用无血清、无胚胎抽提液培养胚胎鹌鹑骨胳肌细胞,发现β-肾上腺素能激动剂克伦特罗(clcnbuterol10~3～10~7mol/L)能显著促进离休骨胳肌细胞的生长;异黄酮植物雌激素大豆黄酮和芒柄花素(10~9～10~7mol/L)无显著影响;黄酮类化合物槲皮素(10~7～10~6mol/L)具有促进作用,木犀草素10~6mol/L)则起抑制作用。

每天给小鼠灌服异黄酮植物雌激素芒柄花素(For)或大豆黄酮(Da)20mg/kg,连续7d,明显提高正常小鼠胸腺重量和腹腔巨噬细胞吞噬功能,提高空斑形成细胞的溶血能力和外周血 T 淋巴细胞百分率;体外试验表明:50μg/ml 的 For 或 Da 明显促进植物血凝素(PHA)诱导的甲基-~3H 胸腺嘧啶核苷(methyl-~3H Tdg)参入的淋巴细胞转化。

为探讨大豆异黄酮(SIF)对雌激素受体(ERα)和白细胞介素–2(IL–2)在去卵巢大鼠垂体各叶中表达的影响,对去卵巢大鼠皮下注射不同剂量的SIF(分别皮下注射1.5、1.0、0.5 mg/kg的SIF)和无水乙醇,另设假手术组,注射等量无水乙醇。待SIF处理至第2、6周时,于各组随机选取5只大鼠进行剖杀,分别对大鼠垂体中ERα和IL–2的蛋白及m RNA表达变化进行研究。结果显示,大鼠去除卵巢后,垂体各叶中ERα和IL–2的蛋白及m RNA表达强度和阳性细胞数均显著下降,补充SIF后有不同程度升高,其中

为探讨雌激素和雄激素对鸡胚额骨成骨细胞(OB)增殖、凋亡、细胞周期及其受体mRNA转录的影响,用雌激素(17β雌二醇)和雄激素(十一酸睾酮)单独以及联合处理鸡胚额骨成骨细胞,MTT法测定细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化,荧光定量PCR检测成骨细胞中雌激素受体(ER)及雄激素受体(AR)mRNA的转录。结果显示:一定浓度的雌激素或雄激素在24h内均能促进成骨细胞的增殖,促进成骨细胞的细胞周期进程,但对细胞凋亡无明显作用。雌激素单独或联合雄激素作用能上调ERmRNA的转录,对ARmRNA的转录无明显作用。

【背景】雌激素是雌性哺乳动物卵巢组织分泌的主要激素，其对肌肉的生长发育起着重要的调控作用，circRNA已被发现参与多种与肌肉生长发育相关的信号通路。【目的】根据团队前期卵巢摘除苏尼特羊与假手术苏尼特羊全转录组整合分析发现circZNF423可作为内源性竞争RNA(ceRNA)调控oar-miR-541-3p/CALM3的表达。为进一步探究雌激素在绵羊肌肉生长中分子机制，通过体外培养绵羊原代成肌细胞，检测成肌细胞中外源添加雌激素介导circZNF423调控oar-miR-541-3p/CALM3对成肌细胞增殖的影响，为进一步研究雌激素及circRNA在绵羊生长发育性状中的作用机制提供理论依据，为绵羊分子设计育种提供新的研究思路。【方法】采集绵羊背最长肌组织，对绵羊原代成肌细胞进行体外分离培养，通过免疫荧光染色、RNA原位杂交（FISH）和核质分离试验确定circZNF423在成肌细胞中的表达位置；RNAhybrid在线软件预测circZNF423、oar-miR-541-3p和CALM3存在结合关系，通过双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验验证circZNF423和oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p和CALM3结合情况；体外构建合成circZNF423过表达或干扰载体、oar-miR-541-3p的模拟物（mimics）或抑制剂（inhibitor）、CALM3过表达或干扰载体，在绵羊原代成肌细胞中进行转染，利用RT-qPCR、Western blot、EdU和CCK-8检测绵羊成肌细胞增殖标志因子的表达和成肌细胞增殖情况；为进一步明确雌激素在绵羊肌肉生长发育中的作用，体外添加不同浓度的外源性雌二醇（E2），利用RT-qPCR、Western blot、CCK-8和EdU检测绵羊肌细胞增殖标志基因的表达变化。【结果】免疫荧光染色显示分离的原代细胞为绵羊成肌细胞，可用于后续功能验证；RNA原位杂交和核质分离试验表明，circZNF423主要在绵羊成肌细胞质中表达。RNAhybrid、双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验结果表明，circZNF423与oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p与CALM3 3’UTR之间均存在显著的结合关系；抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后，绵羊成肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7 mRNA与蛋白表达水平一致，均显著上调（P<0.05或P<0.01）;EdU和CCK8结果表明，抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后，绵羊成肌细胞增殖率显著上升（P<0.05）；过表达circZNF423/CALM3或抑制oar-miR-541-3p后则相反。添加不同浓度外源雌二醇（E2）后，在浓度为10 nmol·L-1时绵羊成肌细胞增殖标志因子表达最高，显著高于1和100 nmol·L-1的添加浓度（P<0.05或P<0.01）；绵羊肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7mRNA和蛋白表达水平一致，均显著上调，circZNF423和CALM3的表达量显著降低，oar-miR-541-3p的表达量显著升高（P<0.05或P<0.01）;EdU和CCK8结果显示，体外添加雌二醇后绵羊成肌细胞增殖率显著升高（P<0.05）。【结论】绵羊成肌细胞中circZNF423作为ceRNA调控oar-miR-541-3p和CALM3的结合及表达，添加外源雌激素可通过抑制circZNF423/oar-miR-541-3p/CALM3通路促进绵羊肌肉细胞的增殖。这些结果为揭示雌激素及circZNF423在绵羊骨骼肌发育性状中的分子机制提供理论基础。

【目的】探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)对诱导雄性两栖动物肝细胞合成卵黄蛋白原(Vitellogenin,VTG)的影响。【方法】将中国林蛙(Rana chensinensis)雄性成体分别暴露在含10-7,10-6,10-5,10-4 mol/L DEHP的水体中,以自来水为对照,并分别于暴露20,30和40d时取肝脏制作石蜡切片,用免疫组织化学方法检测肝细胞中雌激素受体(Estrogen receptor,ER)和VTG的表达情况。【结果】用不同浓度DEHP处理后,林蛙肝细胞中ER和VTG的相对表达量均显著或极显著高于对照组,...

【目的】探究截除顶梢及植物生长调节剂诱导后马尾松Pinus massoniana内源激素质量分数变化对新枝生长与雌球花形成的影响。【方法】采用盆栽控制试验，以3年生209号马尾松无性系为试材，设置保留1层轮枝(T_1)、保留2层轮枝(T_2)、未截顶(NT)、未截顶+100 mg·L~(-1)赤霉素(GA_(4/7))(NT+G_(100))、未截顶+200 mg·L~(-1)GA_(4/7)(NT+G_(200))和未截顶+400 mg·L~(-1)GA_(4/7) (NT+G_(400))等6个处理，测定花原基形成前期(S_1)、花原基形成期(S_2)和花原基形成后期(S_3)的针叶内源激素质量分数及其比值的变化，研究各处理对雌球花密度和枝生长的影响。【结果】与NT相比，T_1处理的雌球花密度、枝长和枝粗分别增加126.00%、181.55%和35.78%,T_2处分别理增加66.52%～82.67%、119.31%～150.45%和9.17%～111.49%；与GA_(4/7)各处理相比，截顶处理后，除第1层轮枝处的枝长增长量显著(P<0.05)低于NT+G_(200)处理外，T_1和T_2处理的雌球花密度、枝长与枝粗增长量与GA_(4/7)其他处理间差异不显著。在S_1时期，与NT相比，T_1和T_2处理的针叶吲哚乙酸(IAA)质量分数分别显著(P<0.05)下降11.24%和9.62%，脱落酸(ABA)质量分数显著(P<0.05)增加15.09%和8.15%,GA_7、GA_4、玉米素核苷(ZR)质量分数下降，但差异不显著，(IAA+GA_7+GA_4+ZR)/ABA比值分别为7.22和7.61；在S_2时期，T_1和T_2处理下的针叶IAA、GA_7、GA_4和ZR质量分数均较S_1时期增加，ABA质量分数降低，(IAA+GA_7+GA_4+ZR)/ABA比值升高；在S_3时期，所测激素质量分数均较S_2时期降低。截顶与GA_(4/7)诱导后主要激素质量分数的变化趋势不同。在S_1至S_3时期，GA_(4/7)诱导后的IAA质量分数逐渐降低，GA_7、GA_4和ZR质量分数先增加后降低，ABA质量分数则先降低后增加。在截顶后20 d内，IAA、GA_7、GA_4和ZR质量分数呈先降低后增加的恢复特征，ABA质量分数呈持续下降的动态变化，截顶强度影响着不同轮枝处针叶IAA、GA4、ABA和ZR激素质量分数的变化。【结论】在花原基形成前期实施截顶和GA_(4/7)处理均可促进马尾松结实母枝更新和雌球花形成，与针叶内源激素质量分数的变化密切相关。图2表1参32

将β－受体激动剂克伦特罗（１ｍｇ／ｋｇ）和苯二氮卓化合物Ｆ８９（２ｍｇ／ｋｇ）同时添加在４１～５６，３８～５９和５～５６日龄红布罗肉鸡的日粮中，连续饲喂。饲养试验表明：试验组肉鸡的摄食量分别提高了４．４７％，３．３４％和５．３４％；增重分别提高了１３．６％（Ｐ＜０．０１），８．７２％（Ｐ＜０．０５）和９．９６％（Ｐ＜０．０５）。屠宰试验表明：试验组肉鸡的胸肌率和腿肌率都有明显提高，从而改善了肉鸡胴体组成，提高了瘦肉率。肉鸡的胸肌增加伴随着ＲＮＡ含量增多，而总ＤＮＡ含量保持不变，因此，试验组肉鸡的胸肌ＲＮＡ／ＤＮＡ值上升。添喂Ｆ８９和ＣＬ后，肉鸡血清尿酸和雌激素（１７β－Ｅ２）含量显著降低，而游...

对完全在淡水中人工饲养达到初次性成熟的暗纹东方鱼屯 (FuguobscurusAbe)亲鱼越冬后采用日粮中添加一种植物雌激素的方法强化培育 ,在温室中饲养亲鱼 10天 ,经一次注射催情激素 (雌鱼每千克PG2mg +LRH -A2 60 μg ,雄鱼减半 ) ,2 2℃水温条件下效应时间 4 8小时 ,湿法授精。结果 ,产卵率 70 % ,出苗率 3 6%。结论 :家养的暗纹东方鱼屯性成熟最小年龄提前一年 ;日粮添加植物雌激素强化培育亲鱼可以显著促进亲鱼性腺发育并顺利产卵 ,并提高出苗率

采用乳化二十八烷醇饲育小白鼠，并用组化染色方法检测了小鼠心肌及骨路肌磷酸果糖激酶（PFK），琥珀酸脱氢酶（SDH）、辅酶Ⅰ－四氮唑还原酶（NADH－Tr）以及ATP酶的活性。结果表明二十八烷醇对心肌及骨骼肌中四种酶活性均有增进作用，其中ATP酶活性与对照比较均有显著性差异。骨骼肌中Ⅰ型肌纤维中SDH与Ⅱ型肌纤维中的PFK分别与对照差异显著。结果说明二十八烷醇具有促进小鼠心肌及骨骼肌能量代谢的作用。

为了探讨植物生长调节剂对甘薯产量和激素含量的影响，以济薯１８、徐薯１８和商薯０１１０为试验材料，在开始进入块根膨大期时（移栽后第３５天），叶面喷施矮壮素·ＤＡ－６合剂和烯效唑，观察植物生长调节剂对不同生长类型甘薯的产量、光合作用和叶片、块根中的激素含量的影响。结果表明，植物生长调节剂处理促进同化物向根部的转运，提高了块根的产量。其中每ｈｍ２喷施１ ５００ ｍ Ｌ矮壮素·ＤＡ－６合剂处理显著提高了３个品种的产量，２２５ ｇ烯效唑处理显著提高了济薯１８和徐薯１８的产量。调节剂处理对不同类型甘薯光合作用的影响不同，矮壮素·ＤＡ－６合剂处理显著提高了徐薯１８的光合速率，而对济薯１８和商薯０１１０的光合．．．

【目的】以茶碱为参照,观察中药成分牛蒡子苷对原代骨骼肌细胞磷酸二酯酶(Phosphodiesterase,PDE)活性及蛋白质合成的影响,探讨中药通过抑制PDE促进肌肉生长的作用及机理。【方法】分离1～3日龄ICR小鼠四肢肌肉用于骨骼肌原代细胞培养,在培养至第5～6天时向培养基中添加不同浓度的牛蒡子苷和茶碱,以不含牛蒡子苷和茶碱的培养基为阴性对照,继续培养24h,采用HPLC、ELISA以及考马斯亮蓝法分别测定骨骼肌细胞cAMP PDE的活性、细胞内cAMP水平以及细胞总蛋白质合成。【结果】牛蒡子苷终浓度达到2.5μg·ml-1、茶碱终浓度为20μg·ml-1时均能极显著抑制原代培养骨骼肌细胞...

采用RT-PCR和RACE技术,克隆了奥利亚罗非鱼β雌激素受体基因(estrogen receptorβ,ERβ)两种亚型的cDNA全序列(ERβ1和ERβ2)。荧光定量PCR分析雌雄奥利亚罗非鱼两种亚型的组织分布,并观察注射外源雌激素对雄性奥利亚罗非鱼下丘脑-垂体-性腺轴雌激素受体ERα和β(β1/β2)基因表达的影响。序列分析表明,ERβ1cDNA全长为4262bp,其中包含239bp5′非编码区,2349bp3′非编码区和1674bp的开放阅读框,共编码557个氨基酸。ERβ2 cDNA全长为2506bp,包含5′非编码区393bp,3′非编码区109bp,阅读框为2004bp,共编码6...

为了探究黄颡鱼（Ｐｅｌｔｅｏｂａｇｒｕｓ ｆｕｌｖｉｄｒａｃｏ）肌细胞生成素（Ｍｙｏｇｅｎｉｎ，Ｍｙｏｇ）基因的组成结构、功能特性以及在雌雄个体组织中的表达差异，本研究利用ｒｔ－Ｐｃｒ和ｒａｃｅ技术克隆获得黄颡鱼Ｍｙｏｇ基因１３４６ ｂＰ全长ｃｄｎａ序列，其中序列包括６３ ｂＰ的５′非翻译区、５２１ ｂＰ的３′非翻译区和７６２ ｂＰ的开放阅读框（ｏｒｆ），ｏｒｆ编码２５３个氨基酸。氨基酸序列包含Ｍｒｆｓ基因家族的ｂａｓｉｃ结构域和螺旋–环–螺旋（ＨｌＨ）结构域，不含信号肽，没有跨膜结构，定位于细胞核内。氨基酸序列与蓝鲇（ｉｃｔａｌｕｒｕｓ ｆｕｒｃａｔｕｓ）同源性高达９４．１％，基于氨基酸序列．．．

以唐鱼卵黄蛋白原(Vtg)为检测指标,利用Native-PAGE电泳、唐鱼Vtg特异性脂蛋白染色和间接酶联免疫吸附(ELISA)技术分别检测了17β-雌二醇(E2)、壬基酚(NP)、多氯联苯(PCBs)、Cd2+、Zn2+及其混合物对唐鱼的雌激素效应。Native-PAGE结果显示,10μg/L、50μg/L E2水体暴露7、14 d均诱导雄性唐鱼体内合成了Vtg,E2对唐鱼的雌激素效应具有时间累积效应,并随浓度升高而增强。而ELISA检测结果则显示0.1、0.5、1.0μg/L E2 7、14 d和200、300μg/L NP 14 d暴露使唐鱼合成了Vtg。结果表明,NP、Cd2+、Zn2...