- 年份
- 2024(9646)
- 2023(14071)
- 2022(12658)
- 2021(11917)
- 2020(10492)
- 2019(23628)
- 2018(24030)
- 2017(46410)
- 2016(25874)
- 2015(29572)
- 2014(30126)
- 2013(29816)
- 2012(27675)
- 2011(24868)
- 2010(25012)
- 2009(23099)
- 2008(22896)
- 2007(20352)
- 2006(17393)
- 2005(15231)
- 学科
- 济(101518)
- 经济(101404)
- 管理(72667)
- 业(68066)
- 企(56129)
- 企业(56129)
- 方法(50346)
- 数学(44003)
- 数学方法(43503)
- 农(27813)
- 财(26411)
- 中国(25445)
- 学(24815)
- 业经(21075)
- 地方(20672)
- 制(19566)
- 贸(18393)
- 贸易(18384)
- 农业(18097)
- 易(17806)
- 理论(17605)
- 务(16701)
- 财务(16622)
- 财务管理(16582)
- 和(16324)
- 企业财务(15564)
- 银(15494)
- 银行(15426)
- 环境(15135)
- 技术(15083)
- 机构
- 大学(372062)
- 学院(370296)
- 管理(143846)
- 济(140514)
- 经济(137143)
- 理学(124640)
- 研究(123436)
- 理学院(123209)
- 管理学(120834)
- 管理学院(120193)
- 中国(91155)
- 科学(81551)
- 京(79931)
- 农(68894)
- 财(64303)
- 所(64266)
- 业大(61224)
- 研究所(58936)
- 中心(56781)
- 江(55080)
- 农业(54692)
- 财经(51650)
- 北京(50184)
- 范(49001)
- 师范(48429)
- 经(46728)
- 院(44400)
- 州(44326)
- 技术(41639)
- 经济学(41147)
- 基金
- 项目(253861)
- 科学(196133)
- 研究(181672)
- 基金(180965)
- 家(158877)
- 国家(157545)
- 科学基金(133086)
- 社会(109793)
- 社会科(103722)
- 社会科学(103688)
- 省(101095)
- 基金项目(96897)
- 自然(89074)
- 自然科(86927)
- 自然科学(86900)
- 自然科学基金(85294)
- 划(85080)
- 教育(84156)
- 编号(75583)
- 资助(75513)
- 成果(61807)
- 重点(56829)
- 部(55251)
- 发(53397)
- 课题(52227)
- 创(52014)
- 科研(49228)
- 创新(48589)
- 计划(47738)
- 大学(46899)
- 期刊
- 济(151882)
- 经济(151882)
- 研究(103726)
- 中国(69509)
- 学报(66476)
- 农(62178)
- 科学(57723)
- 管理(49691)
- 财(49549)
- 大学(48721)
- 学学(45954)
- 农业(42762)
- 教育(41825)
- 技术(32392)
- 融(28951)
- 金融(28951)
- 业经(25744)
- 财经(24460)
- 经济研究(23711)
- 业(21944)
- 经(20664)
- 图书(20337)
- 问题(20301)
- 版(19159)
- 科技(18235)
- 理论(18125)
- 技术经济(18043)
- 业大(17417)
- 实践(16771)
- 践(16771)
共检索到531830条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
马雪云 韩建秋 高淑霞 牛钟相
利用抗鸡C3 21肽抗体制备免疫亲和层析柱,对鸡补体C3d进行了分离,并采用间接酶联免疫吸附实验(间接ELISA),对洗脱液中的C3d组分进行了检测,以SDS-PAGE电泳方法对分离到的C3d进行了检测。结果表明,利用亲和柱层析能够分离得到纯度较高的C3d蛋白,为鸡血清中C3d的提取纯化提供了较为简便的方法。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李艳梅 褚新星 吴春涛 聂玉霞 肖连明
补体C3d是补体系统(complement system,CS)中补体C3的最终裂解产物。本试验利用RT-PCR技术从AA肉鸡肝脏总RNA中扩增C3d cDNA,测序证实为C3d基因。然后将其连接至表达载体pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3),1%IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western-blotting证实目的蛋白为C3d。亲和层析分离C3d融合蛋白,与纯化新城疫病毒(Lasota株)经戊二醛连接后免疫SPF鸡。血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体水平,MTT法检测胸腺T淋巴细胞转化率。结果表明C3d融合蛋白能够提高特异性抗体水平以及细胞免疫水平,本研究为进一步研...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张红琳 杨利国 王诚
采集猪卵泡液 ,用 70 %饱和度硫酸铵溶液沉淀后 ,分别过SephadexG 2 0 0柱和SephadexG 10 0柱 ,最后用磁珠免疫亲和层析法进一步提纯 ,使抑制素纯度从 12 4 μg·mg-1升至 39 4 μg·mg-1。PAGE电泳分析证明 ,提纯物只出现一条相对分子质量为 32 0 0 0的带 ,SDS PAGE电泳分析发现有两条相对分子质量分别为 14 0 0 0～ 15 0 0 0和 170 0 0～ 180 0 0的带 ,即β、α亚基。
[期刊] 华北农学报
[作者]
温立斌 何孔旺 解建平 杨浩 周建新 金全胜 王玉然
通过免疫亲和层析对类猪圆环病毒因子P1纯化进行了研究。采用环氧活化及NHS活化的琼脂糖凝胶,与兔抗P1表位肽抗体偶联,对P1进行了免疫亲和吸附,通过电镜技术证实获得了纯化病毒。结果表明,免疫亲和层析是有效的P1病毒纯化方法。
关键词：
类猪圆环病毒因子P1 纯化 免疫亲和层析
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
何国声 顾越星 何波 徐梅倩 曹杰 朱顺海 黄维义
为了探明大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)的多肽组分和酶活力以供今后进行 GST 的免疫原性和各种蠕虫 GST 的交叉免疫原性的研究,本试验首次用亲和层析法对大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)进行提取,用 SDS-PAGE 分析了大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)的多肽组分,用1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)为底物测定了 GST 酶活力.电泳染色结果表明,大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)至少有2条带,其分子量为29.9～24.5kD,其中主带2条,分别为28.3和26.2kD。酶活力测定结果表明,提取的 GST 可获得10.44μmol·min~(-1)·mg~(-1)以上的酶比活性.
[期刊] 中国农业科学
[作者]
夏庆祥 张德庆 吴家强 牛星 王小龙 牛钟相
【目的】构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因C3d-P28分子佐剂重组质粒,探明C3d-P28分子佐剂的免疫增强效果。【方法】用大肠杆菌疫苗对健康猪进行免疫激活,提取猪肝脏总RNA,RT-PCR克隆C3d-P28并连接至pUC19载体,构建pUC19-P28.n(2、4、6)串联体,然后分别将P28.n(2、4、6)连接至真核表达载体pcDNA3.1构建成pcDNA3.1-P28.n(2、4、6)。RT-PCR扩增PRRSV GP5基因,分别定向克隆至pcDNA3.1-P28.n(2、4、6)中,构建pcDNA3.1-GP5-P28.n(2、4、6)重组质粒;提取重组质粒进行双酶...
[期刊] 水产学报
[作者]
高红艳 赵金龙 王雅晴 蒋秋燕 黄玉浩 林洪 李振兴
为实现甲壳类水产品主要过敏原的快速检测，实验使用凡纳滨对虾原肌球蛋白（TM）作为检测靶标，构建了胶体金免疫层析检测方法。使用天然TM分别免疫SD大鼠和新西兰大白兔制备多克隆抗体，以40 nm胶体金标记的鼠多抗作为检测抗体，以兔多抗为捕获抗体，基于双抗体夹心原理组装免疫层析试纸条，并应用于市售食物样品的检测。结果表明，组建的免疫层析试纸条可在5 min之内显示结果，视觉检出限为10 ng/mL，对虾、蟹、克氏原螯虾及美洲螯龙虾等甲壳类水产品的特异性高，但与蛤蜊、扇贝存在微弱的交叉反应；在不含甲壳类水产品的市售食品中的加标回收率为81%～126%，准确性良好；试纸条的批内、批间变异系数低于15%，市售实际食物样品的检测结果与食物过敏原标签一致。研究表明，该方法具有高灵敏度与检测特异性，可在多种基质与商业化食物样品中实现甲壳类过敏原的有效检测，具有较强的实际应用价值。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
檀新珠 吴晓晴 吕明其 王冠淞 李健 秦韬 黄一帆 马玉芳
将60只小鼠随机分为空白对照组,太子参茎叶多糖(RPSLP)低、中、高剂量组,每组15只.空白对照组小鼠灌服0.2m L·d(-1)蒸馏水,低、中、高剂量组小鼠分别灌服50、100和200 mg·kg(-1)·d(-1)RPSLP,14 d后检测各组小鼠的免疫器官指数和血清免疫球蛋白、补体含量,研究RPSLP对小鼠免疫功能的影响.结果表明:与空白对照组相比,高剂量组小鼠的脾脏指数显著提高(P<0.05),胸腺指数显著降低(P<0.05);低、中剂量组小鼠的IgA含量显著提高(P<0.05),低剂量组小鼠的
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
尹燕霞 佟丽 李小蒙 向本琼
对分子筛层析实验进行改革,优化分子筛层析分离标准蛋白的实验条件、建立良好的标准曲线。以分子筛Sephacryl S-200 HR作为层析填料,对蛋白、蛋白浓度、样品上样量、上样顺序、流速等关键因素和环节进行了摸索,通过实验条件的筛选和优化获得了线性关系较好的标准曲线和洗脱峰图谱。该方法具有较高的分辨率和重复性,为进一步研究层析技术奠定了基础,在本科生的实验教学中取得了良好教学效果。
关键词：
分子筛层析 标准曲线 实验教学
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王改玲 骆彦萍 孙宝剑 徐镇 许巧情 聂品
用RACE-PCR和RT-PCR方法获得鳜(Siniperca chuatsi)膜结合型免疫球蛋白D(Membrane-bounded IgD,mIgD)重链基因的全长cDNA序列。鳜mIgD的cDNA全长为3358bp,其5l非编码区包含30bp,3l非编码区包含337bp;开放阅读框包含2991bp,编码996个氨基酸,基因结构为VDJ-μ1-δ1-δ2-δ3-δ4-δ5-δ6-δ7-TM。鱼类IgD恒定区氨基酸序列比对结果显示,鳜mIgD存在半胱氨酸和色氨酸保守位点,与其他鱼类IgD的相似性在37%～72%之间。用邻接法(Neighbor Joining)构建的鱼类免疫球蛋白基因的系统发...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
许娜娜 钱冬 赵海泉
分离纯化了花鲈(Lateolabrax japonicus)血清免疫球蛋白(Ig),并对其特性进行初步研究与分析。采用山羊-IgG(Goat-IgG)免疫花鲈并制备血清,分别采用硫酸铵分级沉淀法、A蛋白亲和层析法及Goat-IgG偶联亲和层析法提取花鲈Ig,对提取组份进行了蛋白浓度测定、间接ELISA效价测定、SDS-PAGE和Western-blotting分析。结果表明,采用硫酸铵分级沉淀法提取的花鲈Ig主要集中在硫酸铵饱和度为30%~50%的区间,其中45%饱和度硫酸铵富集的的抗体比活最高,ELISA效价为2×104/mg蛋白,比血清ELISA效价提高2.2倍;A蛋白柱亲和层析可得单一蛋...
关键词：
花鲈 免疫球蛋白 纯化 亲和层析
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘云 孙峰 姜国良
运用Sephacryl S-200凝胶层析和HiTrap rProtein ASepharose亲和层析2种方法对牙鲆(Paralichthys olivaceus)血清免疫球蛋白进行分离纯化,结果表明,牙鲆免疫球蛋白分布于33%~50%的硫酸铵饱和溶液中,其中45%的分离效果最好。凝胶层析和亲和层析样品均出现2个蛋白峰,用还原SDS-PAGE检测确定牙鲆免疫球蛋白存在于第2个蛋白峰中。牙鲆免疫球蛋白重链分子量约为75.4 kD,轻链分子量约为29.9 kD和28.2 kD,推测牙鲆血清免疫球蛋白的分子量为836 kD。制备了兔抗牙鲆免疫球蛋白多克隆抗体,免疫双扩散法检测多克隆抗体效价为1∶3...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
蒋会婷 于三科 冯平 江海燕 王希良
对破伤风毒素C基因(TTC)进行了克隆,在大肠杆菌中构建了C基因-硫氧还蛋白融合表达系统并对其进行了重组表达,对表达后蛋白进行了纯化和rTTC的免疫原性初步研究。结果表明,该系统可高水平表达可溶性rTTC,rTTC表达量占可溶性蛋白的28.19%,纯化后纯度为96.92%;所获得的rTTC具有良好的免疫原性,可为开发新一代破伤风亚单位疫苗奠定基础。
关键词：
破伤风毒素 C基因 免疫原性 C蛋白
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王爱萍 李发弟 胡骁飞 史兆国 周景明 杜晓明 王林林 禹乐乐 刘明阳
【目的】研制新霉素(neomycin,NEO)免疫膜层析快速检测试纸。【方法】建立分泌抗新霉素单克隆抗体(NEO mAb)杂交瘤细胞株,用胶体金免疫膜层析试验(GICA)制备NEO残留快速检测试纸(NEO-Strip),并对其性能进行鉴定。【结果】抗新霉素单克隆抗体的亲和力常数为3.75×1010 mol.L-1;制备的NEO-Strip目测限为50 ng.mL-1;试纸可特异性检测NEO,与庆大霉素、链霉素、妥布霉素、紫苏霉素、莱克多巴胺、沙丁胺醇、泰乐菌素和氯霉素等其它药物均无交叉反应性;就定性检测而言,其结果与高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS-MS)完全一致;不同的基质液对试纸的敏...
关键词：
新霉素 单克隆抗体 胶体金 试纸条
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
贾先春 周嘉明 智军海 郝秋艳 杨晓芳 王玮
[目的] 本文旨在建立一种胶体金免疫层析技术高通量测定猪肉、鸡肉组织中8种磺胺类、3种四环素类、2种喹诺酮类和甲氧苄啶药物残留的方法。[方法] 动物肌肉组织中磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶经磷酸缓冲液提取，并经含Tween 20的磷酸缓冲液稀释后，与胶体金标记的单克隆抗体结合，抑制抗体和硝酸纤维素膜检测线（T线）上的抗原结合，从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线（C线）颜色深浅，对试样中多兽药残留进行定性判定。[结果] 本试验了优化pH值、抗体添加量、抗原包被量、Tween 20添加量和冻干保护剂种类等关键因素，磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶等药物的检出限分别为50、100、50、35 μg·kg~(-1)，灵敏度≥97%，假阳性率≤2%，假阴性率≤3%，且与现有标准方法检测结果一致。[结论] 该方法操作简便，灵敏度和准确度高，检测时间短且稳定性好，可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
