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[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
李昌珠 王丽华 陈建华 蒋丽娟 李培旺 张良波
为获得高质量的原生质体,给光皮树转化系统的建立奠定基础,以光皮树花药愈伤组织为材料,研究了愈伤组织结构、酶液组合、酶解时间及渗透压对原生质体分离效果及活力的影响,从而确定适合光皮树花药愈伤组织原生质体最佳分离条件。结果表明:淡黄绿色、疏松的愈伤组织在CPW+2%纤维素酶R-10+0.3%蜗牛酶+0.25%果胶酶Y-23+13%甘露醇+0.6/L MES的酶解液中,黑暗条件下振荡酶解10 h,原生质体产量达到3.19×106个/g,具活力的原生质体为73.48%。
关键词：
光皮树 花药愈伤组织 原生质体 分离条件
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
史永忠 万蜀渊 薛光荣
草莓花药愈伤组织经５次继代培养，生长旺盛，质地松软，可用于原生质体的分离。在含０．１％ＰｅｃｔｏｌｙａｓｅＹ－２３，０．５％纤维素酶（ＯｎｏｚｕｋａＲ－１０），０．５％离析酶（ＭａｃｅｒｏｚｙｍｅＲ－ｌ０）的混合酶液中酶解１３ｈ，原生质体的产量为１．４７×１０￣６／ｇＦＷ，活性６７．３５％。原生质体采用液体浅层和琼脂糖包埋培养，获得了肉眼可见的多细胞团。
关键词：
草莓,原生质体培养,再生细胞团
[期刊] 湖南农业大学学报
[作者]
胡家金 甘霖 熊兴耀 肖浪涛 张秋明
由美味猕猴桃东山峰 79- 0 9品种诱导产生的 4种类型愈伤组织 ,其分离原生质体的效果不同 :A型愈伤组织分离的原生质体数量多 ,但活力较低 ;B型愈伤组织分离的原生质体不仅数量较多 ,而且活力也高 ;C型愈伤组织分离的原生质体数量少 ,但活力高 ;D型愈伤组织分离的原生质体数量较多 ,但活力低
关键词：
美味猕猴桃 原生质体分离 愈伤组织 筛选
[期刊] 华北农学报
[作者]
程增书 高志强 方仁
从小麦ＣＫ８９、１０２、１１３的花药和花冬的约穗诱导愈伤组织的继代培养中，选择致密颗粒型愈伤组织，转入附加２，４－Ｄ２～４ｍｇ／Ｌ改良ＭＳ固体培养基上进行继代培养，６～１０周后形成生长迅速的胚性愈伤组织，这种愈伤组织分离原生质体得率为１～３．７×１０７个／ｇ。原生质体于ＰＣＭ２培养基上琼脂糖包埋培养，３～５天出现第一次细胞分裂，７～１４天进行第二、第三次细胞分裂，两周后形成大量细胞团，细胞分裂频率达２０．３％～７３．３％，４～６周后形成肉眼可见愈伤组织。供试４个基因型中，ＣＫ８９、１０２和花冬均形成再生愈伤组织，仅１１３形成多细胞团。愈伤组织增殖分化实验尚在进行中。
关键词：
小麦,胚性愈伤组织,原生质体培养
[期刊] 中国农业科学
[作者]
文峰 肖诗鑫 聂扬眉 马秋香 张鹏 郭文武
【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol.L-1TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol.L-1TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1—2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
吕长平 石雪晖 徐艳 叶云
为建立良好的刺葡萄原生质体分离体系,利用原生质体融合技术对刺葡萄进行品种改良,以刺葡萄叶片、根尖和愈伤组织为材料,研究了经不同酶液组合和酶解时间处理,再经过0.45μm筛网过滤,1000r/min低速离心后分离产生原生质体的情况.试验结果表明,原生质体分离材料以愈伤组织最好,叶片次之,根尖最差;4次以内继代培养的愈伤组织,经2%纤维素酶+0.5%果胶酶+1%离析酶的酶液组合酶解8h后,原生质体的产量为5.12×106个,活力为88.57%.
关键词：
刺葡萄 原生质体 分离 酶液
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘艳丽 姚家玲
以盾叶薯蓣叶片、种子愈伤为材料,探讨了不同的酶浓度、酶解时间及渗透压对原生质体分离的影响。结果表明:生长5~10 d的叶片置于0.6%纤维素酶、0.5%果胶酶、0.9 mol/L甘露醇的酶液中、黑暗处理21 h,其原生质体产量和活力最高;悬浮培养5~10 d的愈伤组织在2.0%纤维素酶、1.0%果胶酶0、.7 mol/L甘露醇的混合酶液中黑暗处理6~8 h原生质体产量和活力最高。
关键词：
盾叶薯蓣 原生质体 分离
[期刊] 水产学报
[作者]
谢恩义 马家海
为了开发礁膜人工育苗的新技术,以4％果胶酶和2％纤维素酶的甘露醇溶液,分离酶解经无菌处理的礁膜叶状体,在40mmol·L~(-1)CaCl_2,0.7mol·L~(-1)甘露醇,pH5.5,温度28℃,摇床速度50r·min~(-1)旋转振荡3h的条件下,1.0g湿重礁膜可获原生质体约2×10~6个。原生质体分离后依次用比重为1.030、1.026、1.022的消毒海水(添加N、P、Fe~(2+)、IAA、KB、Vit C)培养,2d后已形成明显的再生细胞壁,3～4d后细胞开始分裂,8d后形成由4～8个细胞组成的细胞团,以后原生质有不同的发育形态,较常见的是形成由一共同胶质膜包被的类似亲本的叶...
关键词：
礁膜 原生质体 酶解 分离 培养
[期刊] 林业科学研究
[作者]
孔繁翔
从菌根真菌黑核菌（Ｃｅｎｏｃｏｃｃｕｍｇｅｏｐｈｉｌｕｍ）菌丝分离出原生质体，并获得再生菌落。研究了预处理方法及不同水解酶组合，酶解温度和菌丝密度对原生质体产率的影响。在用胰蛋白酶（２０μｇ．ｍＬ－１）预处理后，以０．８Ｍ山梨醇为渗透压稳定剂，温度为２０Ｃ，ｐＨ５．５及纤维素酶，溶解酶侧浸解酶处理，可获得较高的原生质体产量。在固体及液体再生培养基中，原生质体均可形成再生菌落，再生率为１％～５％。葡萄糖－６－磷酸脱氢酶和甘露醇脱氢酶活性测定结果表明，分离出的原生质体具有较高的生理活性。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
李正红 孙振元 刘秀贤 彭镇华
用纤维素酶、果胶酶、甘露醇的混合酶液提取地锦和五叶地锦无菌苗幼叶、五叶地锦胚乳愈伤组织及地锦幼胚愈伤组织的原生质体,对影响原生质体提取得率及活力因素进行分析,对不同材料原生质体得率进行比较,对提取的原生质体进行液体浅层、固液结合及固体等方式培养,对原生质体形成的愈伤组织以MS和改良B5培养基附加不同浓度NAA、6 BA、2,4 D、PEG、KT、ZT等进行分化培养。试验结果表明:纤维素酶对原生质体提取得率有极显著影响,适宜地锦幼叶原生质体提取的酶液组合为:纤维素酶0.5%、果胶酶0.3%、甘露醇0.6mol·L-1、酶解8h;不同材料原生质体提取得率有显著差异;仅五叶地锦胚乳愈伤组织来源的原生...
关键词：
地锦 五叶地锦 原生质体 培养
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
付春华 郭文武 邓秀新
原生质体是植物遗传改良的重要实验体系之一,而原生质体的分离是该体系的基础。对柑橘叶肉原生质体来说,柠檬、橙类等品种的叶肉原生质体比较容易分离,而柚类、橘类等柑橘品种则相对困难。本研究采用椪柑、黄岩本地早、沙田柚、冰糖橘4个品种为试材,枳壳试管苗为对照,系统研究了不同基因型、不同叶龄、不同酶种类、不同酶液组合对叶肉原生质体分离的影响,探讨了影响柚类、橘类等柑橘叶肉原生质体分离的因素,从中找出了各品种较适宜的分离条件。在适宜条件下,4种供试品种的原生质体得率(FW)可达10×106~20×106g-1。
关键词：
柑橘 叶肉原生质体 分离
[期刊] 华北农学报
[作者]
周延清 苑保军 张根发 卢龙斗
用决明（ＣａｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａＬ．）子叶和下胚轴为材料，游离和培养原生质体。结果表明，１５日龄无菌苗的子叶和下胚轴比较适于游离原生质体，每１ｇ材料的原生质体产量高达１．６×１０４个；ＰｅｃｔｏｌｙａｓｅＹ－２３是分离原生质体所必需的；用含２，４－Ｄ０．４ｍｇ／Ｌ（以下单位同），ＮＡＡ１．０与ＫＴ０．１的ＫＭ８Ｐ漂浮培养利于原生质体的分裂。培养４ｄ后，原生质体开始分裂，１５ｄ后其植板率约为１９．２％，３０ｄ形成了细胞团或小愈伤组织。增殖愈伤组织在分化培养基上培养，可分化出芽。芽在生根培养基上培养１４ｄ生根，从而再生决明小植株。
关键词：
决明,原生质体,再生植株
[期刊] 华北农学报
[作者]
王培 陈玉蓉 王峰 何萍
从Ｈ１花药单倍体试管苗基部，取尚未分化绿苗的胚性愈伤组织建立的体细胞无性系，获得４丛Ｒ１结实株系。从田间Ｒ２的观察中发现，Ｒ１的４株后代中有１株４个穗繁衍的８６个单株发生了变异，Ｒ２的株系变异率为２５％。经过这株变异的Ｒ２、Ｒ３的株高连续观察发现：株高变异范围均很大，并有超亲现象，Ｒ２的变异大于Ｒ３；穗系间和穗系内的变异均极显著，穗系间变异大于穗系内变异；Ｒ３有８．１４％的株系已稳定；Ｒ２和Ｒ３的株高呈显著正相关。
关键词：
冬小麦,花药愈伤组织,无性系,株高,遗传
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孙玉强
根据增加棉花基因库多样性的迫切需要,棉花改良计划正在转向于多种分子育种技术的应用和资源的利用。丰富的棉花野生种(Gossypiumspp.)是栽培棉遗传改良重要的种质资源和更新资源,并成为宝贵的遗传资源库,野生棉研究利用对栽培棉的遗传改良有着重大的现实和理论意义及潜在的应用
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
刘晓荣 陶承光 吕书文 杨国栋 王平
以5个番茄F1杂交种为试材,研究了基因型、植物生长调节剂、变温处理和椰乳对愈伤组织发生及植株再生的影响,旨在优化番茄花药培养的技术方法。结果表明:不同基因型愈伤组织发生率不同;培养基中添加0.5mg·L-1的2,4-D较NAA,5个材料的愈伤组织平均诱导率提高了10.04%;4℃48h+33℃72h的处理对愈伤组织的诱导有明显的促进作用;培养基中加入50mg·L-1的椰乳可提高愈伤组织诱导率。植株再生的较优培养基为MS+0.2mg·L-1 IAA+2.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1ZT。基因型和培养基是愈伤组织的发生和植株再生的主要影响因素;适当的低温处理配合高温热激,及在培养基中...
关键词：
番茄 花药培养 愈伤组织 植株再生
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