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[期刊] 西南农业学报
[作者]
陈泽斌 黄丽 王海燕 李健文 王如兰 徐胜光 夏振远
植物寄生线虫是危害植物的重要病原物,为了筛选到能在烟草体内稳定定殖并且对线虫具有明显杀线虫活性的烟草内生生防细菌,从127株烟草内生细菌中筛选出5株对全齿复活线虫(Panagrellus redivivus)具有明显杀线虫活性的细菌。这5株细菌的发酵液稀释5倍处理线虫12 h后,线虫的死亡率均达90%以上;24 h后,死亡线虫虫体发生消解或渗漏。5株杀线虫细菌发酵液的杀线虫活性在12 h内随处理时间的延长而升高,随着稀释倍数的增加而降低。通过16S r DNA序列同源性分析将这5株杀线虫细菌中的4株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),其余1株鉴定为苏云...
关键词：
内生细菌 线虫 筛选 鉴定
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
周向平 肖启明 罗宽 巢进 田慧
为寻找防治烟草黑胫病新途径,2001至2003年,从湖南永州和宁乡等地烟草黑胫病发病严重的田块采集健株,共分离到内生细菌株120株,经测定,8株内生细菌菌株在室内有较强的拮抗作用,这8株内生细菌与烟草黑胫病菌共培结果显示,55y,NN-3,YN-4和YN-10对烟草黑胫病菌抑菌效果均在66%以上.根据内生细菌形态特征和生理生化性状,初步鉴定内生细菌55y为假单胞杆菌属铜绿假单胞菌,NN-3为芽孢杆菌属枯草芽孢杆菌,YN-4,YN-10为芽孢杆菌属凝结芽孢杆菌,且这4菌株均为烟草内生细菌.
关键词：
烟草黑胫病菌 内生细菌 拮抗 定殖 鉴定
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
周鑫钰 朱宏建 周倩 任佐华 吴凌婧 刘二明
为了筛选具有生防价值的拮抗烟草青枯雷尔氏菌的内生细菌,从湖南长沙、永州、郴州烟草青枯病发病区的健康烟株采集茎秆,采用稀释平板分离法获得150个内生菌株。抑菌结果表明,21个内生菌株对烟草青枯雷尔氏菌2316菌株有拮抗效果,占总菌株数的14.0%。拮抗菌株中,F1菌株24 h对烟草青枯雷尔氏菌株2316抑菌圈直径达6.5 mm,其抗菌谱研究表明,该菌株对辣椒白绢病菌等5种植物病原真菌和柑橘溃疡病菌等5种病原细菌的生长均有抑制作用。采用形态学、生理生化鉴定及16S rDNA序列系统发育分析,F1菌株为莫哈韦芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)。
关键词：
烟草 青枯雷尔氏菌 内生细菌 分离 鉴定
[期刊] 西南农业学报
[作者]
奚家勤 林碧莲 莫明和 薛超群 王广山 郭建华 方敦煌
烟草内生菌种类丰富,其在烟草病害生物防治中的作用近年来日益受到关注。本文从烤烟品种K326叶片中分离的内生细菌ZY-9-13菌株对供试的6种植物病原真菌均有拮抗作用,表现出对真菌病原菌的广谱抗菌活性。菌株ZY-9-13发酵液对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cuben)、腐皮镰孢菌(F.solani)、黄瓜枯萎病菌(F.omysporum f.sp.cucumerinum)、小麦赤霉病菌(Gibberella sanbinetti)和立枯丝核病菌(Rhizoctonia ...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
苏丹 林智慧 王雪仁 封磊 宋萍 韩晓刚 李航 游凯 刘洁 黄楠
为了解决烟草上部烟叶中烟碱含量偏高的行业问题以及应对烟碱污染的环境治理,从福建三明烟区的烟草植株中筛选得到1株具有高效降烟碱特性的内生菌Y5,对其生长、降烟碱特性以及代谢途径进行研究。结果表明:该菌株能够以烟碱为唯一碳源、氮源。经菌株形态和16S rDNA序列分析,菌株属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。利用Slogistic模型对菌株生长情况拟合得到菌株Y5的生长延迟期为7.5h,最大比生长速率μ_(max)为0.0396 h~(-1)。烟碱浓度为0.5～2.0g·L~(-1)时菌株生长良好;pH为5.0～8.0时菌株具有较高的降解活性;接种量对菌株最终的降解率无显著影响。该菌株在烟碱浓度为0.5g·L~(-1)的无机盐培养基中,15 h内能够基本完全降解烟碱。菌株Y5降解烟碱的中间产物主要为尼古提林、脱甲基尼古丁、可铁宁、3-丙酰基吡啶和5-pyridin-3-yloxolan-2-one等物质,与已报道的假单胞菌属的吡咯烷途径不同。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
贾孟媛 王越洋 唐培培 周权 吴俊林 王小东 孙会忠
从毒鹅膏菌(Amanita phalloides)栖生土壤中分离筛选烟草疫霉(Phytophthora parasitica var. nicotianae)拮抗菌株，通过盆栽试验考察拮抗菌株对烟草黑胫病的防效。结果表明：从毒鹅膏菌栖生土壤中分离筛选的DE4–5菌株对烟草疫霉的抑菌率达78.22%;DE4–5具有广谱抗真菌活性；依据DE4–5的形态和生化特征初步判断为假单胞菌属(Pseudomonas)，结合16S rDNA保守序列及辅助gyrA基因片段序列分析，确定DE4–5为亚麻假单胞菌，定名为Pseudomonas lini DE4–5；生物活性测定显示，菌株DE4–5具有解磷和解钾能力，产IAA、蛋白酶、纤维素酶和脲酶；盆栽试验结果表明，菌株DE4–5预防组与治疗组的烟草黑胫病发病率分别为24.79%和39.24%，病情指数分别为26.31%和29.37%，防效分别达到69.14%和63.98%。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
贾孟媛 王越洋 唐培培 周权 吴俊林 王小东 孙会忠
从毒鹅膏菌(Amanita phalloides)栖生土壤中分离筛选烟草疫霉(Phytophthora parasitica var. nicotianae)拮抗菌株，通过盆栽试验考察拮抗菌株对烟草黑胫病的防效。结果表明：从毒鹅膏菌栖生土壤中分离筛选的DE4–5菌株对烟草疫霉的抑菌率达78.22%;DE4–5具有广谱抗真菌活性；依据DE4–5的形态和生化特征初步判断为假单胞菌属(Pseudomonas)，结合16S rDNA保守序列及辅助gyrA基因片段序列分析，确定DE4–5为亚麻假单胞菌，定名为Pseudomonas lini DE4–5；生物活性测定显示，菌株DE4–5具有解磷和解钾能力，产IAA、蛋白酶、纤维素酶和脲酶；盆栽试验结果表明，菌株DE4–5预防组与治疗组的烟草黑胫病发病率分别为24.79%和39.24%，病情指数分别为26.31%和29.37%，防效分别达到69.14%和63.98%。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李正风 朱杰 唐丽 董高峰 吴涛 廖头根 张伟 夏玉珍 王奕权 李岩
【目的】分离获取产纤维素酶高效菌株,并对其进行系统分类鉴定。【方法】以羧甲基纤维钠为唯一碳源,从烟草秸秆自然发酵腐熟物中选择性分离了51株产纤维素酶细菌及放线菌。通过刚果红染色初筛筛选到产纤维素酶活力较高的9株菌,根据菌株的16S rRNA基因序列确定了这些菌的系统发育地位。【结果】基于纤维素酶活力测定的复筛选定了高效菌株Luteibacter sp. L43。单因素试验确定了pH、碳源浓度、氮源浓度对L43发酵液中滤纸酶活、外切酶酶活、内切酶酶活的影响,并优化了发酵条件,即在pH为6、羧甲基纤维素钠浓度为12.5 g/L、NaNO_3浓度为5 g/L的羧甲基纤维素钠培养基中滤纸酶活达16.9 U/mL,外切酶酶活达39.62 U/mL。【结论】本研究为烟草秸秆腐熟提供了优良产纤维素酶菌株资源,为Luteibacter sp. L43的开发利用奠定了基础。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
韩凤英 谢荔岩 连玲丽 林奇英
从福建霞浦海域分离、筛选到6株对烟草花叶病毒(TMV)具有体外钝化活性的菌株,其中,菌株9和10的抑制率较高,分别达95.26%和92.18%.进一步测定2株菌对TMV的抑制增殖活性,结果表明,菌株9和10可明显抑制TMV的增殖,其抑制率分别为36.29%和35.08%.通过对2株菌的形态特征、生理生化反应及16S rDNA序列的分析,将菌株9鉴定为蜡样芽孢杆菌,菌株10鉴定为水生海洋芽孢杆菌.
关键词：
海洋细菌 抗烟草花叶病毒活性 分离鉴定
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
易晓华 朱明旗 冯俊涛 李琰 张兴
【目的】明确1株具抑菌活性的除虫菊内生真菌(编号为Y2)的种属分类地位。【方法】将在PDA培养基上培养7 d的Y2菌株,转接于PDA、PSA、Czapek(CA)、DYPA、WA、CLA、PA、VBC、CMA等9种培养基培养,并结合25℃间歇光照培养、变温培养、紫外线照射与黑暗交替培养等方法诱导产孢,进行形态学初步鉴定;采用分子生物学方法对Y2菌株rDNA的ITS基因(ITS-5.8 S rDNA)进行PCR扩增、测序,利用相关软件对PCR产物序列进行分析。【结果】该菌株在CLA、PA和VBC 3种培养基上产生了大型分生孢子堆,大型分生孢子着生在分生孢子梗顶端,呈镰刀形,微弯曲,具5~7个横隔...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
陈泽斌 夏振远 雷丽萍 黄鹤平 张永福 莫丽玲 靳松
采用研磨组织稀释分离法分离烟草植株中的内生细菌,对云南省不同品种、不同种植地区、不同组织器官、不同生长期的烟草内生细菌的菌群密度进行研究。结果表明,烟株的根、茎、叶中均存在大量的内生细菌,烟草内生细菌的分布存在品种差异、生长期差异、组织部位差异。有的内生细菌为常住菌群,有的为暂居菌群。在整个生育期中,以成熟期的内生细菌的数量最多。内生细菌的数量在云烟85、KRK26、K326、红花大金元植株不同器官中的分布规律依次为:根>叶>茎,叶>根>茎,叶>根>茎,根>叶>茎。4个品种烟草生长期总带菌量平均值波动幅度为2.6~4.96 log cfu/g.fw。种植在不同地区的同一烟草品种,内生细菌数量不...
关键词：
烟草 内生细菌 菌群密度 分布特征
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈泽斌 夏振远 雷丽萍 刘飞 陈海如 钟永丽
为了解烟草根部内生细菌多样性,采用改进的CTAB法提取烟草根部总DNA,利用细菌16 S rDNA基因通用引物对烟草根总DNA进行16 S rDNA扩增,构建烟草根部内生细菌16 S rDNA克隆文库;挑取具有不同酶切谱型的克隆进行测序、比对并构建16 S rDNA基因系统发育树。构建的烟草根部内生细菌16 S rDNA克隆文库中,155个克隆分属于36个不同的分类单元,Blast结果表明,大部分克隆与已知细菌的16 S rDNA序列相似性较高,分别属于变形菌门(Proteobacteria)的Alpha、Gamma、Beta亚群,放线菌门(Actinobacteria),拟杆菌门(Bacte...
关键词：
非培养方法 内生细菌 烟草 微生物多样性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
陈泽斌 黄丽 夏振远 赵兴能 徐胜光 林丽 任禛 靳松 王墨浪
为了研究云南不同地区烟草内生细菌的多样性及分布特征。在全省4个不同区域采集相同烟草品种33个样品,通过分离培养烟草内生细菌、16S r DNA序列分析获得不同烟区烟草内生细菌的多样性特征。从不同地区烟草叶片中共分离得到内生细菌372株,分别归属于11个属。以Bacillus属为优势菌群,已鉴定出7个种,包括B.pumilus,B.amyloliquefaciens,B.cereus,B.subtilis,B.flexus,B.simplex,B.megaterium;B.pumilus和Pantoea agglomerans类群细菌是4个地区共同的优势菌群;香农多样性指数由大到小依次为文山、大...
关键词：
烟草 内生细菌 多样性 分布特征
[期刊] 西南农业学报
[作者]
夏体渊 陈泽斌 靳松 赵凤 王定康 郭丽红 徐胜光
【目的】为了对施用生物炭后的烟叶细菌的种类变化进行全面而准确的调查。【方法】以烟叶为研究对象,设置4个处理:处1理为施用生物炭50 g/株(Y4.1);处理2为施用生物炭100 g/株(Y5.1);处理3为施生物炭150 g/株(Y6.1)和处理4不施用生物炭作为对照(Y1.1)。应用Illumina测序平台的Mi Seq高通量测序仪对施用生物炭后烟叶内生细菌的16S r DNA-V4区扩增子进行测序。并应用Qiime和Mothur等软件整理和统计样品序列数目和操作分类单元(OTUs)数量,分析物种的丰度
关键词：
烟草 内生细菌 生物炭 测序 多样性
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
曹锋 杨玲 龚姝榕 张林 牛秋红
采用１６Ｓ ｒｒＮＡ基因文库和ｉｌｌｕｍｉＮＡ ｍｉＳｅｑ技术测序对松材线虫内生细菌群落的宏基因组进行初步分析，文库显示优势菌群为黄单胞菌科（２２．４１％）、鞘脂杆菌科（１７．６６％）、丛毛单胞菌科（１４．７１％）、根瘤菌科（１０．１７％）。采用稀释平板法，从松材线虫体内分离出５株内生细菌。利用形态学、生理学及１６Ｓ ｒｒＮＡ序列特征等对这些内生细菌进行了分类鉴定。研究发现这些内生细菌在体外均显示较强的杀线虫活性，其中克雷伯氏菌属Ｓｃｔ５的杀虫活性最大，作用４ ｄ松材线虫的死亡率即可达到１００％。该细菌产生毒性蛋白酶并在体外快速形成生物膜。进一步研究发现，该内生细菌与杀线虫芽孢杆菌Ｂ１６之间具．．．
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