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[期刊] 华北农学报  [作者] 张楠  王保军  张秀清  张京声  孙君社  
研究了元宝草悬浮细胞生长及其金丝桃素类物质(金丝桃素和假金丝桃素)的代谢规律。悬浮培养细胞的生长周期为18 d,其中4~10 d是对数期。金丝桃素类物质在10 d达到46.06μg/g(DW),其含量增加与细胞鲜质量增长相偶联。可溶性糖的消耗与细胞的生长以及金丝桃素类物质的代谢有着密切的关系,是影响细胞鲜质量和金丝桃素类物质增长的重要因素。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 黄燕芬  王自布  施琴  谢奇  
目的】建立良好的百蕊草悬浮细胞培养体系,为后续利用基因工程改造百蕊草代谢途径获得高次生代谢产物新品种,实现野生资源的替代奠定基础。【方法】以百蕊草愈伤组织为材料,探寻百蕊草悬浮细胞生长与营养消耗规律的基础上,优化培养液氮和磷的初始投入量及铵态氮和硝态氮的比例(NH_4~+/NO_3~-)。【结果】在30 d的培养过程中,悬浮细胞生长曲线出现较明显的延滞期(0~6 d)、对数生长期(7~15 d)、稳定生长期(16~24 d)和衰亡期(24 d后);百蕊草悬浮细胞培养28 d时,起始总氮浓度70 mmol/L、磷酸盐浓度1.3 mmol/L情况下,悬浮细胞干物质量均达最大值,低于或高于此两浓度都不利于细胞的健康生长;在此基础上进行悬浮培养细胞对硝态氮、铵态氮的需求探究。结果发现,培养过程中悬浮细胞生长对硝态氮的消耗多于铵态氮,铵态氮的利用消耗先于硝态氮,铵态氮的浓度过高会抑制细胞生长,NH_4~+/NO_3~-为20/50最适于细胞生长。【结论】在培养周期内百蕊草悬浮细胞生长曲线呈"S"形;以MS为基本培养基,氮浓度为70 mmol/L,磷酸盐浓度为1.3 mmol/L,NH_4~+/NO_3~-为20/50较有利于百蕊草细胞的悬浮培养;培养基总糖、蔗糖、还原糖以及硝态氮、无机磷的消耗均在其对数生长期较快,铵态氮在生长初期消耗快于硝态氮。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 梁军  魏刚  吕全  贾秀贞  张星耀  
研究了印楝细胞悬浮培养系的建立及印楝细胞悬浮培养的条件。结果表明,印楝细胞悬浮系的建立以B5培养基,NAA2 0~4 0mg·L-1,采用直接倾倒法作为接种方法为好;基于生物量、印楝素含量和印楝素产率综合分析认为,印楝细胞悬浮培养的最佳条件为B5培养基,NAA2~4mg·L-1,蔗糖30g·L-1,培养温度25℃,及根据培养容器的大小选择合适的转速和装液量。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 黄卫文  李忠海  黎继烈  戴梓茹  
白藜芦醇是一种具有抗菌、抗氧化、抗癌及多种保健功能的非黄酮类多酚化合物。从天然植物中获取大量白藜芦醇面临着资源短缺的问题,利用植物细胞悬浮培养技术生产白藜芦醇具重要意义。对植物细胞悬浮培养技术及其在白藜芦醇生物合成研究中应用的新进展进行了综述。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 胡博然  徐文彪  马峰旺  
以宁夏农科院选育的新品种宁杞 1号 3年生树为试材 ,对影响枸杞胚细胞悬浮培养及其再生系统建立的培养基与激素配比进行了研究。结果表明 ,以人工授粉后 18d的幼果 ,剖取成熟胚作为外植体 ,选择 MS+6 BA1.0 mg/ L+IBA0 .5 m g/ L 培养基诱导愈伤组织 ,经单细胞悬浮培养建立了稳定的细胞系 ;MS+6 BA0 .2mg/ L 培养基较为适宜枸杞胚状体萌发成苗 ,该再生苗转移到 MS+NAA0 .2 mg/ L 生根培养基上 ,诱导生根并获得完整植株 ;共移栽成活 14株 ,成活率达 38.8%。
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 陈红贤  于笑笑  王晨阳  张敏  刘忠华  
对国槐Sophora japonica槐角种胚细胞悬浮培养的动力学进行研究,在优化细胞接种量的基础上,分析测定培养周期内不同培养阶段的槐角细胞生长和培养基中碳源、氮源、磷源的消耗,以及细胞的鲜质量、干质量和黄酮产量的变化,从而了解细胞生长、营养消耗与次生代谢产物积累的基本规律,为建立结构化动力学模型奠定基础。结果表明:(1)初始接种量为40.000 g·L-1时,最利于细胞的培养;(2)细胞的培养周期约为27 d,经过27 d的培养,生物量和黄酮的产量达到最高,分别为9.733 g·L-1和53.566 mg·L-1,对细胞比生长速率和黄酮比合成速率进行分析,得出黄酮的积累和细胞的生长为部分生...
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 欧阳杰  武彦文  王晓东  赵兵  王玉春  
肉苁蓉细胞悬浮培养的生长周期约为25 d,细胞内苯乙醇糖甙(PeG)的比生成速率YP/X与肉苁蓉细胞比生长速率μ大致成线性关系,为生长偶联型.在培养过程中,培养基中的磷酸盐和氨盐被迅速消耗,而硝酸盐的利用稍慢,基于蔗糖、氨盐和硝酸盐的细胞收率系数分别为0.481、60和6.4 g/g,基于蔗糖的PeG收率系数为0.055 g/g.根据细胞基本元素分析及各收率系数之间的关系,计算得出了肉苁蓉细胞悬浮培养的化学计量方程式,为细胞的生物反应器扩大培养提供理论依据.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 武发菊  尚勇良  安芳兰  董文教  宋玉霞  董金杰  陈苗苗  牟克斌  黄银君  刘学荣  
【目的】研究在幼仓鼠肾细胞(BHK-21)悬浮培养过程中,不同浓度氨对其生长代谢的影响。【方法】用添加0,1.8,2.5,5.5,8.0和15.0 mmol/L氨的培养基培养BHK-21细胞,每隔12 h取样1次,用细胞计数仪进行细胞计数,测定细胞活力,采用AO/EB双染色法和Annexin V-FITC/PI流式细胞仪2种方法检测细胞的凋亡情况,同时测定细胞培养过程中葡萄糖、氨和乳酸浓度的变化。【结果】在BHK-21细胞连续培养过程中,当氨的添加浓度低于1.8 mmol/L时,其对细胞的生长几乎不产生抑制作用,细胞活性、细胞总数与对照组差异不显著,未出现细胞聚集成团现象;当氨添加浓度达到15...
[期刊] 林业科学  [作者] 范桂枝  翟俏丽  于海娣  王晓东  王博  詹亚光  
以产三萜的白桦悬浮系为试验材料,在优化白桦悬浮细胞生长与三萜积累的培养基种类和接种量的基础上,分析白桦悬浮细胞生长和三萜积累的动力学关系,同时考察1个培养周期内白桦细胞内外主要营养成分的变化。结果表明:1)在MS,NT,IS,WPM,1/2MS,B56种培养基和10~40g·L-1接种量中,有利于白桦细胞生长和三萜生产的培养基为B5和接种量为20~30g·L-1FW;2)在1个培养周期内,白桦悬浮细胞培养过程中三萜的产量与细胞生物量是相偶联的,随着生物量的增加三萜产量呈增长趋势,其中,白桦细胞在第12天比生长速率达到最高0.18,三萜合成速率和比合成速率在第9天达到最高值,分别为0.73mg·...
[期刊] 水产学报  [作者] 洪锡钧  
南方鲶晚期胚胎细胞经原代和传代培养40次,历时36个月建立了上皮型细胞系(SM)。该细胞系表现低世代生长缓慢,每代时间随代龄增加而减少,经EMF测定:G1期细胞占70.1%~85.6%;S期细胞占12.2%~25.3%,G2+M期细胞占1.6%~4.6%,由30代到40代G2+M细胞增加了一倍多,SM细胞能在1~4℃冰箱长期存活并可保持繁殖能力达13个月。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 徐志荣  王婷  娄佳兰  魏赛金  
[目的]南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化及动力学模型构建。[方法]以南方红豆杉1年生枝条诱导产生的愈伤组织为材料,在优化愈伤组织接种量、培养基初始pH、植物激素类型及配比的基础上,分析南方红豆杉悬浮细胞生长和紫杉醇积累的动力学关系及主要营养成分的变化。[结果]适合南方红豆杉悬浮培养的培养基为:B5+0.4 mg·L~(-1) 2,4-D+0.3 mg·L~(-1) NAA+1.2 mg·L~(-1) 6-KT+30 g·L~(-1)蔗糖,培养基最佳初始pH为5.8,最佳接种量为0.09 g·mL~(-1)。在1个培养周期内,培养液中的糖、磷元素,铵态氮、硝态氮在细胞培养的第18天基本被消耗完全或保持不变;动力学拟合表明,南方红豆杉细胞悬浮培养生长符合Logistic生长模型,最大比生长速率为0.143 65 d~(-1),底物消耗和紫杉醇合成可用Luedeking-Piret模型描述,悬浮细胞生长与紫杉醇积累属于部分生长偶联型。[结论]南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化后,通过模型的回归拟合,获得了反映南方红豆杉细胞培养的动力学参数,试验所构建的发酵动力学模型在一定程度上揭示了南方红豆杉细胞产紫杉醇代谢过程的特征。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 付婉艺  李厚华  李玲  王亚杰  张存旭  
【目的】分析天山雪莲悬浮培养细胞生长过程中生物量和总黄酮含量的变化,优化总黄酮的提取纯化方法。【方法】采用L9(34)正交设计优化天山雪莲悬浮培养细胞中总黄酮的超声提取工艺,比较聚酰胺层析法、碱提酸沉法和聚酰胺酸碱法对总黄酮含量、纯度及回收率的影响。【结果】在3~15d,随着培养时间的增加,天山雪莲悬浮培养细胞的生物量和总黄酮含量明显增加,在培养15d时均较高,分别为21.9g/L和66.5mg/g,表明天山雪莲悬浮培养细胞最适收获时间为培养15d;总黄酮提取最佳工艺为:70℃超声条件下,采用体积分数70%的乙醇连续提取3次,可以得到66.5mg/g总黄酮;总黄酮纯化的最佳方法为:聚酰胺层析法...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 张献龙  张家明  姚明镜  孙济中  刘金兰  
本文是作者对其所在实验室多年来的研究结果的总结。分体细胞形态建成、影响愈伤诱导及胚胎发生的因素、植株再生、胚胎发生能力的遗传、生化机制、体细胞变异应用研究等7个方面。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 阙国宁  诸葛强  
以牡竹属黄竹(DendrocalamusmembranceusMunro)的竹节及无菌苗根颈为外植体,培养于含有5mg/L2,4-D、0.2mg/LKT和200mg/LLH的MS培养基上诱导愈伤组织,然后移至相同成份或不同浓度2,4-D的液体培养基中,进行悬浮培养,以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体,其产量分别约为每克鲜重2.5×105个和5×105个,活力均可达80%。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 余舜武  朱永生  余毓君  章荣德  张端品  
为了缩短建立胚性细胞悬浮系的进程 ,快速获得松脆胚性愈伤组织 ,以普通小麦、大麦和多花黑麦草为材料 ,采用能促进植株再生的高浓度铜离子作为毒害筛选因子 ,以MSD培养基为基本配方 ,2 .5mg L的 2 ,4 D浓度 ,不同梯度浓度的铜离子处理愈伤组织。结果表明 ,0 .1mmol L的Cu2 + 对愈伤组织具有较好的筛选作用 ,能使松脆胚性愈伤组织保存下来 ,而其它类型愈伤组织褐化死亡。产生的松脆性愈伤组织能很快适应悬浮培养 ,从而快速建立胚性细胞悬浮系。用密实细胞体积及其斜面高度评价细胞悬浮系的特点 ,发现悬浮细胞不仅具有很强的生长势 ,提高了愈伤对营养缺乏的忍受度 ,而且保持了高分化潜...
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