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[期刊] 中国农业科学  [作者] 施振旦  李明  刘丽  黎敏义  秦清明  
【目的】通过免疫抑制素和卵泡抑素促进精子发生,在夏季热应激状态下保持公猪精液品质。【方法】在夏季热应激状态下对精液品质出现下降的成年种公猪单独免疫抑制素、或联合免疫抑制素α亚基和卵泡抑素重组蛋白(n=6)3次,每次间隔21 d;然后在9周试验期间定期采血测定血液抗体效价、FSH和睾酮浓度,每周采精观察精子活力和精子密度作为精液品质指标。【结果】抑制素单独免疫、抑制素和卵泡抑素联合免疫都使猪血液中抗抑制素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01),联合免疫也使猪血液中抗卵泡抑素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01)。单独免疫或联合免疫都显著升高了血液FSH浓度;联合免疫还升高了血液睾酮水平。...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 牛树理  叶荣  杨利国  
为研究中和内源抑制素对排卵的影响,用猪精液抑制素粗品,对产后2 ̄5个月的25头母黄牛进行主动免疫。粗制品用福氏完全佐剂乳化后间隔20d免疫两次。在配种后第10d对11头发情母牛经直肠触摸卵巢,同时颈静脉采血。根据血清孕酮水平与排卵数之间的线性回归关系测定血清孕酮,采用直肠触摸黄体数推算排卵率。排2个以上卵的母牛占36%(4/11)。结果表明,用猪精液抑制素主动免疫黄牛可以提高其排卵率。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张红琳  杨利国  王诚  
采集猪卵泡液 ,用 70 %饱和度硫酸铵溶液沉淀后 ,分别过SephadexG 2 0 0柱和SephadexG 10 0柱 ,最后用磁珠免疫亲和层析法进一步提纯 ,使抑制素纯度从 12 4 μg·mg-1升至 39 4 μg·mg-1。PAGE电泳分析证明 ,提纯物只出现一条相对分子质量为 32 0 0 0的带 ,SDS PAGE电泳分析发现有两条相对分子质量分别为 14 0 0 0~ 15 0 0 0和 170 0 0~ 180 0 0的带 ,即β、α亚基。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李超  梅承  朱玉林  薛建华  钟寿坤  麻柱  张胜利  施振旦  
【目的】研究免疫抑制素提高奶牛超数排卵的效率以提高胚胎产量。【方法】免疫组首次免疫抑制素α亚基融合蛋白(1mg·头-1)与白油佐剂混合乳液,首免后第28、56d分别进行2次加强免疫,剂量为0.5mg·头-1。对照组同时注射生理盐水与白油佐剂的混合乳液。在第二次加强免疫后10d,采用FSH四日递减法进行超排处理,并根据母牛发情表现进行人工授精,试验一使用常规冷冻精液输精,试验二使用分离的雌性精子输精,输精后第7天进行冲胚。【结果】主动免疫抑制素能够有效提高血液抗抑制素抗体效价。试验一,免疫抑制素组头均获胚/卵总数为(15.8±2.8)枚,显著高于对照组(8.3±1.5)枚(P<0.05);头均可...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王水莲  薛立群  邓立新  崔先利  杨利国  
【目的】探讨不同剂量的双拷贝抑制素pcISI基因免疫对肉牛生殖能力的影响。【方法】将58头同期发情肉牛随机分为6组,每组肉牛分别注射0.75(T1)、1.5(T2)、2.25(T3)、3.0mg/头(T4)pcISI质粒、3.0mg/头pcMV-S空质粒(C1)和3mL/头生理盐水(C2),初次免疫21d后进行加强免疫,以探讨抑制素pcISI基因疫苗对肉牛卵泡和黄体发育的影响。【结果】4个剂量组的大卵泡数均高于对照组,除了T1外,其它3个剂量组均与对照组差异显著(P<0.05);T3和T4的中卵泡数均高于对照组,且差异显著(P<0.05);T3和T4的小卵泡数均高于对照组,且差异显著(P<0....
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张小冬  程瑞禾  夏银  
研究了抑制素主动免疫对母羊促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)以及妊娠、产羔的影响。15只发情季节考力代母羊平均分成3组:人抑制素α亚基(1-26)Tyr·Gly合成肽免疫组(H组)、猪精液抑制素免疫组(S组)和对照组(C组)。H组在初次免疫后即产生了抑制素抗体,第2次加强免疫后抗体滴度最高可达1∶64000。S组和C组均未产生可与人抑制素合成肽结合的抗体。H组母羊在第一次加强免疫后,血清FSH和P的水平显著高于C组(P<0.05)。S组母羊E2浓度在初次和第一次加强免疫后显著高于对照组(P<0.05)。各组血清LH水平未有显著变化。H组和S组母羊妊娠期分别为148...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王进荣  杨利国  王元兴  
用人工合成人抑制素α亚基 (1 2 6Gly .Tyr)片段与KLH连接作完全抗原免疫产蛋三黄母鸡 ,用放免法测定排卵周期外周血中雌二醇和孕酮的水平 ,观察产蛋率的变化。宰杀后卵巢称重 ,各期卵泡分类计数。结果免疫组产蛋率、大白泡、小白泡和小黄泡数比对照组高 (P
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 张红琳  杨利国  李斌  茆达干  
通过分离纯化卵泡抑制素受体,确定其受体类型,旨在为抑制素的作用机制研究奠定基础。采集30头长白猪垂体组织制备膜蛋白,用亲和层析法从该蛋白组分中分离、纯化出抑制素受体。SDS-PAGE结果发现该受体提取物中有6种蛋白,分子质量从14 ku到130 ku不等,表明抑制素受体可能不是特异性的单一受体,而是共受体。改良的ELISA结果证实,该受体提取物特异性活性为99 U/mg,能与抑制素结合,且与剂量呈正相关(R=0.993)。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 彭炳勇  高玉鹏  王春江  郑海祖  皇甫一凡  纪建新  
【目的】研究在基础日粮中添加维生素E对环磷酰胺诱导产蛋鸡免疫抑制的调控效应。【方法】将270只健康尼克褐产蛋鸡随机等分为5组,每组3个重复,每个重复18只。Ⅰ、Ⅱ组饲喂基础日粮(维生素E含量44.59 mg.kg-1),Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组在基础日粮中分别添加50、100和200 mg.kg-1维生素E。试验第5、6、7天,对Ⅱ—Ⅴ组产蛋鸡注射80 mg.kg-1 BW环磷酰胺建立免疫抑制模型,第Ⅰ组注射等量生理盐水。【结果】日粮中添加VE能显著提高免疫抑制产蛋鸡的产蛋性能和饲料转化率、养分表观代谢率(P
[期刊] 中国农业科学  [作者] 岳群华  袁建龙  郝斐  靳木子  王景园  杨文亮  刘东军  仓明  
【目的】构建骨骼肌特异表达目的基因卵泡抑制素(follistatin,FST)的真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red,分别转染到不同细胞系中,检测FST及下游基因在RNA和蛋白水平的表达情况,同时测定骨骼肌特异启动子SP和α-actin的启动效率,以研究FST的特异表达对肌肉发育的影响。【方法】利用脂质体分别将真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red转染到绵羊胎儿成纤维细胞(SFFCs)、骨骼肌卫星细胞(SMSCs)和SMSCs诱导肌管中,获得转基因细胞;对获得细胞的生长状况、细胞周期、细胞形态大小以及目的基因和下游基因的表达情况,分别用流式细胞仪、实时定量...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王水莲  薛立群  陈小军  杨利国  
选择40头南阳黄牛,用3.0 mg抑制素基因重组质粒(pCIS,免疫组,n=30)或同剂量的生理盐水(对照组,n=10)间隔21 d注射2次,分别在首次免疫当天、首次免疫后第10天和第21天、加强免疫后第10天和第45天收集血清,应用放射免疫法(RIA)测定处理后不同时期血清中激素水平。结果表明:在5个采血时间点内,加强免疫后第10天抗体阳性牛比率最高,为37.5%,与其他采血时间点有显著差异。免疫组促卵泡素(FSH)平均含量比对照组高,但差异不显著;17-β雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平在加强免疫后2组有显著性差异。另外,抑制素抗体阳性牛的FSH、E2和P4比阴性牛高,但差异不显著。这些结...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 林鹏飞  剧世强  罗碧平  郝元斌  王利勤  芮荣  靳亚平  
【目的】研究猪有腔卵泡发育和闭锁中颗粒细胞凋亡与卵泡液类固醇激素的变化,为了解猪有腔卵泡发育与闭锁的调控机理提供参考。【方法】从猪卵巢分离完整有腔卵泡,按质量分为健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡3类;再按卵泡直径大小分为大卵泡组(>5 mm)、中卵泡组(3~5 mm)和小卵泡组(
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 茆达干  吴结革  舒邓群  薛春林  王锋  杨利国  
40只小鼠分为4组,分别注射pC ISI(抑制素质粒)、pC ISI+细菌DNA、pC ISI+pGM-CSF和生理盐水(8.5 g.L-1)。pC ISI剂量为20μg,与佐剂等量混合,2周后加强免疫1次。试验结果表明,细菌DNA佐剂组诱导77.8%(7/9)的个体产生了抑制素阳性抗体,抗体以IgG2α型为主,gm-csf佐剂组产生的抗体以IgG1型为主;基因佐剂联合抑制素基因免疫激发的淋巴细胞增殖能力显著高于抑制素基因单独免疫组(P<0.05);细菌DNA佐剂组阳性鼠的动情期血浆雌二醇高于阴性鼠(P0.05)。上述结果表明,细菌DNA和gm...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李慧峰  单明辉  程淑琴  
【目的】探讨健脾益气汤对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。【方法】给小鼠皮下注射环磷酰胺(CTX)30mg/(kg·d),制备免疫抑制模型;阴性对照组小鼠灌胃生理盐水,阳性对照组灌胃0.1g/(kg·d)左旋咪唑,健脾益气汤低剂量给药组(16g/(kg·d))和高剂量给药组(44g/(kg·d))分别灌胃健脾益气汤,研究健脾益气汤对小鼠体质量、脾脏指数以及血清中IgG、IL-2、TNF-α质量浓度和T淋巴细胞亚群中CD4+、CD8+数量的影响。【结果】健脾益气汤低剂量给药组和高剂量给药组均能拮抗由环磷酰胺所导致的体质量下降,健脾益气汤高剂量组显著降低了免疫抑制小鼠的脾脏指数。健脾益气汤可以明显提高免...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 戴可可   李尚来   蔡玉   陈培勇   徐辉   吕文莉   赵冰茹   张艳丽  
[目的]本试验旨在研究卵泡抑素(Follistatin, FST)基因对湖羊卵巢颗粒细胞(Granulosa Cells, GCs)增殖及凋亡的影响,为揭示FST基因对湖羊繁殖调控机理的影响提供理论基础。[方法]首先利用免疫组织化学方法检测FST在卵巢组织中的表达特征;然后利用EdU、qRT-PCR、WB、流式细胞等技术,分析FST基因过表达和干扰对湖羊卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响;最后通过RNA-seq分析FST基因干扰前后湖羊卵巢颗粒细胞的转录组表达差异变化。[结果]FST在湖羊卵巢颗粒细胞内高表达,干扰FST能抑制湖羊卵巢颗粒细胞增殖,降低细胞中PCNA基因的mRNA和蛋白水平,过表达FST则表现出相反的趋势;RNA-seq结果进一步显示干扰FST后颗粒细胞中细胞周期调控、卵母细胞减数分裂、孕激素分泌等相关功能及通路发生显著变化。[结论]FST可以促进湖羊GCs增殖,抑制GCs凋亡,影响卵母细胞分裂、生殖激素分泌相关基因的表达,进而参与湖羊卵泡发育进程。
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