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[期刊] 海洋渔业
[作者]
谭妙英 常彦磊 张璜 谢会 李丽丽 石磊
为了解芽孢杆菌科细菌的耐药性情况，本研究选择克氏原螯虾（Procambarus clarkii）作为样品分离芽孢杆菌科细菌，鉴定种属后通过微量肉汤稀释法确定菌株对药物的最小抑菌浓度值(Minimum Inhibitory Concentration， MIC)，检测耐药相关基因后通过接合转移实验分析耐药基因的转移情况。结果显示，所有样品共分离出59株芽孢杆菌科细菌，经鉴定可分为短芽孢杆菌属（Brevibacillus sp.）、假芽孢杆菌属（Falsibacillus sp.）、类芽孢杆菌属（Paenibacillus sp.）和芽孢杆菌属（Bacillus sp.），芽孢杆菌属(Bacillus sp.)数目最多，为44株。药敏实验确定耐药菌株共33株，12株对甲砜霉素药物不敏感，菌株基因检测中共检出21种耐药基因和2种转移元件基因。接合转移实验结果表明，在含甲砜霉素药物的环境中耐药基因可以在芽孢杆菌或类芽孢杆菌与大肠杆菌（Escherichia coli）之间转移，并且耐药表型可传代传播。实验揭示了细菌间甲砜霉素耐药表型传播的高风险，对养殖药物的使用及细菌监测具有一定的指导意义。
[期刊] 华北农学报
[作者]
贾艳华 李凤娟 刘建华 胡功政 莫娟 余军军
为探讨鸡源大肠杆菌生物被膜的耐药机制,采用改进的平板培养法建立鸡大肠杆菌生物被膜体外模型,用液体二倍稀释法分别测定了鸡源大肠杆菌生物被膜菌、浮游菌和脱膜菌对克拉霉素、环丙沙星、磷霉素等13种抗菌药的敏感性,并检测了细菌生物被膜中超广谱β-内酰胺酶的产生情况。结果表明:浮游菌和脱膜菌对同种药物的敏感性几乎相同,而生物被膜菌对同种药物的耐药性比后两者显著增强,并且2株不产超广谱β-内酰胺酶的浮游菌在形成生物被膜后产生了超广谱β-内酰胺酶。由此说明,生物被膜菌的耐药性主要是由于生物被膜这种特殊结构造成的,同时,由于生物被膜的存在,促使了超广谱β-内酰胺酶的产生。生物被膜的形成和超广谱β-内酰胺酶的产...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
谢佳磊 肖丹 殷蝶 吴志新 陈孝煊
在饲料中分别添加0、1×109、3×109和5×109cfu/kg枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),测定投喂相应饲料后第1、4、7、14、21、28天以及停止投喂枯草芽孢杆菌后的第7、14天克氏原螯虾(Procam barus clarkii)的血淋巴吞噬活性、血清溶菌活力、抗菌活力以及酚氧化酶活力。结果显示:实验组(含枯草芽孢杆菌的饲料组)的吞噬活性于投喂枯草芽孢杆菌后第7天开始显著高于对照组(P<0.05);实验组的溶菌活力、抗菌活力明显高于对照组(P<0.05),并在停药后仍维持较高水平(P<0.05);此外,酚氧化酶活力也有所增加。本研究表明,枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾...
[期刊] 水产学报
[作者]
丁戈野 李纯 徐杨 陈晓颖 张秋实 胡亮 邓新兰 刘小燕 冯兴浪 李军华
为探明2023年3月初引起中国重庆市渝北区某牛蛙养殖场暴发疾病的原因，本实验从患病美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道中分离优势菌，采用形态学观察、生理生化实验、16S rDNA和rpoB基因序列测定、系统发育学分析进行鉴定。为确定该菌株的致病机理，对该菌株进行了人工感染实验、组织病理学观察、毒力基因检测、生长特性研究及药物敏感性实验。结果显示，在患病濒死美国牛蛙蝌蚪的肝脏和肠道中分离得到的其中一株优势菌命名为LT202303，经鉴定为约氏不动杆菌。该菌株携带OmpA、Omp34和OmpTsx等3种毒力基因，具有较强的耐盐性和在广泛的pH范围内生存的能力，对美国牛蛙蝌蚪的半数致死浓度为6.8×10~6CFU/mL，发病临床症状为肝脏红肿并伴有大量白色结节，肠道透明发黄。组织病理学观察发现该菌株可引起美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道的明显炎症反应和病灶性坏死。药敏实验结果显示，分离菌LT202303是一种产β-内酰胺酶的多重耐药细菌。本研究表明，约氏不动杆菌对牛蛙蝌蚪具有高致病力，可引起肝脏和肠道等多器官组织的病理损伤最终引发机体的损伤甚至死亡。本研究首次报道约氏不动杆菌感染引起的美国牛蛙蝌蚪传染病的暴发，为该疾病的诊断和防控提供理论参考。
[期刊] 水产学报
[作者]
肖双燕 韦冬冬 刘明珠 黄静 余庆 蒙兰丽 李鹏飞
为探明2022年5月引起广西南宁某养殖基地牛蛙暴发疾病的原因。本研究从患病牛蛙肝脏、脾脏、肾脏和肠道中分离优势菌，采用形态学观察、生理生化实验、16S rRNA基因序列测定、系统发育学分析进行鉴定。为确定该菌株的致病机理，对该菌株进行了人工感染实验、组织病理学观察、毒力基因检测、药物敏感性实验及耐药基因检测。结果显示，在患病濒死牛蛙的肝脏、脾脏、肾脏、肠道均分离到单一的优势菌株，将从肠道分离得到的一株优势菌命名为NFCF-02，经鉴定为弗氏柠檬酸杆菌。该菌株携带viaB、ompX、ureE、ureD、ureG、ureF这6种毒力基因，对牛蛙的半数致死浓度为3.12×10~(6) CFU/mL，发病临床症状为肝脏变黄、花肝、肝脏坏死；肾脏充血发红、胃表面有血丝以及肠道呈红色和血脓充塞肠道的症状。组织病理学观察发现其肝细胞变性坏死，肝索排列紊乱；肾小管上皮细胞肿胀坏死、严重区域肾小管崩解、坏死；脾脏中央静脉扩张淤血，含铁血黄素、色素细胞增多；肠黏膜脱落，肠上皮细胞坏死脱落，杯状细胞坏死。药敏实验结果显示，分离菌株NFCF-02对新霉素、多粘菌素B、头孢拉定、多西环素4种抗菌药物敏感，对林可霉素等14种抗菌药物已产生耐药性，携带gyrA、Sul1等7种耐药基因。研究表明，弗氏柠檬酸杆菌对牛蛙具有高致病力，可引起肝脏和肠道等多器官组织的病理损伤最终引发机体的损伤甚至死亡。本研究首次从组织病理学分析和毒力因子携带情况角度确定弗氏柠檬酸杆菌对牛蛙的致病力，可为养殖牛蛙弗氏柠檬酸杆菌病的诊断和药物防控提供参考依据。
[期刊] 华北农学报
[作者]
忽占利 李军星 胡松华 王一成 袁秀芳 徐丽华
为了解浙江省规模化猪场患病猪副猪嗜血杆菌的耐药性,采用K-B琼脂法对73株HPS浙江株进行了18种临床药物的敏感性试验,同时应用PCR技术对11个相关耐药基因进行扩增、测序和比对分析。药敏试验结果显示:对磺胺类耐药的分离株比例高达86.30%,对四环素类、氨基糖苷类、喹诺酮类、β-内酰胺类和氯霉素类耐药的比例分别为65.75%,60.27%,50.68%,50.68%,46.58%,对大环内酯类耐药仅为28.77%。PCR分析显示:97.26%的菌株中检测到耐药基因,多重耐药的占84.93%。其中喹诺酮类耐药基因Aac(6')-1b的检出率为76.71%,氨基糖苷类耐药基因AadA1的检出率为...
关键词：
副猪嗜血杆菌 耐药性 耐药基因
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李琳 赵霞 王磊 王文静 张瑞良 代兴杨 杨艳菲 徐园园
【目的】研究鸡源大肠杆菌成簇间隔短回文重复序列（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）与耐药性的关系，并对CRISPR进行生物信息学分析，为进一步研究CRISPR功能及其对细菌耐药的影响奠定基础。【方法】对从安徽省合肥地区养鸡场分离鉴定的130株鸡源大肠杆菌进行耐药性（16种抗菌药物）和CRISPR检测，分析CRISPR与鸡源大肠杆菌多重耐药的关系。挑选扩增出片段长度不同的12株大肠杆菌，对其CRISPR PCR产
[期刊] 中国农业科学
[作者]
曲志娜 刘红玉 王娟 赵思俊 李玉清 黄秀梅 盖文燕 王君玮
【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对249株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证实验,采用PCR方法、序列测定以及生物学分析软件进行ESBLs耐药质粒的DNA扩展和基因型分析,利用SPSS19.0软件对产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】83.13...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
曲志娜 刘红玉 王娟 赵思俊 李玉清 黄秀梅 盖文燕 王君玮
【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬＳ）表型和基因型检测试验，了解青岛地区肉鸡养殖场产ＥＳＢＬＳ大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征，分析ＥＳＢＬＳ流行基因型和基因亚型，为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ＥＳＢＬＳ菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对２４９株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验，采用ＣＬＳＩ推荐方法进行ＥＳＢＬＳ表型检测和确证实验，采用ＰＣＲ方法、序列测定以及生物学分析软件进行ＥＳＢＬＳ耐药质粒的ＤＮＡ扩展和基因型分析，利用ＳＰＳＳ１９．０软件对产ＥＳＢＬＳ菌株与非产ＥＳＢＬＳ菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】８３．１３．．．
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
杨文仪 肖家伟 雷连成 张付贤
为查明南京市某赛鸽公棚赛鸽出现腹泻、死亡的致病病原，本研究对采集的病料进行病原分离鉴定，分析致病菌的血清型、生物被膜表型、毒力基因、耐药菌谱，并对分离菌株进行了人工感染试验。研究表明：1)从患病鸽组织、拭子和粪便中分离出的细菌初步诊断为大肠杆菌O157;分离菌株在NA平板上长出白色、光滑的圆形菌落，在CT-SMAC平板上长出紫红色菌落。2)分离菌株的16S rRNA基因序列与大肠杆菌的相似性达98%～99%,命名为E.c.86246。3)血清学试验表明分离菌株为大肠杆菌O157:非H7菌株，动力试验进一步证实其为动力株。4)分离菌株携带tccp1014、eaeA和hly毒力基因，可导致雏鸡胃肠道出现不同程度的功能损伤，甚至导致死亡；其半数致死量为2.0×10~5 CFU/mL,具有较强的致病性。5)分离菌株携带tetA、tetM、sul2、aadA1和bla_(TEM) 5种耐药基因，具有较弱的生物被膜形成能力，对四环素、氨基糖苷类等抗菌药物严重耐药，对阿莫西林、氧氟沙星和诺氟沙星敏感。综上，本研究分离的鸽源大肠杆菌O157:非H7菌株，具有动力性，有较强的致病性和一定的耐药性，为大肠杆菌O157的流行病学调查、致病机理分析和抗菌药物的精准施治提供理论依据和数据参考。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李蓓 李旭林 郭丽娟 龙梅 郭放 何雪梅 罗燕 邹立扣
本实验分离大熊猫粪便样品中大肠杆菌,利用形态学和分子生物学方法鉴定菌株,采用药敏纸片扩散法(Kirby-Bauer)进行常用抗生素耐药性试验分析。结果表明,从抗生素大类来比较,耐药率依次为:四环素类(55.6%)>青霉素类(26.7%)>磺胺类(18.9%)>喹诺酮类(10%)>头孢类(7.8%)>氨基糖苷类(1.1%)>单环内酰胺类(0)、碳青霉烯类(0)。大肠杆菌对四环素的耐药率最高,达到55.6%;对头孢曲松、头孢他啶、氨曲南、亚胺配能及美罗配能等敏感,耐药率为0。其它抗菌药物耐药率依次是:阿莫西林(26.7%)>磺胺复合物(18.9%)>氨苄西林/舒巴坦(17.8%)>复方新诺明(11...
关键词：
大熊猫 大肠杆菌 分离 耐药性
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王红莉 刘丽娟 张德锋 尹纪元 石存斌 任燕 夏苏东 王庆
微生物制剂因其具有无毒害、无污染、低成本的优点在水产领域迅速发展，成为最具潜力的抗生素的替代产品。本研究通过对市场在售水产微生物制剂中的细菌进行分离培养与鉴定，以及抗生素药敏实验、耐药基因和可移动遗传元件的检测，评估水产微生物制剂源细菌的耐药性，为水产养殖中益生菌的筛选和安全应用提供科学依据。结果显示，分离得到的211株细菌可分为9个属，其中以芽孢杆菌属、肠球菌属、乳杆菌属为主。药敏实验结果显示，211株分离菌株中98株(46.7%)细菌表现为耐药。进一步对耐药性较强和多重耐药的79株细菌进行五大类(磺胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类和β-内酰胺类)耐药基因和可移动遗传元件检测。结果显示，79株耐药菌中携带耐药基因的菌株阳性率为74.7%,存在多重耐药基因的菌株高达40.5%,氨基糖苷类和磺胺类耐药基因的检出率最高，分别为53.2%和40.5%。可移动遗传元件(Tn916/1545)检出率为13.9%。综上可知，市售微生物制剂中发现了耐药菌株以及耐药基因，表明水产用微生物制剂存在一定的安全隐患，应加强对微生物制剂的安全性检测和风险评估。
关键词：
微生物制剂 分离 鉴定 耐药性 抗性基因
[期刊] 西南农业学报
[作者]
位朋 刘远飞 孙丽
用GYZ-15E和API-ID32E对菌株进行鉴定;用纸片扩散法和头孢硝基噻吩法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶;耐药情况采用纸片扩散法。大肠埃希氏菌的产酶率为53.85%,其中AmpC酶为28.57%,超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)为71.43%;产AmpC酶阳性株多为多重耐药菌;氨苄西林、阿莫西林、环丙沙星、三代头孢敏感性低,庆大霉素、氨曲南敏感率高。需要加强对大肠埃希氏菌产β-内酰胺酶的检测。庆大霉素、氨曲南是产β-内酰胺酶大肠埃希氏菌感染的首选药物。
关键词：
大肠埃希氏菌 β-内酰胺酶 耐药性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈朝喜 贺冬梅 汤承
【目的】针对大肠杆菌耐药性呈现逐年增加的趋势和牦牛疾病防控中抗菌药物使用存在的问题,对2009-2016年度采自川西北高原地区散养牦牛(包括健康和患病)的粪便、屠宰场宰杀牦牛的胃肠道内容物和病死牦牛的脏器1 908株大肠杆菌进行27种抗菌药物敏感性试验和整合酶基因检测,以了解川西北高原地区牦牛源大肠杆菌耐药性变迁规律和整合子携带情况,为牦牛安全用药提供参考。【方法】按照美国临床和实验室标准协会(NCCLS)推荐的微量肉汤稀释法对分离菌株进行最小抑菌浓度(MIC)测定,利用WHONet 5.6软件包对试验数
关键词：
川西北高原 牦牛 耐药性变迁 整合子
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王爽 邓向东 闫国栋 冯彩峰 代鹏飞 高彤彤 林居纯
【目的】对四川地区临床分离的４３７株健康动物源及８２株患病动物源大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）的耐药性及其机制进行研究，为临床合理用药提供理论依据。【方法】用３种氨基糖苷类药物和１１种非氨基糖苷类药物对分离的大肠杆菌进行药物敏感性试验（Ｋ－Ｂ纸片法）。选取至少耐１种氨基糖苷类药的大肠杆菌作为供试菌，通过ＰｃＲ检测其１６ＳＲＲＮＡ甲基化酶基因ＡＲｍＡ、ＲｍｔＡ、ＲｍｔＢ、Ｒｍｔｃ、ＲｍｔＤ、ＲｍｔＥ和ＮＰｍＡ；对阳性菌株进行质粒接合试验；并用Ｋ－Ｂ纸片法分析临床菌和接合子对抗生素的敏感性。【结果】４３７株健康动物源和８２株患病动物源大肠杆菌对１４种抗菌药物表现出不同程度的耐药性。健康动物源大肠杆菌对氨．．．
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