研究了兔肌球蛋白的质量浓度、pH值、离子强度、温度、金属离子对兔腰大肌 (pasoasmajor ,简称PM )和半膜肌 (semimembranosusproprius,简称SMp)肌球蛋白溶液的浊度和溶解度的影响。结果表明 ,肌球蛋白浓度与浊度呈正线性相关 (R2 =0 97)。PM和SMp肌球蛋白在离子强度为 0 6的KCl溶液中 pH值为 5 5时浊度最大 ,溶解度在 pH值大于 5 0时显著上升。离子强度下降时 ,肌球蛋白溶液的浊度上升 ,而溶解度下降。在相同浓度下 ,温度升高 ,肌球蛋白溶液浊度上升 ,PM肌球蛋白在 5 5℃ ,SMp肌球蛋白在 6 0℃时 ,其浊度达到最...

本实验以南苑植物油厂本经加热的生豆粕为原料，用高压蒸锅在108℃，0．294kg·cm(-2)压力下处理0，12，20min，以及在121℃，0．882kg·cm(-2)压力下处理5，20，40，60min和原样品共得到八种不同加热程度的豆粕，进行脲酶活性（PH增值法、ISO法）、蛋白溶解度（PS）、考马斯亮蓝值、DBL（可利用赖氨酸）测定，并进行了各个指标的相关性研究。结果表明，各指标均随加热时间的延长和加热温度的升高而逐渐下降，但下降的幅度各不相同，其中蛋白溶解度与加热时间的关系最为显著。且各指标间存在很强的相关，其回归系数都在0．90以上。用定氮法测定的蛋白溶解度和比色法测定的考马斯亮蓝...

IGFN1基因可在骨骼肌中特异性表达,并呈现出免疫球蛋白Ⅰ和纤维连接蛋白Ⅲ组合的肌小节蛋白的结构域特征。其作用主要是参与蛋白翻译、肌细胞分化、骨骼肌收缩和细胞骨架稳定等。本研究主要对IGFN1基因的结构特点、在动物体内的基因表达调控、参与的信号转导途径,以及动物氧化应激反应与IGFN1表达之间的关系等方面的相关研究进展进行综述,以期为骨骼肌纤维类型转换相关机制的研究提供资料,也为氧化应激条件下修复肌肉损伤及改善猪肉品质的深入研究提供新思路。

采用Sephacryl S-400凝胶过滤柱层析和电洗脱等纯化方法,首次从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化到伴肌动蛋白,并制备了特异性多克隆抗体。多克隆抗体经Protein A-Sepharose亲和层析柱纯化得到高纯度免疫球蛋白G(IgG)。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫斑点印迹(Dot-Blot)和免疫印迹(Western-Blot)等方法对纯化的伴肌动蛋白及其多克隆抗体进行分析鉴定,并研究了不同贮藏条件下伴肌动蛋白的变化情况。SDS-PAGE结果显示本研究从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化了高纯度伴肌动蛋白;Dot-Blot检测结果显示兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体效价为5×104;Wes...

骨骼肌组成特征是鱼类肉质性状评价的重要基础。为全面了解鳜(Siniperca chuatsi)肉质性状的组成特征,通过制作骨骼肌石蜡切片,比较了鳜快肌和慢肌两种类型骨骼肌的组织学特征,快肌和慢肌在肌纤维细胞直径、形态上存在差异。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析了鳜快肌和慢肌的蛋白质组成特征,它们在50～60 ku和10～15 ku大小的条带中存在差异。克隆了鳜快肌和慢肌肌球蛋白重链(MHC)S1结构域的序列,快肌和慢肌S1结构域cDNA序列长度分别为2 523 bp、2 520 bp,编码841、840个氨基酸,氨基酸序列的相似度为87.6%,以两个loop区的差异最大。...

【目的】研究内蒙古绒山羊背最长肌、臂三头肌和臀肌的蛋白差异表达谱。【方法】以３只在相同背景下饲养的绒山羊成年母羊为研究对象，屠宰后取背最长肌、臂三头肌和臀肌３个部位骨骼肌，采用差异双向电泳方法建立蛋白质谱，找出１７个差异表达蛋白点，并进行质谱分析。【结果】成功鉴定并匹配到１５个差异表达蛋白，其中９个与山羊肌肉发育相关。背最长肌中发现的位于ＦＧＦ２反义链的蛋白的功能主要是独立控制ＦＧＦ２的表达，同时具有激素调节和抗增殖的作用；背最长肌和臂三头肌中发现的轻链肌球蛋白（ＭｙＬＣ）家族成员，其类型在２种肌肉组织中不同，功能是控制肌肉收缩。背最长肌和臂三头肌中的ＭｙＬＣ蛋白分子质量存在差异。【结论】建立．．．

从白鲢(Hypophthalmichthys molitrix)骨骼肌中分离纯化到一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,该抑制剂的分子量大约50 kD,用PAGE-明胶电泳证明,该抑制剂对胰蛋白酶具有抑制作用;当温度超过60℃时,抑制剂的活性下降70%左右,但在pH 3~11的范围内均有活性。用MTT法分析白鲢骨骼肌丝氨酸蛋白酶抑制剂对急性T细胞白血病细胞Jarkat、人骨髓瘤细胞Sp20和人骨瘤细胞MG63生长的影响,结果发现该抑制剂对以上3种肿瘤细胞的增殖都有抑制作用,而且抑制作用呈剂量依赖性。本研究旨为进一步研究白鲢骨骼肌丝氨酸蛋白酶抑制剂的纯化及其抗肿瘤作用提供科学依据。

通过研究脱毒桐饼 (粕 )不同重量和粒度、碱溶液的浓度及 p H值、搅拌时间与离心时间以及离心速度等对蛋白质溶解度的影响 ,确定了测定脱毒桐饼 (粕 )蛋白质溶解度的适宜条件。结果表明 ,其适宜的条件是 :脱毒桐饼(粕 )样品 1.5 g(± 0 .0 0 1) ,需置于 75 m l的 p H值为 13.8的 3% (w/ v) KOH溶液中 ,经磁力搅拌 30 min,取搅拌液5 0 ml于离心机内离心 10 min,转速为 30 0 0转 / min(Rpm) ,再取离心上清液 15 m l,通过凯氏半微量定 N法测定其蛋白质含量 ,最后计算脱毒桐饼 (粕 )蛋白质溶解度

【目的】探讨日粮中添加蛹虫草对断奶仔猪生长和免疫性能的影响及调节断奶仔猪免疫应激的机制，为新型饲料添加剂筛选提供依据。【方法】选取相同日龄、初始体重相似的杜×长×大早期断奶仔猪144头并随机分为4组：NC组（基础日粮）、LPS组（LPS+基础日粮）、LPS+500CM组（LPS+基础日粮+500 mg·kg~(-1) CM）、LPS+1 000 CM(LPS+基础日粮+1 000 mg·kg~(-1)CM)。NC组和LPS组饲喂基础日粮，LPS+500CM组和LPS+1000CM组分别按照比例将蛹虫草粉与基础日粮充分混匀后饲喂。饲养结束后，每组随机挑选6头（公母各半）屠宰，屠宰前4h对LPS组、LPS+500CM组和LPS+1000CM组腹腔注射LPS,NC组注射等量生理盐水。屠宰后采集背最长肌、心脏、肝脏、脾脏、胰脏和肾脏进行检测。【结果】对体重及采食量统计分析，结果显示，日粮添加蛹虫草饲喂仔猪对仔猪平均日采食量无显著影响，而添加500 mg·kg-1CM和1 000 mg·kg-1CM的仔猪分别比对照组仔猪体重提高了8.58%(P<0.05)和9.08%(P<0.05)。相比于NC组，LPS组仔猪脾脏指数显著降低（P<0.05），而LPS+500CM组和LPS+1000CM组仔猪脾脏指数均显著高于LPS组（P<0.05）。肝功能生物标志物和总胆汁酸检测表明，LPS组仔猪肝脏ALT水平比NC组显著升高（P <0.05）,AST、LDH、总胆汁酸水平有上升趋势。而饲料中添加有蛹虫草的LPS+500CM组和LPS+1000CM组的ALT、AST、LDH和总胆汁酸水平均比LPS组的指标显著降低。肝脏抗氧化指标和炎症因子表达检测显示，LPS组仔猪肝脏的MDA、LPO、T-AOC水平及炎症因子表达显著升高（P<0.05），而CAT、GSH-Px、T-SOD水平显著降低（P<0.01），而用蛹虫草饲喂仔猪可以显著缓解这些指标的升高或降低。LPS组骨骼肌粗蛋白和氨基酸含量显著减低（P<0.01），而日粮添加蛹虫草饲喂可以显著缓解LPS导致的蛋白和氨基酸含量减少（P<0.01）。与NC相比，LPS组炎症因子表达显著升高（P<0.05），而日粮添加蛹虫草饲喂后炎症因子表达比LPS组显著降低（P<0.05）。LPS组仔猪背最长肌中的MDA和LPO和水平显著高于NC组（P<0.01），而T-AOC、CAT、GSH-Px和T-SOD水平则显著降低（P<0.01），日粮添加蛹虫草可缓解这种异常的升高或降低。对Akt、t-mTOR、4EBP1、FOXO1磷酸化水平进行检测，发现LPS组相比于NC组具有降低的趋势，而MAFbx、MuRF1的蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。日粮中添加蛹虫草饲喂后，仔猪背最长肌Akt、FOXO1磷酸化水平显著提高（P<0.05），而MAFbx、MuRF1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。【结论】日粮中添加蛹虫草可以提高断奶仔猪生长性能和免疫性能；蛹虫草可以抑制LPS导致的背最长肌粗蛋白和总氨基酸含量降低；蛹虫草可以抑制肝脏炎症和肝细胞过度增殖和凋亡，并提高了肝脏抗氧化能力；蛹虫草可以抑制断奶仔猪背最长肌炎症、氧化应激和蛋白质分解。总之，日粮中添加蛹虫草可以提高断奶仔猪生长和免疫性能，缓解LPS导致的肝损伤及蛋白质的降解，为筛选新型饲料添加剂及预防断奶仔猪免疫应激提供理论依据。

利用Westernblot技术 ,检测长途运输试验猪骨骼肌 (背最长肌和臀大肌 )中分属于HSP70 家族和HSP90 家族的 4种应激蛋白 (HSP70 ,HSP72 ,HSP86和HSP90 )的表达。所有运输应激猪和对照猪肌肉组织中均检测到了上述 4种HSP。对照猪组织中HSP的表达说明HSP除了在受应激的细胞内行使生理功能外 ,还具有独立于应激刺激应答以外的其它作用。6h的长途运输后 ,HSP的表达量明显不同 ,HSP70 和HSP72 在肌肉组织中的表达虽然有一定的增加 ,但统计学分析差异不显著 (P >0 0 5 ) ;而HSP86和HSP90 在骨骼肌中的表达明显下降 ,尤以H...

【目的】研究microRNA(miRNA)在猪不同类型肌肉生长发育中的作用。【方法】以猪心肌以及2种骨骼肌(背最长肌和腰大肌)为材料,采用Illumina高通量测序技术鉴定其miRNA转录组,并进行差异表达分析和靶基因富集分析。【结果】从猪心肌、背最长肌和腰大肌组织的3个小RNA测序文库中共获得约56M的序列,通过生物信息分析共鉴定出907个非冗余miRNA,其中441个miRNA在3个文库共同表达,123个miRNA在文库间表现为显著的差异表达(P

骨骼肌是动物躯体最重要的组成部分,占到产肉动物躯体的40%,肌纤维作为骨骼肌组织的主要成分,其类型的差异是影响产肉动物肌肉品质的重要因素之一。因此,骨骼肌的生长发育与产肉动物肉的产量有着密切的联系,而其生理生化特性的差异也将会直接影响到产肉动物屠宰之后肉品的质量。一般而言,动物骨骼肌肌纤维数目在胚胎发育期间基本上就已固定,出生之后,由于肌纤维的肥大,动物躯体肌肉块才表现出增大增粗。另外,动物肌肉块在生长发育过程中,其肌纤维组成类型并不是完全固定的,它们会随着骨骼肌对代谢与功能需求的改变而发生转变。骨骼肌的生长发育,以及骨骼肌肌纤维类型的发生与发展是一个非常复杂的生物学过程,受到许多信号通路与因...

［目的］研究支链氨基酸（ＢＣＡＡ）对大鼠骨骼肌细胞蛋白质代谢的影响，探讨氨基酸转运载体在ＢＣＡＡ调控细胞蛋白质代谢途径中的作用机制。［方法］用缺失支链氨基酸（Ｌｅｕ－，ＩＬｅ－，ＶＡＬ－）的无血清高糖型ＤＭｅＭ培养液培养Ｌ６肌管细胞，先后在培养基质中添加１００ ｎＭｏＬ·Ｌ－１雷帕霉素、支链氨基酸（Ｌｅｕ＋，ＩＬｅ＋，ＶＡＬ＋）和胎牛胰岛素，ＲＴ－ＰＣＲ法检测细胞表面氨基酸转运载体ＬＡＴ１、ＣＤ９８和ＳｎＡＴ２以及氨基酸调控因子ＧＣｎ２和ＡＴＦ４ ＭＲｎＡ表达，并结合ＷｅＳＴｅＲｎ－ＢＬｏＴ法考察蛋白合成关键因子磷酸化Ｓ６Ｋ１蛋白表达量及蛋白降解关键因子ＭｕＲＦ１和ＭＡＦＢｘ ＭＲｎＡ表达水平．．．

【目的】探讨caspase-3在宰后鸭肉中是否被激活以及参与改善宰后鸭肉的嫩度,为进一步用细胞凋亡机理阐明水禽类肉的成熟机理提供新的试验依据。【方法】分析检测宰后鸭胸肉和腿肉胞浆中细胞色素-C含量变化,caspase-3、-8和-9活化片段和酶活力变化、PARP降解片段的表达水平以及宰后鸭肉剪切力的变化情况。【结果】宰后鸭肉骨骼肌胞浆中细胞色素-C含量均显著升高(P<0.05);作为caspase系统的标志性蛋白,胸肉和腿肉中PARP蛋白均被劈开成小片段,且剪切力值于宰后4...

小清蛋白是鱼类的主要过敏原,对该蛋白的研究不仅有利于过敏原检测方法的建立也可为低致敏性水产品的开发提供理论依据。通过组织捣碎、冷冻离心、热处理、Superdex75凝胶过滤等方法从鲢白色肉中纯化得到过敏原小清蛋白。Tricine-SDS-PAGE显示,在非还原条件下,该蛋白呈分子量分别为12ku、14ku、24ku的3个条带。而在还原条件下,仅有分子量为12ku的条带。Western-blotting分析表明,分子量为12ku、14ku和24ku的这3个条带都与小鼠抗蛙小清蛋白单克隆抗体(PARV-19)发生特异性反应,提示它们均为小清蛋白的不同形态。用纯化的小清蛋白制备多克隆抗体,经Prot...