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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
赵宏伟 寇亚平 王轲永 张俊 刘桢 马男 赵梁军
为探讨光照对狗蔷薇类原球茎的发生和植株再生的影响,采用发光二极管(LED)调制获取不同光谱能量分布的光质配比(纯红光、偏红光(3∶1)、等比光(1∶1)、偏蓝光(1∶3)、纯蓝光),以荧光灯和黑暗作对照,结果表明:偏蓝光条件下狗蔷薇类原球茎的发生率最高,达64%;蓝光、偏红光以及荧光灯下PLBs发生率30%左右,黑暗情况下仅14%。在偏蓝光条件下平均每外植体产生的类原球茎量是其他光质下的2倍。PLBs萌发率在纯红光条件下达到30%,在红蓝混合光下达20%左右,纯蓝光下仅为17%。但在PLBs分化和萌发过程中,含红光条件下的PLBs萌发后更易形成假珠芽,最高达12%,蓝光下仅形成畸形苗。说明不同...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张建甫 毕玲 陈晓丽 郭艳超 赵梁军
【目的】以多种蔷薇属植物的叶片为外植体,研究影响类根体和类原球茎发生发育的影响因子,为进一步揭示类根体和类原球茎发生发育的机理及蔷薇属植物分子育种奠定基础。【方法】在MS基本培养基上,通过改变植物生长调节剂种类、浓度、培养条件和类根体与愈伤组织的完整性来观察并统计类根体和类原球茎发生发育情况。【结果】类根体的发生受生长素类调控,3种不同结构类型的生长素类物质诱导的类根体在数量和质量存在差异,其中2,4-D对类根体的诱导效应最明显,IBA次之,NAA最差,细胞分裂素不能诱导类根体的形成;形成高质量的类根体暗培养和是必需条件,与光暗培养差异极显著,类根体的发生率和每个外植体类根体数存在差异;相反,...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
郭艳超 张倩 田传卫 陈菊 赵梁军
以香水月季(Rosa odorata)的嫩叶为外植体,采用MS基本培养基,添加不同质量浓度的2,4-D、TDZ和IBA,研究了类原球茎再生植株的效果。主要步骤如下:1)嫩叶在MS+2,4-D1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+Gelrite3 g/L培养基上暗培养4周,愈伤组织诱导率达100%,愈伤组织上的类根体(rhizoid)发生率最高,生成率可达71%。2)类根体在含TDZ的培养基(1/2 MS+TDZ 13 mg/L+蔗糖30 g/L+Gelrite 3 g/L)上,分化成类原球茎束,诱导率达71.0%,平均类球茎束为2.1。3)类原球茎在含IBA的培养基(MS+BA 2.0 mg/L...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
魏喜 王倩华 葛晓阳 陈艳丽 丁颜朋 赵明哲 李付广
【目的】设置不同的光质组合,明确不同光质对棉花体细胞胚胎发生的影响,为提高棉花体细胞胚胎发生能力和加快棉花转基因过程提供依据。【方法】分别设置不同红蓝配比的光质组合B﹕R(蓝﹕红)=1﹕1、B﹕R(蓝﹕红)=3﹕1、B﹕R(蓝﹕红)=1﹕3和DL(日光灯),将CCRI12(中棉所12)棉花下胚轴切段依次在愈伤诱导培养基上(callus induction medium,CIM)、胚性愈伤组织诱导培养基上(embryogenic callus differentiation medium,ECDM)、体细胞胚诱导培养基上(embryoid induction medium,EIM)和再生植株诱导培养基(regenerated-plantlet induced medium,RIM)上培养。统计在4种不同光质配比下,体细胞胚胎发生各个阶段对应的指标,包括愈伤增殖率(callus proliferation rate,CPR)、愈伤增殖量、胚性愈伤分化率、体细胞胚数量、生根率、下胚轴数量、再生棉花植株数量、叶绿素浓度等。【结果】与B﹕R=1﹕3和DL光质组合相比,B﹕R=1﹕1和B﹕R=3﹕1的光质组合均显著促进了愈伤的增殖率,但抑制体细胞胚长出下胚轴;与B﹕R=1﹕1和B﹕R=3﹕1相比,B﹕R=1﹕3和DL光质组合均促进胚性愈伤分化和诱导体细胞胚的产生,在诱导下胚轴生根方面,B﹕R=1﹕1组合生根率明显高于其他3种处理;B﹕R=1﹕3和B﹕R=1﹕1处理后下胚轴成苗数、植株高度和叶绿素浓度明显高于B﹕R=3﹕1和DL光质组合,B﹕R=1﹕3的促进效果最明显。【结论】明确了不同光质组合在体细胞胚胎发生各个阶段的调控作用,在体细胞胚胎发生各个阶段可以选择性地应用最优的光质组合。其中红蓝配比为B﹕R=1﹕3的光质组合在整体上能促进棉花体细胞胚胎的发生。
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
胡恒康 江香梅 张启香 陈贝 黄坚钦
以山核桃Carya cathayensis花后10～12周的幼胚为外植体,建立体胚发生及再生体系,同时分别对山核桃胚性愈合组织和体细胞胚诱导的碳源种类和质量浓度进行了比较分析。结果表明:接种在含葡萄糖培养基中的山核桃胚性愈合组织诱导率显著高于蔗糖、海藻糖和麦芽糖,诱导率达33.3%;在培养基中添加20 g.L-1葡萄糖,胚性愈合组织诱导率最高,达50.0%,显著高于其他处理。蔗糖为山核桃体细胞胚诱导的最佳碳源种类,体细胞胚诱导率显著高于葡萄糖、海藻糖和麦芽糖,诱导率达23.3%;在培养基中添加45 g.L-1蔗糖,体细胞胚诱导率最高,达30.1%,显著高于其他处理。体胚在WPM培养基(木本植物...
[期刊] 林业科学
[作者]
杨玲 单琳 沈海龙 祁永会
以花曲柳合子胚的单片子叶为外植体成功诱导出体胚并获得再生植株。未成熟合子胚的子叶在添加400mg·L-1水解酪蛋白、0.25mg·L-16-BA、1.5mg·L-1NAA、70g.L-1蔗糖和6g·L-1琼脂的MS1/2培养基上可以成功诱导产生体胚,诱导率达到34.7%,每个外植体上体胚数量为2～9个。成熟合子胚的子叶在添加0.25mg·L-16-BA、2mg·L-1NAA的MS1/2培养基(其他成分同上)上可以成功诱导产生体胚,诱导率为10.0%。体胚在MS1/2培养基上经过成熟培养后可以正常萌发,萌发率87.6%。萌发的体胚植株在MS1/2+0.01mg·L-1NAA培养基上生长较好,具备...
[期刊] 林业科学
[作者]
韩珊 石大兴 王米力 麦苗苗
Somatic embryogenesis and regeneration plantlets were successfully induced from leaves of Euphorbia cotinifolia by tissue culture. The highest callus induction rate was 57.2% on MS medium with 6-BA 1.0 mg?L~ -1 ,NAA 0.5 mg?L~ -1 and 2,4-D 0.01 mg?L~ -1 . Embryonic callus could be induced on MS mediu...
关键词：
紫锦木 叶片 组织培养 体细胞胚
[期刊] 林业科学研究
[作者]
常英英 张启香 宋晓波 査巍巍 裴东
[目的]建立2种早实核桃高效和稳定的体胚发生体系,为离体快繁技术及其基础研究提供技术和理论支撑,也为核桃遗传转化体系的构建奠定基础。[方法]分别以实生核桃‘林早香’和嫁接核桃‘中林6号’花后42～77 d的幼胚为试材进行离体培养,通过统计体胚诱导率,筛选体胚的最佳诱导时期;统计多次继代的体胚畸变率,并筛选最适ABA调节浓度;选取发育成熟的体胚进行饱和NH_4NO_3溶液脱水处理,分别处理0、24、48、72、96和120 h后统计失水量和转株率,探讨脱水程度对体胚植株再生的影响。[结果]外植体的发育时期对体胚发生至关重要,以‘林早香’和‘中林6号’幼胚为外植体进行体胚诱导,最佳诱导时期分别为花后约49 d和56 d,体胚诱导率分别为88.32%和86.67%。体胚经多次继代培养后产生较高畸变率,适量ABA处理不仅降低体胚畸变率,且提高体胚发生率,最佳ABA调节浓度为1.0 mg·L~(-1)。随着体胚脱水时间的延长,体胚失水量逐渐增加,植株再生率先升高后降低,脱水72 h时,‘林早香’和‘中林6号’的体胚萌发率达到最高,分别为56.67%和53.33%,此时失水量分别为38.73%和40.56%。[结论]早实核桃幼果发育过程中,合子胚的体胚发生率随着发育时期变化,适宜发育时期是提高体胚诱导发生的关键;适量ABA在体胚多次继代培养过程中对畸形胚起重要调节作用;适度的脱水处理对核桃体胚再生具有良好的促进作用。
关键词：
早实核桃 体细胞胚 植株再生
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
张启香 付素静 方炎明 陈娜
以铁皮石斛Dendrobium officinale的茎尖为外植体,在特定条件下诱导产生拟原球茎,进一步培养形成幼苗。结果表明:原球茎最优诱导培养基为1/2MS(Murashige and Skoog)+0.5mg·L-16-苄基嘌呤(6-BA)+0.05mg·L-1萘乙酸(NAA)+0.1mg·L-1激动素(KT)+1.0g·L-1水解乳蛋白(LH)。复合添加物的试验表明,土豆汁对拟原球茎(PLBs)的增殖有很好的促进作用。对铁皮石斛拟原球茎的解剖学研究表明:拟原球茎是由位于顶端分生组织下的薄壁细胞脱分化形成的胚性细胞发育而来。外植体接种后20d左右外植体基部开始膨大,40d左右出现肉眼可见...
[期刊] 林业科学
[作者]
习洋 胡瑞阳 王欢 孙鹏 袁存权 李允菲 戴丽 李云
以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响。结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D5.0mg·L-1+BA0.5mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42%±0.02%;MS+NAA0.5mg·L-1+BA0.5mg·L-1+谷氨酰胺250mg·L-1+水解酪蛋白500mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40%±0.12%,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90...
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙京燕 李伟明 张寒霜 赵俊丽 尹晓琳 王立安
选用低酚陆地棉无菌苗下胚轴为材料进行全固体组织培养,直接诱导获得了胚性愈伤组织,并进一步分化为再生植株。结果表明,激素是影响棉花直接体细胞胚胎发生的重要因素。MSB培养基中添加2,4-D有利于愈伤组织的形成,却不能直接诱导获得胚性愈伤组织。MSB培养基中添加IBA和BA也不能直接诱导获得胚性愈伤组织。MSB培养基附加适当浓度的IBA和KT能直接诱导出胚性愈伤组织。最适激素组合(1.0 mg/L IBA,0.5 mg/L KT)能使诱导棉花下胚轴产生大量胚性愈伤组织,并且在3个月内就可肉眼观察到不同发育时期的胚。MSB培养基中附加1.0 g/L谷氨酰胺和0.5 g/L天门冬酰胺有利于胚萌发成苗。...
关键词：
棉花 低酚 体细胞胚胎发生 植株再生
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孙兴民 余智莹 张萌 董瑞奇 陶建敏
以二倍体和四倍体葡萄杂交获得的未成熟合子胚为材料,诱导体细胞胚发生。采用的初生胚诱导培养基(SE培养基)为:NN69+1.80 mg.L-1NAA+0.4 mg.L-1水解酪蛋白+2 g.L-1活性炭+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂;次生胚诱导培养基分别为:3/4MS+0.35 mg.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(扩繁培养基)和MS+1.5 g.L-16-BA+0.2 g.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(胚状体萌发培养基)。结果表明:初生胚诱导率为11.11%和16.67%,体细胞胚在扩繁培养基上再生植株。利用流式细胞仪和SSR标记检...
[期刊] 林业科学
[作者]
王伟达 李成浩 杨静莉 张含国 张淑玲
以未成熟合子胚为外植体,建立杂种落叶松胚性愈伤组织诱导和植株再生体系。从日本落叶松5×长白落叶松77-3和日本落叶松5×兴安落叶松9两个家系诱导出胚性愈伤组织,授粉后65天左右采集的合子胚在添加0.5mg·L-12,4-D+0.5mg·L-16-BA+0.5mg·L-1KT的S培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,为10%。从胚性愈伤组织中筛选出3个具有稳定分化能力的胚性细胞系,其中授粉后65天采集的日本落叶松5×长白落叶松77-3合子胚诱导的胚性细胞系的每克胚性愈伤组织形成的体胚数、体胚萌发率、植株再生率最高,分别为18.1个,77.0%,28.1%。再生植株的移栽成活率为41.8%。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张德双 曹鸣庆 秦智伟
取花蕾长３．０～５．５ｍｍ的花序，７％（Ｗ／Ｖ）饱和次氯酸钙溶液（加一滴吐温２０）表面消毒１５ｍｉｎ，无菌水洗３次。然后轻压花蕾，过滤，收集滤液，离心后，将小孢子悬浮于经过滤灭菌的改良的１／２ＮＬＮ培养基中。石蜡膜封口，置温度梯度培养箱作３２．５℃、１ｄ的高温热激诱导处理，后置２５℃下继续培养。本试验对１３份绿菜花供试材料的游离小孢子培养能力进行初步研究，其中８种基因型（占全部材料的６１．５％）有胚胎发生，并获得５种基因型的再生株，共２０７株。基因型对绿菜花游离小孢子培养的影响很大，基因型“巴绿青花菜”出胚率最高，达３７．０８胚／蕾。同时，对培养基中加入活性炭悬浮液和更换培养基的作用进行了研究...
[期刊] 林业科学
[作者]
李清清 叶建仁 朱丽华 吴小芹
以未成熟合子胚为外植体,建立黑松体细胞胚胎发生和植株再生体系。研究基本培养基、2,4-D和6-BA对胚性愈伤组织诱导的影响,探讨ABA和PEG对体细胞胚成熟及植株再生的影响。结果表明:在添加4mg·L-12,4-D+2mg·L-16-BA的DCR培养基上胚性愈伤组织诱导率为3.33%;在添加30mg·L-1ABA+25g·L-1PEG的培养基DCR上,每克愈伤组织体细胞胚数量达72个,体细胞胚的萌发率为63.8%、植株转化率为43.5%,高质量的黑松体胚能提高体胚萌发率和植株转化率,再生植株1个月移栽成活率为50%。该研究可为抗病黑松的快速大规模繁殖提供一条新途径。
关键词：
黑松 胚性愈伤组织 体细胞胚 植株再生
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