以常规籼系明恢86、七山占、中优早8的成熟胚为外植体,通过根癌农杆菌介导法,建立了一种光照培养条件下的新型籼稻成熟胚高效再生和转化体系。结果表明,籼稻在MS+4%麦芽糖+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1 mg/L IAA+0.5 mg/L 6-BA+2.878 g/L L-脯氨酸+1 g/L水解酪蛋白,于32℃持续光照10 d左右,可获得愈伤组织的平均诱导率约为84.9%;愈伤组织在MS+2 mg/L KT+1 mg/L IAA+2 mg/L 6-BA+1 g/L水解酪蛋白的培养基上再生率达到80.4%。建立在上述再生体系基础上的GUS基因的瞬时表达率为55.8%。

籼稻成熟胚培养由于取材容易,因此在转基因研究中具有广泛的应用前景.但籼稻成熟胚愈伤组织诱导率不高,继代易褐化,分化率不高,严重阻碍着基因工程技术在水稻育种中的应用.本研究选用了27不同类型的籼稻品种和常规粳稻品种作为实验材料,在同一培养方式下,分析了不同籼稻品种成熟胚愈伤组织诱导率和分化率之间的差异及籼稻品种与粳稻品种成熟胚愈伤组织诱导率与分化率之间的差异,为目前应用细胞工程和基因工程技术来改良籼稻品种提供理论依据.获得了如下主要研究结果:水稻基因型是影响籼稻成熟胚组织培养力高低的关键因素;籼型杂交水稻不育系和保持系比常规籼稻品种、杂交水稻F1种子和恢复系品种成熟胚的培养力低;杂交水稻F1种子...

以文冠果成熟胚为外植体,进行了初代培养、继代培养和生根培养研究,结果表明:初代培养诱导文冠果成熟胚形成不定芽的适宜培养基是MS+2.0mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,分化率可达94.7%;继代高生长的适宜培养基是MS+0.5mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,培养50d后,苗高大于0.5cm芽数量平均达11.67株;生根培养的适宜培养基是WPM+1.0mg.L-1IBA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,生根率为70.30%,平均根数为3.57条。并通过石蜡切片技术,观察愈伤组织诱导、愈...

以沈阳农业大学植物园内 30a生水曲柳 (Fraxinusmandshurica)为试材。分别于 2 0 0 0年 7月和 8月取水曲柳幼果 ,用 0 1%的HgCl2 进行表面消毒 ,在无菌条件下取出未成熟胚进行诱导培养。在胚成苗后进行继代培养和生根培养。培养结果表明 :在水曲柳胚的发育初期 ,进行胚培养不易成功 ;但当幼胚分化成子叶和胚根时 ,进行胚培养 ,胚的成活率和成苗率均较高。不加任何激素的WPM、MS、DKW和SH培养基都可以作为水曲柳未成熟胚培养的培养基。水曲柳组培苗继代培养的外植体分化率低 ,最高只能达到 2 12 5苗·月 - 1 (培养基为WPM +BA 1mg·L- ...

本文对不同浓度的PSK-α在水稻成熟胚的愈伤诱导、愈伤继代和分化过程中效应进行了研究。结果表明,在成熟胚诱导效率方面,N6和NB培养基优于MS和CC培养基;在同一培养基上,不同浓度的PSK-α对成熟胚的诱导效率不同;同一浓度的PSK-α对不同品种的成熟胚诱导效应不同。明恢63在50 pmol/L PSK-α的MS培养基上、CDR22在300 pmol/L PSK-α的N6培养基上、蜀恢527在100 pmol/L PSK-α的NB培养基上、地谷在100 pmol/L PSK的N6培养基上成熟胚诱导效率较好,分别达到24%、79.0%、85.4%和67.9%。PSK-α对愈伤的继代没有促进作用,...

【目的】研制适应性广的不同类型水稻成熟胚再生技术。【方法】采用生产上应用价值高的不同类型水稻品种成熟胚为外植体材料,比较研究9个粳稻、9个籼稻和11个新近培育的超级杂交稻(两系或三系)或优势组合在不同培养基中的出愈、分化和再生等组织培养力表现。【结果】以M8为基本培养基,在添加30g·L-1蔗糖、8g·L-1琼脂和2mg·L-12,4-D(2,4-苯氧乙酸)相同成分的基础上,供试粳稻材料单独添加较低浓度的细胞分裂素,即0.3mg·L-16-BA(6-苄基嘌呤)可获得较高的出愈率,出愈率在89.2%-61.7%之间;而供试籼稻材料则需在添加2mg·L-16-BA和0.5mg·L-1KT(激动素)...

该文对以‘淡丰后’为母本,真梅系不同类型品种为父本杂交种的成熟胚培养进行了研究.建立了3个杂种无性系.经过实验对比,筛选出最适合成熟胚萌发的培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L,最佳增殖培养基为改良MS+6-BA 1.0～1.5mg/L,适宜的生根培养基为1/2改良MS+IBA 0.5mg/L.

油松(Pinus tabulaeformis)是我国特有的针叶树种,木材坚实,富含松脂,耐腐朽,是优良的建筑、电杆、枕木、矿柱等用材。油松是北方的主要造林树种之一,它分布广,适应性强,根系发达,树姿雄伟,枝叶繁茂,有良好的保持水土和美化环境的功能(徐化成,1993)。近期关于油松的研究主要有油松林水分平衡(常建国等,2013)、球花与花粉管(钮世辉等,2013;尚峰男等,2013)、光照对幼苗的影响(冯晓燕等,2013)、人工林更新(李兵兵等,2012)

由银杏（ＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．）成熟胚诱导的淡绿色、疏松愈伤组织经过继代培养后在部分疏松愈伤组织上又形成致密愈伤组织，并在ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０５ｍｇ／Ｌ的培养基上从致密愈伤组织中诱导胚状体发生并达到心形胚阶段。细胞组织学的观察表明，胚状体起源于愈伤组织表面的胚性细胞。

研究了向日葵未成熟胚培养中不定芽的发生情况,结果表明,向日葵子叶(?)未成熟胚再生不定芽的能力很强,下胚轴较子叶容易产生不定芽;基因型和培养基是影响不定芽再生频率的重要因子.基因型不同,其不定芽的再生频率差异很大.本实验中大多数基因型都能诱导出不定芽.再生频率在40%以上.最高的达91%.自交系、杂一代和保持系的再生频率高于普通品种.培养基中高含量蔗糖及适宜的6—BA含量有利于不定芽的发生.由不定芽培育出的绿苗在温室条件下,大部分可以正常开花结实.

【目的】对日本抗性黑松体细胞胚成熟的影响因子进行研究,探究各因素在体细胞胚发生过程中的作用,为进一步提高体细胞胚发生的质量和数量提供理论依据。【方法】胚性细胞团在固体增殖培养基上继代生长10天,使用灭菌(75%乙醇擦拭、紫外灭菌30 min)的电子天平称量1 g胚性细胞团,采用50 mL无菌量筒(紫外灭菌30 min)量取30 mL培养液中于100 mL的三角瓶中,将1 g胚性细胞团转至100 mL的三角瓶中,手动搅拌至细胞团分散,置于90 r·min~(-1)摇床上,25℃黑暗培养7～8天。随后,取3 mL沉淀悬浮细胞进行继代增殖,每星期继代增殖一次至胚性细胞全部均匀散落于培养液。将继代4次的胚性细胞充分摇匀,取2 mL(鲜质量约200 mg)胚性悬浮细胞喷洒在不同组分麦芽糖(30、45、60 g·L~(-1))、脱落酸(ABA)(0、5、10、20、30、50 mg·L~(-1))、聚乙二醇(PEG8000)(0、50、75、100、125、150 g·L~(-1))、活性炭(AC)(1、2、3 g·L~(-1))、琼脂(琼脂6、8、10、12 g·L~(-1),植物凝胶2、2. 5、3、3. 5 g·L~(-1))以及麦芽糖、ABA、PEG 3因素的组合固体成熟培养基上。【结果】以#1337为材料的体细胞胚成熟发育过程中,麦芽糖45 g·L~(-1),获得的体细胞胚数量显著增多。ABA浓度为5～20 mg·L~(-1),体细胞胚数量呈显著上升趋势,ABA为20 mg·L~(-1)时,获得的体细胞胚最多。125 g·L~(-1)PEG8000为体胚发生最佳浓度; AC 2 g·L~(-1)时,胚性细胞形成结构完整、数量较多的成熟体胚;成熟培养基中添加琼脂粉,培养基不能凝固,植物凝胶更适合作为成熟培养基凝固剂。3 g·L~(-1)植物凝胶为抗性黑松体胚发育成熟的最佳浓度。在设计的9种成熟培养基组合中(胚性细胞#1337、#1537、#1637),胚性细胞产生体细胞胚最多的成熟培养基组合为麦芽糖45 g·L~(-1)、ABA 10 mg·L~(-1)、PEG8000 125 g·L~(-1)。在不同的麦芽糖、ABA和PEG组合中,不同无性系生产体细胞胚数量呈现出不同的变化趋势:胚性细胞系#1337体胚发育成熟的最佳组合为麦芽糖45 g·L~(-1)+ABA 10 mg·L~(-1)+PEG 125 g·L~(-1);#1537和#1637体胚发育成熟的最佳组合为麦芽糖30 g·L~(-1)+ABA 10 mg·L~(-1)+PEG 125 g·L~(-1);在3个无性系中PEG的极差最大,对抗性黑松体细胞胚发育成熟的影响最大。【结论】抗性黑松体胚发育成熟过程中,麦芽糖45 g·L~(-1)、ABA20～30 mg·L~(-1)、PEG8000 125 g·L~(-1)、AC 2 g·L~(-1)和植物凝胶3 g·L~(-1)对体细胞胚成熟都具有促进作用。30 g·L~(-1)麦芽糖、10 mg·L~(-1)ABA、125 g·L~(-1)PEG为抗性黑松体胚发育成熟的最佳组合。

以籼稻重穗型恢复系蜀恢527的成熟胚为外植体,研究了影响其愈伤组织诱导及植株再生频率的各种因素。结果表明,在基本培养基NMB中添加2.0mg/L的2,4-D有利于蜀恢527成熟胚愈伤组织的诱导和继代培养;MS+6-BA2.0mg/L+KT2.0mg/L+NAA0.25mg/L的分化培养基有利于愈伤组织的分化;继代两次的愈伤组织分化率最高。利用本研究建立了适合蜀恢527成熟胚遗传转化的高效植株再生体系,在此基础上利用农杆菌介导法将稻瘟病抗性基因Pi-d2导入蜀恢527并获得了经PCR检测为阳性的转化植株。

通过探讨活性炭在椰子胚培养过程中对椰子胚褐变以及生长发育的影响,结果表明活性炭有明显抑制褐化的作用,活性炭浓度过高或过低均不利于椰子成熟胚的萌发和生长,最适合诱导椰子胚的最佳活性炭浓度应该为2~3 g/L。

为了建立月季遗传转化的再生体系,该试验以‘漂多斯’、‘蓝丝带’、‘索奴拉’3个月季品种的未成熟胚为外植体,获得了月季再生植株.结果表明,在MS+ZT 0.5 mg/L、MS+ZT 4.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L、MS+ZT 0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L培养基上,‘漂多斯’、‘蓝丝带’、‘索奴拉’能够诱导出再生芽,再生率分别为33.3%、33.3%、16.7%;再生芽在不含植物生长调节剂的MS基本培养基上伸长、展叶,在MS+IBA 0.5 mg/L的培养基上能得到生根的再生植株.随着月季未成熟胚贮藏时间的延长,不仅污染率增加,而且胚成熟后多发育成胚芽;贮藏时间不宜超过90...

以华北型黄瓜‘川翠3号’、华南型黄瓜9361和9149为试材,开展了黄瓜子叶在不定芽诱导和不定苗分化两个阶段所需的激素配比研究。结果表明,在MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L ABA的不定芽诱导培养基上诱导20 d左右,转入MS+6-BA 0.3mg/L的不定苗分化培养基,3种黄瓜都能获得较高的植株再生率,平均外植体成苗数在2.2以上。从外植体接种到再生苗移栽仅需8周。再生苗移栽后能正常生长,开花结实。