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[期刊] 淡水渔业
[作者]
王建国 许琴瑟 王权 熊良伟 陆宏达 封琦 朱云干
以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)酚氧化酶(PO)为材料,采用L-DOPA为反应底物,分光光度计测定不同温度和pH条件下PO活力,研究克氏原螯虾PO的特性,为其免疫学研究及优化PO准确测定方法提供依据。结果显示PO活力最高时的温度为35℃,低于和高于35℃活力逐渐下降,45℃以上活力迅速下降;0℃仍具有最高活力的24%。在pH4.0～9.5内PO均具有活力,鳃组织最佳pH5.5,血清最佳pH6.5。因此测定克氏原螯虾PO活力的最佳参数为温度35℃,pH5.5(鳃)或6.5(血清)。以上结果说明冰浴终止反应法测定克氏原螯虾PO活力会影响结果的准确性,要慎用。
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
陆宏达 刘凯 张明辉
对中华绒螯蟹血淋巴的血清、血浆和血细胞裂解上清液(HLS)中酚氧化酶(PO)的活力以及该酶最适pH和温度进行了测定分析,结果表明在血清和HLS中都有PO活力,而血浆中无PO的存在,血清中的PO来自于血细胞;以L-Dopa为底物,中华绒螯蟹PO活力的最适pH值为6.5,最适温度为40℃。采用SDS、Ca2+、Mg2+以及SDS与Ca2+联合和SDS与Mg2+联合分别对酚氧化酶原(proPO)进行激活试验,血清和HLS中的PO活力都有显著的增加,其中SDS的激活作用最强,Ca2+、Mg2+的激活作用最弱,SDS与Ca2+联合和SDS与Mg2+联合的混合激活作用介于SDS和Ca2+、Mg2+之间,激...
关键词：
中华绒螯蟹 酚氧化酶 生化特性
[期刊] 淡水渔业
[作者]
朱毅菲 熊传喜 王良发
以克氏原螯虾(Procam barus clarkii)为材料,研究温度、pH对其血清酚氧化酶活力及稳定性的影响。实验以L-dopa为反应底物,在试验设计的温度范围(20,30,40,50,60,70℃)内,测得酚氧化酶活力的最适温度为20℃,随温度升高酶活力迅速下降,该酶在20~40℃范围内表现出较高的热稳定性,而30℃时最稳定;该酶的最适pH 7.0,在pH 6.0和7.0的缓冲系统中表现出较强的稳定性。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
李贺水 曾勇 栾青
将白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)、大肠杆菌(Escherichia coli)(DH5α)用注射法接种克氏原螯虾(Procambarus clarkii),在072 h之间定时检测克氏原螯虾血细胞和肝胰脏中酚氧化酶(Phenoloxidase,PO)活力变化。结果显示:(1)0.1 mg/m L和1 mg/m L胰蛋白酶处理样品后,样品间差异不显著。(2)加胰蛋白酶处理与未加胰蛋白酶相比,供试克
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王宁 郑尧 刘祝萍 张凤翔 孔繁彬 孟顺龙 陈家长
为研究CuSO_4、青苔净和草甘膦三种投入品对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)抗氧化酶等的影响，参考实际生产中使用浓度，设置对照、CuSO_4(1和2 mg/L)、青苔净(5和10μg/L)和草甘膦(5和10μg/L)实验组，分别在4、8和12 d时测定肝胰腺抗氧化酶类物质[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)、还原型谷胱甘肽(GSH)、总抗氧化能力(T-AOC)]、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、酸/碱性磷酸酶(ACP/AKP)和溶菌酶(LZM)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果显示：三种投入品均造成克氏原螯虾肝胰腺抗氧化酶(SOD、CAT、GSH、GPx)活性先升高后降低，T-AOC活性持续下降；青苔净和草甘膦造成GR活性先升高后降低，也造成MDA含量先降低后升高；CuSO_4造成MDA含量先升高后降低；三种投入品处理后期造成磷酸酶(ACP和AKP)活性升高，LZM活性降低。结果表明三种投入品均会造成克氏原螯虾肝胰腺抗氧化防御因子活性水平、磷酸酶活性、MDA含量和LZM活性发生改变，产生氧化应激效应。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张龙岗 董学飒 朱永安 安丽 孟庆磊 杨玲
为了揭示急性盐度胁迫下克氏原螯虾(Procambarus clarkia)肝脏抗氧化酶和鳃丝Na+/K+-ATP酶的活性变化情况,将养殖于淡水中体重为(7.51±1.23)g的克氏原螯虾幼虾直接转移至盐度4‰、8‰、12‰和16‰的水体中,于转移后6、12、24、48、96 h分别检测肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)以及鳃丝Na+/K+-ATP酶活性的变化。结果表明:随着盐度的升高和胁迫时间的延长,肝脏中SOD和CAT活性开始显著增强,到达一定强度后又逐渐下降。而GPX活力表现出降低的趋势,尤其在低盐度条件下,与...
[期刊] 水产学报
[作者]
张亚文 成永旭 李晨露 王源源 侯受权 李京昊 奚业文 朱传忠 李嘉尧
为研究饲料中添加不同水草粉对克氏原螯虾生长、消化酶、抗氧化酶活性及色泽的影响，本研究通过在饲料中分别添加15%的伊乐藻、轮叶黑藻、苦草、金鱼藻和喜旱莲子草5种水草粉(分别标记为Diet 2～6组)，对照组饲料无水草粉添加（标记为Diet 1组），对克氏原螯虾幼虾进行为期60 d的养殖实验。结果显示：水草组(Diet 2～6组)成活率(SR)与Diet 1组无显著差异，Diet 3～5组增重率(WGR)及特定生长率(SGR)均与Diet 1组无显著差异，而Diet 3组肝胰腺指数(HSI)显著高于Diet 1组。在肝胰腺中，Diet 2～6组脂肪酶(LPS)活性显著高于Diet 1组，且Diet 5组LPS和α-淀粉酶(α-AL)活性最高，而胃蛋白酶活性为Diet 2组最高，Diet 2～3及5组纤维素酶(CL)活性显著高于Diet 1组；在肠道中，Diet 2～6组4种消化酶活性均低于Diet 1组。Diet 3～6组头胸甲和肌肉总类胡萝卜素、头胸甲虾青素含量及卵巢中总类胡萝卜素、虾青素、叶黄素和β-胡萝卜素含量均显著高于Diet 1组。Diet 2～6组头胸甲及卵巢的红度(a*值)和黄度(b*值)均显著高于Diet 1组，而亮度(L*值)却低于Diet 1组。在肝胰腺中，Diet 2～6组总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均显著高于Diet 1组且在Diet 5组最高，Diet 4组总抗氧化能力(T-AOC)活性最高，Diet 2组丙二醛(MDA)含量最高；血清中，Diet 6组T-AOC活性最高，但各组间T-SOD活性和MDA含量无显著差异。研究表明，添加15%轮叶黑藻、苦草和金鱼藻水草粉到饲料中，对克氏原螯虾生长无负面影响，有利于体内类胡萝卜素、虾青素的积累，改善克氏原螯虾头胸甲和卵巢色泽的同时提升抗氧化能力。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张龙岗 董学飒 朱永安 安丽 孟庆磊 杨玲
为了揭示急性盐度胁迫下克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓ ｃｌａｒｋｉａ）肝脏抗氧化酶和鳃丝Ｎａ＋／ｋ＋－ａＴＰ酶的活性变化情况，将养殖于淡水中体重为（７．５１±１．２３）ｇ的克氏原螯虾幼虾直接转移至盐度４‰、８‰、１２‰和１６‰的水体中，于转移后６、１２、２４、４８、９６ ｈ分别检测肝脏中超氧化物歧化酶（ｓｏＤ）、过氧化氢酶（ｃａＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ｇＰＸ）、谷胱甘肽－ｓ－转移酶（ｇｓＴ）以及鳃丝Ｎａ＋／ｋ＋－ａＴＰ酶活性的变化。结果表明：随着盐度的升高和胁迫时间的延长，肝脏中ｓｏＤ和ｃａＴ活性开始显著增强，到达一定强度后又逐渐下降。而ｇＰＸ活力表现出降低的趋势，尤其在低盐度条件下，与．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
王丹丽 左迪 王兰梅 李嘉尧 赵云龙
为深入了解红螯光壳螯虾酚氧化酶原(proPO)基因的非特异性免疫机制,利用RACE技术从红螯光壳螯虾血细胞中克隆到酚氧化酶原基因cqproPO,cqproPO基因cDNA全长为2 962 bp,开放阅读框为1 998 bp,编码665个氨基酸,其结构中含有两个铜离子结合位点,预测分子量为75.86 ku;同源性比对结果显示,红螯光壳螯虾CqproPO与克氏原螯虾酚氧化酶原的同源性最高为79%,其次是淡水螯虾74%、挪威龙虾69%、美国龙虾67%等;进化分析发现CqproPO与克氏原鳌虾、淡水螯虾、挪威龙虾、美国龙虾等的酚氧化酶原亲缘关系最近;Realtime-PCR实验结果表明,CqproPO...
[期刊] 水产学报
[作者]
魏华 吴楠 沈竑 成永旭 吴婷婷
为了解溴氰菊酯对克氏原螯虾的毒性及致毒机理,采用24h换水式生物试验研究了溴氰菊酯对克氏原螯虾的96h急性毒性,分光光度法检测了6、12、24和48h后0.01、0.02和0.04μg/L溴氰菊酯对肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)的含量等氧化胁迫相关指标的影响。结果表明,24、48和96h的半致死浓度分别为0.1560、0.0993和0.0562μg/L,安全浓度为5.62ng/L;在整个暴露过程中,溴氰菊酯各个处理组都引起了氧化胁迫相关指标的变化。SOD和CAT活力的变化趋势相同,都呈抑制-诱导-抑制的变化规律,MDA含量则一直高于对照组。暴露6h后...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
尚红梅 韩淑君 陈诚 高岩 兰红秋
【目的】研究菊苣根多酚氧化酶(PPO)酶学特性的影响因素,为菊苣根加工过程中酶促褐变的控制提供参考。【方法】以菊苣新鲜根为材料,从供试的3种三元酚、5种二元酚和4种单元酚底物中选出最佳反应底物,分析所选择底物的浓度、PPO提取液添加量、pH、温度及抑制剂对菊苣根PPO活性的影响,同时研究PPO的酶促动力学特征。【结果】菊苣根PPO的最适底物为焦性没食子酸,其最佳浓度为40mmol/L,菊苣根PPO的最适粗酶液添加量为0.4mL,最适pH和反应温度分别为7.0和35℃。PPO酶促反应动力学符合米氏方程,酶促反应的动力学米氏常数为0.39mmol/L,最大反应速率为217.39U/min。控制pH...
关键词：
菊苣根 多酚氧化酶 酶学特性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
段玉权 董维 张明晶 冯双庆 赵玉梅
【目的】对分离纯化后的中华寿桃果肉多酚氧化酶的酶学性质进行研究,探讨中华寿桃果肉褐变机理。【方法】以邻苯二酚为作用底物,用分光光度法在420nm下测定不同pH、反应温度、底物浓度条件下桃果肉的多酚氧化酶(PPO)活性。【结果】中华寿桃果肉66kD的PPO最适pH约为6.5,最适反应温度为60℃左右,该酶对温度有较强稳定性;该酶最适作用底物为绿原酸、儿茶酚和对羟基苯甲酸;FeSO4、EDTA和抗坏血酸等化合物可以抑制PPO活性,CaCl2、CuSO4和MnSO4等则起促进作用。【结论】该酶耐热能力强,适度低温、酸性条件、抗坏血酸处理等可以抑制该酶活性。
关键词：
中华寿桃 果肉 多酚氧化酶 酶学性质
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
林瑞环 赵玲 曹荣 刘淇
黑变是南极磷虾(Euphausia superba)贮运流通过程中的突出问题，为探究南极磷虾与普通海捕虾在黑变进程方面的异同，选取南极磷虾和海捕鹰爪糙对虾(Trachypenaeus curvirostris)作为研究对象，对两种虾在(2±1)℃贮藏过程中的黑变进程进行了感官评价，提取其酚氧化酶(PO)并进行了纯化，对两种虾PO的生化性质进行了对比分析。结果显示，冷藏条件下，24 h时南极磷虾的黑变已非常严重，黑变部位主要集中在头胸部、腹部甲壳以及尾节部分。72 h时鹰爪糙对虾的头胸部和尾节部分开始有轻微的黑变，之后逐渐扩散到躯干。南极磷虾和鹰爪糙对虾PO粗酶液经硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶过滤后，酶的纯化倍数分别达到17.22和19.67。两种虾PO的最适温度分别为30℃和40℃，南极磷虾PO在低温下仍具有较高的活力。二者的最适pH均为6.0～7.0之间。焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、4-己基间苯二酚、L-半胱氨酸和抗坏血酸均可较好的抑制两种虾PO活力，其中4-己基间苯二酚抑制效果最好。研究结果为南极磷虾冷链物流过程中的品质控制提供了依据，同时为虾死后如何有效抑制其黑变提供了参考。
关键词：
黑变 南极磷虾 鹰爪糙对虾 酚氧化酶
[期刊] 淡水渔业
[作者]
闫戈 顾晨 王承鑫 李世平 魏万红
为探究芡实(Euryale ferox)提取物对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)生长免疫的影响,本实验按照饲喂饲料芡实提取物的添加浓度分为对照组(0 g/kg)、0.5%芡实组(5 g/kg)、1%芡实组(10 g/kg)和2%芡实组(20 g/kg),连续投喂克氏原螯虾28 d,实验结束后测定克氏原螯虾的生长参数和嗜水气单胞菌攻毒后的存活率,并分析了抗氧化酶活、免疫相关酶活和相关基因表达情况。结果显示:芡实提取物对克氏原螯虾的生长和嗜水气单胞菌攻毒后的存活率没有影响。与对照组相比,0.5%芡实饲喂显著增加了克氏原螯虾血清中的酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性,而1%和2%芡实血清中的ACP活性显著降低,2%芡实组克氏原螯虾血清中的SOD活性显著增加。在肝胰腺中,0.5%芡实组克氏原螯虾的ACP活性也显著增加,但其它酶活没有显著变化。荧光定量PCR的结果显示,2%芡实显著增加了克氏原螯虾CypA和GPxs mRNA的表达,而Astacidin mRNA的表达在各组之间均无显著差异。综上结果表明,芡实提取物能在一定程度上增强克氏原螯虾的抗氧化能力和免疫力,而不影响其生长。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
陈静 符真珠 王政 何松林
【目的】研究影响牡丹试管苗多酚氧化酶(PPO)酶学特性的因素,为牡丹的高效组培提供参考。【方法】以牡丹品种"乌龙捧盛"为供试材料,采用分光光度计比色法,研究温度、pH值、PPO提取液添加量及底物的类型和浓度对牡丹PPO活性的影响。【结果】以邻苯二酚为底物时,牡丹PPO的最适反应温度与最适pH分别为25℃和6.0,最适PPO提取液添加量为1mL。牡丹PPO的最适作用底物为咖啡酸,其最适浓度为0.08mol/L。【结论】通过选择合适的pH值和培养温度,同时结合化学抑制剂调控牡丹PPO活性,可以达到在牡丹组织培养中减少褐化现象、提高试管苗生根率的目的。
关键词：
牡丹 多酚氧化酶 酶学特性
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