一株高效拮抗细菌,并明确其防治机理,为生物防治棉花黄萎病提供技术支持。【方法】用葡甘聚糖作为碳源筛选一株能够降解β-1,4糖苷键的棉花内生细菌YUPP-10,通过平板对峙培养、平板对扣培养和悬滴法等测定YUPP-10对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)菌丝生长和孢子萌发的抑制效果;用YUPP-10无菌滤液培养大丽轮枝菌微菌核,检测其对微

【目的】研究花铃期棉花黄萎病抗/感品种土壤细菌群落结构,了解抗/感品种土壤细菌群落结构与土壤理化性质之间的关系,为棉花黄萎病的监测与绿色生态防控打下理论基础。【方法】通过田间小区试验,以感病品种(鄂荆1号,EJ)和抗病品种(冀863,J863)为试验材料,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和高通量测序(Illumina MiSeq)技术分别测定花铃期不同阶段(盛花期、开花后期和结铃期)土壤中大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)数量和土壤细菌群落结构,结合冗余分析(RDA)明确细菌群落结构与土壤理化性质的相关性。【结果】棉花黄萎病的发生与土壤中大丽轮枝菌ITS基因拷贝数量存在不同程度的相关性,其中感病品种EJ的发病率和病情指数与土壤中病原菌数量呈正相关,而抗病品种J863的发病率和病情指数与病原菌数量相关性不大。除盛花期外,棉花开花后期和结铃期抗病品种J863土壤中的病原菌数量低于感病品种EJ。高通量测序分析表明,除开花后期,抗病品种J863在盛花期和结铃期的细菌丰富度Chao1和ACE指数均高于感病品种EJ。主成分分析表明,抗/感品种之间及其在花铃期不同阶段的土壤细菌群落结构存在差异。群落组成方面,在门水平上,感病品种EJ的部分优势菌群平均相对丰度低于抗病品种J863,如放线菌门(Actinobacteria)、芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)、绿弯菌门(Chloroflexi)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、硝化螺菌门(Nitrospirae)、Patescibacteria和装甲菌门(Armatimonadetes),降低幅度分别为16.38%、4.05%、2.25%、6.58%、7.10%、20.60%和35.78%;在属水平上,感病品种EJ的部分优势菌群平均相对丰度低于抗病品种J863,包括鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、芽单胞菌属(Gemmatimonas)、 Bryobacter、 Iamia、 Pseudarthrobacter、芽球菌属(Blastococcus)、红色杆菌属(Rubrobacter)、类诺卡氏属(Nocardioides)、Pontibacter、链霉菌属(Streptomyces)、Gemmatirosa、微单孢菌属(Micromonospora)和Solirubrobacter,下降幅度分别为5.09%、19.41%、13.79%、2.36%、10.78%、34.47%、46.76%、61.84%、52.75%、48.61%、74.79%、9.13%和26.42%。冗余分析(RDA)表明,土壤细菌群落结构受硝态氮(NO_3~--N)、速效磷(AP)、铵态氮(NH_4~+-N)、无机磷(IP)、pH和有机质(OM)指标影响。【结论】土壤中大丽轮枝菌的数量与棉花抗/感品种黄萎病发生的相关性存在差异,感病品种黄萎病的发生程度与土壤中病原菌数量呈正相关。抗病品种在盛花期、开花后期和结铃期土壤的细菌群落结构优于感病品种,并且不同生育时期的优势菌群存在一定程度的差异。土壤中细菌多样性、相对丰度和组成受有机质、pH、氮素类型、速效磷等指标影响。同时,棉花不同生育时期对土壤中细菌群落结构有明显影响。

为棉花立枯病生物防治提供新的生防细菌菌株,从采集的48份新疆棉苗根际土样中经分离、纯化获得优势细菌菌株189个,采用平板对峙培养法对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)进行根际拮抗细菌的筛选,并对部分抑菌活性强菌株的抑菌作用进行研究。结果表明,共获得根际拮抗细菌菌株67株;其中菌株MX-1抑菌谱广,抑菌活性强,具有几丁质酶活,其盆栽试验防治效果达59.8%;饱和度70%硫酸铵获得的抑菌物质热稳定性较好,抑菌活性最高,能够引起立枯丝核菌菌丝发生畸变,出现囊泡、甚而裂解。由此可知,菌株MX-1是一株具有良好应用潜力的防治棉花立枯病的生防菌。

从湖南、云南、海南等地采集的健康黄瓜植株中分离得到189株内生细菌，从中筛选的内生细菌Y–10对黄瓜叶斑病病原菌菊苣假单胞菌(Pseudonwnas cichorii)的抑菌半径达16 mm，拮抗效果最好。经形态学、生理生化特性及16S rDNA和rpoA双基因联合建树分析，被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus substilis)。将Y–10菌液梯度稀释至浓度分别为4×10~(9)、4×10~(8)、4×10~(7)、2×10~(7)、4×10~(6)、4×10~(5 )cfu/mL，分别用4×10~(9)、4×10~(8)、4×10~(7)、4×10~(6)、4×10~(5 )cfu/mL 等5个浓度的菌液浸种黄瓜种子；分别用4×10~(9)、4×10~(8)、4×10~(7)、2×10~(7)、4×10~(6 )cfu/mL 等5个浓度的菌液灌根处理黄瓜盆栽幼苗，以无菌水浸种和灌根处作为空白对照，结果显示，一定浓度Y–10菌液浸种处理，对黄瓜种子萌发和幼苗生长均有促进作用，4×10~(7 )cfu/mL处理的种子发芽率较空白对照提高了6.01% ，菌液浓4×10~(9 )cfu/mL的处理，种子几乎不萌发；黄瓜幼苗的根长、根鲜质量、地上部鲜质量、地上部干质量分别提高了40.71%、33.59%、35.21%、58.18% 。4×10~(9 )cfu/mL菌液灌根接种后，黄瓜幼苗根长、根鲜质量、地上部鲜质量和地上部干质量分别较空白对照提高了11.49%、19.57%、77.25%、47.15%。Y–10菌株无溶磷、解钾及产IAA作用，但具固氮、产铁载体的作用。

从湖南、云南、海南等地采集的健康黄瓜植株中分离得到189株内生细菌，从中筛选的内生细菌Y–10对黄瓜叶斑病病原菌菊苣假单胞菌(Pseudonwnas cichorii)的抑菌半径达16 mm，拮抗效果最好。经形态学、生理生化特性及16S rDNA和rpoA双基因联合建树分析，被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus substilis)。将Y–10菌液梯度稀释至浓度分别为4×10~(9)、4×10~(8)、4×10~(7)、2×10~(7)、4×10~(6)、4×10~(5 )cfu/mL，分别用4×10~(9)、4×10~(8)、4×10~(7)、4×10~(6)、4×10~(5 )cfu/mL 等5个浓度的菌液浸种黄瓜种子；分别用4×10~(9)、4×10~(8)、4×10~(7)、2×10~(7)、4×10~(6 )cfu/mL 等5个浓度的菌液灌根处理黄瓜盆栽幼苗，以无菌水浸种和灌根处作为空白对照，结果显示，一定浓度Y–10菌液浸种处理，对黄瓜种子萌发和幼苗生长均有促进作用，4×10~(7 )cfu/mL处理的种子发芽率较空白对照提高了6.01% ，菌液浓4×10~(9 )cfu/mL的处理，种子几乎不萌发；黄瓜幼苗的根长、根鲜质量、地上部鲜质量、地上部干质量分别提高了40.71%、33.59%、35.21%、58.18% 。4×10~(9 )cfu/mL菌液灌根接种后，黄瓜幼苗根长、根鲜质量、地上部鲜质量和地上部干质量分别较空白对照提高了11.49%、19.57%、77.25%、47.15%。Y–10菌株无溶磷、解钾及产IAA作用，但具固氮、产铁载体的作用。

【目的】探索供试生防放线菌Act1、Act8和Act11与生防真菌C、D、M1和M2混合接种对辣椒根系生长、生防菌定殖能力及辣椒叶片和根系诱导抗性的影响。【方法】采用皿内拮抗试验确定适宜的生防真菌与生防放线菌组合,以甜椒和线椒幼苗为供试材料,蘸根接种处理后,于30和31 d时测定生防菌在辣椒根部的定殖量及辣椒叶片和根系的多酚氧化酶(PPO)活性,研究不同接种处理对生防菌在辣椒根部定殖能力及辣椒叶片和根系PPO活性的影响。【结果】(1)4株生防真菌与3株拮抗性生防放线菌形成的12个组合中有7个组合混接菌种之间无相互拮抗作用。(2)生防菌混合接种时甜椒叶片PPO活性的增率大于生防菌单独接种,混和接...

【目的】从26株供试拮抗放线菌中筛选对马铃薯土传病病原真菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、茄病镰刀菌(Fusarium solani)及硫色镰刀菌(Fusarium sulphureum)有较强拮抗性的高效生防放线菌菌株。【方法】采用皿内琼脂块法和发酵液抑菌试验筛选生防放线菌菌株;采用搭片法研究6株强拮抗放线菌对病原菌菌丝的溶解作用;放线菌发酵液浸种方法研究9株强拮抗放线菌发酵液的促生作用。【结果】①供试26株拮抗放线菌中,拮抗茄病镰刀菌(Fusarium solani)、硫色镰刀菌(Fusarium sulphureum)和立枯丝核菌(Rhizoctonia solani...

本研究以河北省沧州黄骅市紫花苜蓿(Medicago sativa)为研究对象,对采自黄骅地区常郭乡赵子札村、羊二庄镇张八寨村及旧城镇云庄村等10个地点的紫花苜蓿根际土壤进行细菌分离纯化和培养,获得134株根际细菌。进而将其接种到紫花苜蓿植物种苗,培养60d后,比较分析了接种不同根际促生菌对植物生长的促生影响,选择了30株促生细菌优良菌株,并且对30株细菌菌株进行了溶磷能力和分泌生长素能力的测定。结果表明,菌株EF2对植物干重增重影响最为显著(P<0.05),其溶解有机磷和无机磷能力也最强;菌株LF13分泌

【目的】探究沙地云杉Pieca mongolica内生拮抗菌对沙地云杉立枯病菌Fusarium sp.的拮抗作用，旨在为利用生物资源、开发生防菌提供依据。【方法】以前期筛选出的4株具有强拮抗作用的沙地云杉内生真菌互隔链格孢菌Alternaria alternata(SDYS36)、三线镰刀菌Fusarium tricinctum(SDYS63)、产黄青霉菌Penicillium chrysogenum (SDYS95)、聚多曲霉菌Aspergillus sydowii (SDYS180)为试验材料，沙地云杉立枯病菌为靶标菌，采用体外对峙和盆栽试验，5组重复，测定内生真菌对病原菌的体外拮抗性及感病幼苗的形态和相关生理指标变化，通过显著性分析筛选优势拮抗菌株。【结果】4株内生拮抗菌对立枯病菌均表现出体外拮抗活性，SDYS180的发酵液拮抗活性最高，达78.67%;SDYS95的菌株拮抗活性最高，达69.64%;SDYS63的挥发性代谢产物拮抗活性最高，达16.94%。4株内生拮抗菌对盆栽沙地云杉立枯病菌均表现出不同程度的拮抗活性，接种SDYS180促进染病幼苗的组织生长，株高、地径和根长分别提高17.12%、32.64%和16.56%；接种SDYS95的染病幼苗可溶性蛋白质质量分数提高13.41%，丙二醛质量摩尔浓度降低5.27%，过氧化物酶活性提高224.46%，超氧化物歧化酶活性提高37.05%，过氧化氢酶活性提高9.02%。【结论】菌株SDYS180和SDYS95是筛选出的防治沙地云杉立枯病的优势拮抗生防菌。图8表1参23