采用埋植和离体方法进行克氏原螯虾的大颚器（ＭＯ） 对卵巢发育作用的研究。埋植大颚器７ 次能显著提高成熟系数和促进卵径增大。处于不同卵巢发育时期的克氏原螯虾大颚器提取物（ ＭＯＥ） 的离体研究发现，卵黄发生期的ＭＯＥ对初级和次级卵黄发生期卵径增大均有极显著的作用，而对卵黄发生前期的卵径增大无作用。处于卵巢发育早期的ＭＯＥ对卵黄发生期卵巢小块总ＲＮＡ含量升高无显著作用；处于卵黄发生前期、卵黄发生期和恢复期卵巢的ＭＯＥ对卵黄发生期的卵巢小块总ＲＮＡ含量升高均有极显著作用。ＭＯＥ的作用基本与保幼激素类似物－ ＺＲ５１５ 相似。研究结果表明卵黄发生期卵巢对ＭＯＥ较敏感；卵黄发生期的ＭＯＥ 的生物效应最强...

法尼酸甲基转移酶(farnesoic acid O-methyl transferase,FA-O-MeT)具有催化法尼酸(farnesoic acid,FA)转变成甲基法尼酯(methyl farnesoate,MF)的功能。运用放射化学法对克氏原螯虾不同发育期大颚器(mandibular organ,MO)FA-O-MeT的酶活进行了分析,并探讨了眼柄因子对FA-O-MeT酶活的调控。结果表明,克氏原螯虾MO中的FA-O-MeT酶活左、右侧对称,差异不显著(P>0.05);FA-O-MeT酶活随卵巢发育呈周期性变化,次级卵黄发生期的MO酶活最高,达到61.75 pmol/(p.h);镊烫法...

【目的】探究晒田环境胁迫下克氏原螯虾卵巢发育相关生化指标和激素的变化及对卵巢发育的影响，为晒田环境胁迫促进克氏原螯虾卵巢成熟这一生产操作的改良和标准化提供理论依据，促进克氏原螯虾产业可持续发展。【方法】将2个面积为1300m~(2)的池塘中投放的克氏原螯虾分别作为晒田组和对照组，以晒田组排干水为试验起点，晒田组排水晒田10d，对照组正常养殖。分别在晒田环境胁迫0、3、7、10 d采集2组中的雌性克氏原螯虾，每次采样数量为30只，测量、称重后取卵巢、肝胰腺和血清，检测卵巢发育相关的生化指标[碱性磷酸酶（AKP/ALP）、酸性磷酸酶（ACP）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、前列腺素F2α（PGF2α）、前列腺素E2（PGE2）]、性类固醇激素[雌酮（Estrone）、17β-雌二醇（17β-E2）、睾酮（T）、孕酮（PROG）]、高血糖家族激素[高血糖激素（CHH）、性腺抑制激素（GIH）、蜕皮抑制激素（MIH）、大颚器抑制激素（MOIH）]和卵巢发育相关激素[蜕皮激素（Ecdysone）、甲基法尼酯（MF）、皮质醇（Cortisol）]，并进行对比分析。【结果】随着时间增加，晒田组雌性克氏原螯虾卵巢成熟率高于对照组，卵巢发育分期主要分布在IV期。生化指标试验结果表明，晒田胁迫0 d时，晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中AKP/ALP、ACP、GSH-Px、PGF2α和PGE2含量均显著低于对照组（P<0.05，下同）或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异（P>0.05，下同）；晒田胁迫3和7 d时，晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中生化指标含量均显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫10 d时，晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中生化指标含量均显著高于对照组雌性克氏原螯虾。性类固醇激素试验结果表明，晒田胁迫0和3 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中Estrone、17β-E2、T和PROG含量显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫7和10 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中性类固醇激素均显著高于对照组雌性克氏原螯虾。高血糖家族激素试验结果表明，晒田胁迫0 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中CHH、GIH、MIH和MOIH含量均显著高于对照组雌性克氏原螯虾；晒田胁迫3和7 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中高血糖家族激素含量显著高于、低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫10 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中高血糖家族激素显著低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异。卵巢发育相关激素试验结果表明，晒田胁迫0 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中Ecdyone、MF和Cortisol含量均显著高于、低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫3 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中卵巢发育相关激素显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫7和10 d时，晒田组中卵巢发育相关激素均显著高于对照组。【结论】晒田环境胁迫能促进克氏原螯虾卵巢成熟，加快卵巢发育相关生化指标和激素的变化。晒田胁迫7～10 d时，促进卵巢发育成熟的效果达峰值。

为了研究5-HT与DA阳性物质在克氏原螯虾(Procambrus clarkii)不同发育时期的卵巢细胞和肝胰腺细胞中的分布特征,运用免疫组化法对卵巢发育4个不同时期的卵巢与肝胰腺进行观察。结果表明,各期卵巢卵细胞和肝胰腺细胞中均存在5-HT与DA阳性物质。Ⅰ期卵巢5-HT阳性物质分布于卵母细胞胞核,胞质未出现阳性;Ⅱ期～Ⅳ期5-HT阳性物质主要集中在卵母细胞胞质以及胞核。在发育各期的肝胰腺中5-HT的免疫物质均呈阳性。Ⅰ～Ⅳ期卵巢中,DA阳性物质主要分布于卵母细胞的胞核以及肝胰腺细胞,其强度呈递减趋势。结果提示5-HT具有促进卵巢发育作用,而DA则抑制卵巢发育。

为了研究组织脂肪含量及脂肪酸组成在克氏原螯虾(Procambrus clarkii)卵巢发育过程中的变化,采用粗脂抽提及气相色谱分析法对卵巢发育5个不同时期肝胰腺和卵巢组织中脂肪含量及脂肪酸组成进行测定和分析,结果表明:(1)随着卵巢发育,卵巢指数由0.12%显著(P≤0.05)增加到6.64%,而肝胰腺指数由7.95%降至5.31%。(2)卵巢干重百分含量从Ⅰ期的22.29%增至Ⅴ期的55.16%,而干物质中的脂肪含量仅在Ⅱ期(32.38%)到Ⅲ期(41.90%)有一个显著增加过程,后期没有增加。(3)肝胰腺和卵巢中主要脂肪酸都有C16:0、C16:1n7、C18:0、C18:1n9、C18...

利用放射化学方法测定了克氏原螯虾大颚器中甲基法尼酯合成速率。结果发现，同一尾克氏原螯虾的左、右侧大颚器中甲基法尼酯的合成速率无明显差异（Ｐ＞０．０５）；雄螯虾甲基法尼酯的合成速率比雌螯虾大（Ｐ＜０．０５）；处于精巢发育期的雄螯虾甲基法尼酯合成速率明显大于发育前期的雄螯虾（Ｐ＜０．０５）；在雌螯虾卵巢发育周期中，甲基法尼酯的合成速率依次为：次级卵黄发生期＞初级卵黄发生期＞成熟期＞卵黄发生前期＞恢复期，表明大颚器合成甲基法尼酯与促进卵黄发生密切相关。

克氏原螯虾的大颚器为一对，位于左右大颚的背面，大颚几丁质腱外侧基部。大颚器含丰富的血淋巴管和血窦，大颚器细胞围绕血窦成短束状排列。典型大颚器细胞超微结构最显著的特征：①线粒体和光面内质网广泛分布于胞质中，光面内质网明显分成小池状和小管状两种类型；②细胞质膜内陷并作不同程度的卷绕；③质膜外侧的基膜增厚，富含微丝。在泡状化的大颚器细胞中，光面内质网几乎消失，线粒体形态变异，胞核中的异染色质沿核膜形成一圈，显示细胞合成能力改变，呈现细胞产物分泌后的状态。

对不同发育期的克氏原螯虾的肝胰腺和性腺指数进行了测定,并采用甲醇抽提的方法,利用电化学发光免疫分析仪测定了克氏原螯虾不同发育期的卵巢和肝胰腺中孕酮和雌二醇的含量变化。结果表明,随着卵巢发育,发育初期肝胰腺指数随着发育的进行逐步增加,到初级卵黄发声期到达最大值后随之下降。卵巢中孕酮和雌二醇含量随着卵巢发育的程度而逐步提高,在初级卵黄发生期到达峰值,随后逐渐下降,在肝胰腺中有着相似的趋势,但是峰值出现稍晚,在次级卵黄发生期。

运用体外放射化学方法研究孕酮对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)大颚器官(MO)生物合成甲基法尼酯(MF)的调控作用。结果表明,低浓度孕酮(10 pmol/L,100 pmol/L)对MO生物合成MF的抑制作用不明显;高浓度孕酮(1 nmol/L,5 nmol/L,10 nmol/L)对MF生物合成具有极显著的抑制作用(P<0.01)。表明较高的血淋巴孕酮水平对克氏原螯虾MO合成MF产生反馈抑制作用。研究中对涉及MF合成的眼柄-大颚器官-卵巢轴的调节机理作了探讨。

为确定克氏原螯虾(Procambarus clarkii)胚胎和幼体发育的最佳温度,设置19、22、25、28℃4个温度,观察各温度条件下克氏原螯虾胚胎和幼体发育过程,记录不同温度下胚胎和幼体阶段的成活率、发育速率、生物学零度和有效积温。结果显示:温度对克氏原螯虾胚胎孵化率、孵化时间及幼体发育速率和成活率均有显著影响,在试验温度(19～28℃)范围内,胚胎发育进程随温度升高而加快,19℃和28℃条件下胚胎孵化时间分别为(622.67±6.02) h和(349.67±4.63) h;胚胎孵化率随温度升高呈现"先升后降"的趋势,在22℃时孵化率最高,为91.03%±2.97%,28℃时孵化率最低,仅为40.53%±4.97%;幼体发育时间随温度升高而缩短,19℃和28℃条件下幼体阶段发育所需时间分别为(304.00±10.73) h和(194.00±9.03) h;幼体成活率随温度升高呈现"先升后降"的趋势,水温22℃时,成活率最高(94.37%±1.60%),水温28℃时,成活率最低(82.67%±1.51%)。采用Sanderson-Pearis公式,计算得出克氏原螯虾胚胎和幼体发育的生物学零度分别为7.32、3.29℃。根据所建立的胚胎和幼体发育的温度依赖性发育模型推算出,克氏原螯虾胚胎和幼体发育的最适温度分别为22.06和22.78℃。综合各项指标,建议克氏原螯虾人工繁育过程中胚胎和幼体发育的温度范围设置为22～25℃。

应用生物饲料饲养克氏原鳌虾并和普通饲料进行营养评价及养殖效果比较,通过对克氏原螯虾的生长速度和性腺发育指标的测定和观察,研究和评价生物饲料对克氏原螯虾的养殖效果。试验结果表明,生物饲料和普通饲料相比其氨基酸数量、种类更为齐全,尤其是必需氨基酸含量更为丰富、比例更为平衡,即两者的必需氨基酸指数EAAI有显著性差异(P<0.01)。生物饲料组和普通饲料组经2个月的比较饲喂养殖,平均生长速度(日均增重率)分别为1.75%,1.48%;性腺成熟系数、肝体比和相对怀卵量等指标经数理统计检验显示,在2种饲料之间均存在不同程度的差异性(P<0.05),即生物饲料对克氏原螯虾的生长和性腺成熟发育和普通饲料相比...

【目的】研究克氏原螯虾在晒田环境胁迫条件下卵巢组织学特点、卵黄蛋白原浓度及营养物质代谢水平的变化，探索其性成熟过程中体内营养物质变化相关机制，为晒田环境胁迫促进克氏原螯虾卵巢成熟这一生产操作的改良和标准化提供参考依据。【方法】试验对象分为晒田组与对照组克氏原螯虾，在晒田胁迫0、3、7、10 d时分别采集30只雌性克氏原螯虾，取卵巢进行石蜡切片和HE染色，并采集试验组的卵巢、肝胰腺和血清，检测卵黄蛋白原mRNA表达水平和浓度及营养物质代谢水平。【结果】雌性克氏原螯虾在晒田胁迫期间共鉴定出4个卵巢发育阶段，包括卵黄发生前阶段(I期，卵巢为黄色，卵母细胞直径150～250 μm)、初级卵黄发生阶段(II期，卵巢为橙色，卵母细胞直径250～600 μm)、次级卵黄发生阶段(III期，卵巢为棕色，卵母细胞直径高于600 μm)、成熟阶段(IV期，卵巢为黑褐色，卵母细胞直径高于1000 μm)。晒田胁迫0 d时，晒田组与对照组雌性克氏原螯虾卵巢成熟率相似；晒田胁迫10 d时，晒田组雌性克氏原螯虾卵巢成熟率升至96.67%，而对照组仅升至60.00%。随着胁迫时间增加，晒田组和对照组雌性克氏原螯虾的卵巢与肝胰腺的卵黄蛋白原mRNA相对表达量均呈上升趋势，且卵黄蛋白原mRNA在肝胰腺的相对表达量大于卵巢；试验期间，晒田组和对照组雌性克氏原螯虾卵黄蛋白原在肝胰腺的表达总量均大于在卵巢的表达总量，且卵黄蛋白原在肝胰腺的贡献率均大于在卵巢的贡献率。晒田组与对照组雌性克氏原螯虾卵巢、肝胰腺和血液中的卵黄蛋白原浓度均随时间增加呈现上升趋势；晒田组浓度上升幅度大于对照组，肝胰腺卵黄蛋白原浓度与卵巢卵黄蛋白原浓度、肝胰腺卵黄蛋白原浓度与血清卵黄蛋白原浓度、卵巢卵黄蛋白原浓度与血清卵黄蛋白原浓度呈极显著正相关（P<0.01）。随着晒田胁迫时间增加，晒田组和对照组雌性克氏原螯虾血蓝蛋白（Hem）、总蛋白（TP）、乳酸（LA）和葡萄糖（Glu）含量均呈现下降趋势，晒田组的下降幅度大于对照组；晒田组和对照组雌性克氏原螯虾甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）含量呈现上升趋势，晒田组的上升幅度大于对照组。【结论】晒田环境胁迫期间共鉴定出4个克氏原螯虾卵巢发育阶段。随胁迫时间增加，克氏原螯虾不同组织卵黄蛋白原mRNA相对表达量和浓度均呈上升趋势，卵黄蛋白原的肝胰腺贡献率大于卵巢贡献率。克氏原螯虾体内Hem、TP、LA和Glu含量降低，TG和TC含量升高，表明晒田环境胁迫对卵巢发育具有积极作用。

利用RACE技术获得了UB-E2基因c DNA全长,通过RT-PCR技术研究UB-E2基因在不同组织、发育时期的表达量和17α-羟孕酮激素刺激后UB-E2表达量及性腺发育情况。结果表明:该基因序列全长3 943bp,开放阅读框675 bp,编码224个氨基酸,相对分子量23. 93 ku,等电点8. 61,82～219位氨基酸序列为泛素结合酶家族特有的结构域。氨基酸序列比对发现,克氏原螯虾UB-E2基因与节肢动物UB-E2基因有较高的同源性;系统进化分析表明,UB-E2基因与凡纳滨对虾和斑节对虾聚为一支。荧光定量结果显示,UB-E2基因在克氏原螯虾卵巢组织中的表达量显著高于其他组织(P

根据哈氏仿对虾卵巢的组织学和外部形态特征 ,卵巢发育可分为六个时期 :形成期、小生长期、大生长期前期、大生长期后期、成熟期和恢复期。卵巢发育在浙江海区一年一个周期 ,产卵期为 5月至 9月 ,产卵高峰期在 6月至 7月 ,为多次产卵类型。

采用实验室内小规模实验的方法,在水温(26±1)℃的条件下,对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)胚胎发育过程中的形态学变化和发育时间进行了系统地研究。实验结果表明,克氏原螯虾的胚胎发育过程可以分为9个主要阶段:受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、前无节幼体期、后无节幼体期、复眼色素期、预备孵化期和孵化期;胚胎发育早期卵径无显著变化,保持在2 mm水平,仅在预备孵化期卵径开始显著增大;发育过程中胚胎的颜色逐渐加深,表现为橄榄绿色—灰绿色—灰褐色—棕褐色—红褐色—暗红色的变化趋势;水温26℃的条件下,整个胚胎发育过程需15 d左右;刚孵化出的幼体在形态结构上与成体相类似。