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[期刊] 林业科学
[作者]
张玉龙 池玉杰 闫洪波
采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基用4种不同的底物处理方式,对白腐菌偏肿栓菌在28℃下进行静止培养,得到不同时间内的培养液,用紫外可见分光光度计分别检测在470,420,310nm处对于2,6-二甲氧基苯酚(2,6-DMP)、2,2’-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、藜芦醇(VA)的氧化作用后光密度值的变化情况,作为其木质素降解酶系统锰过氧化物酶(MnP)、漆酶和木质素过氧化物酶(LiP)产生的依据。结果表明:偏肿栓菌可产生MnP(必须在Mn2+存在的条件下)和漆酶(不依赖于Mn2+),但不产生LiP;在培养液内添加底物木屑和2,6-DMP后可显著提高2种酶的分泌量...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈聪 曹福祥 龙绛雪 董旭杰
研究培养基组分及培养条件对木质层孔菌产锰过氧化物酶(MnP)的影响.对培养条件进行优化,采用正交设计对培养基组分进行优化.结果表明,pH5,温度34℃,装液量150mL,葡萄糖与蛋白胨质量浓度之比20∶1,Mn2+1.5mmol/L,ABTS0.5mmol/L,转速160r/min时,最高酶活力可达1042.76U/L.
关键词：
木质层孔菌 锰过氧化物酶 培养条件
[期刊] 林业科学
[作者]
张玉龙 池玉杰 冯连荣
【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)锰过氧化物酶(MnP)的分级纯化,以期得到L.gibbosa MnP的纯品和进行后续酶学性质研究。【方法】在对L.gibbosa所产MnPs进行优化培养、获得大量MnPs粗酶液的基础上,通过硫酸铵(NH4)2SO4分级盐析、聚乙二醇(PEG)沉淀进行粗酶液浓缩、在起始缓冲液中进行透析、经DEAE-琼脂糖CL-6B离子交换柱层析进行梯度洗脱和葡聚糖G-75凝胶过滤柱层析等方法对MnPs粗酶液进行纯化,并对分级纯化方法进行优化,对纯化浓缩后的纯酶
[期刊] 林业科学
[作者]
张玉龙 池玉杰 冯连荣
【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条带切割,采用Nano液相色谱-电喷雾串联质谱法联用(Nano LC-ESI-MS/MS)多肽测序技术对蛋白氨基酸序列进行测定。利用该SDS-PAGE图谱,建立蛋白分子量与迁移率的标准直线,从标准直线上求出MnP纯酶样品的表观分子量;参照酶活测定方法检
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
吕聪 曹福祥 董旭杰
利用茯苓Poria cocos在液体发酵条件下产锰过氧化物酶,并对其用于染料结晶紫降解脱色,确定其最适工艺条件.结果表明:茯苓产的锰过氧化物酶对染料结晶紫的最适脱色条件为H2O2浓度0.15 mmol/L,pH5.0,反应温度40℃.
关键词：
茯苓 锰过氧化物酶 结晶紫 脱色
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
周德明 冯友仁 梁帅
利用低能N+注入,对产木质素过氧化物酶(Mnp)和锰过氧化物酶(Lip)活力均较高的菌株N1023进行诱变,研究了不同能量和不同剂量N+离子诱变后菌株的存活率与突变率、突变菌株的产酶活力及遗传稳定性.结果表明:不同能量和不同N+离子剂量注入对菌株有显著影响,诱变菌株N1023j产Mnp和Lip双酶活力分别提高了27.29%和22.58%,同时诱变菌株N1023j有很好的遗传稳定性.
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
高云航 王巍 勾长龙 李秋菊 娄玉杰 马红霞
通过响应面分析方法对地衣芽孢杆菌MX5产木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,Lip)的发酵条件进行研究。根据Box-Benhnken中心组合设计原理,在单因素试验基础上采用三因素三水平的响应面分析法确定MX5产Lip的最佳培养条件为:培养基初始pH 8.76,培养温度37.6℃,发酵时间为98.32h,酶活达到最大值103.965U/L。表明试验建立的模型在预测Lip生产中具有良好的效果。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
高云航 王巍 勾长龙 李秋菊 娄玉杰 马红霞
通过响应面分析方法对地衣芽孢杆菌ＭＸ５产木质素过氧化物酶（Ｌｉｇｎｉｎ ｐｅｒｏＸｉｄａｓｅ，Ｌｉｐ）的发酵条件进行研究。根据ＢｏＸ－Ｂｅｎｈｎｋｅｎ中心组合设计原理，在单因素试验基础上采用三因素三水平的响应面分析法确定ＭＸ５产Ｌｉｐ的最佳培养条件为：培养基初始ｐｈ ８．７６，培养温度３７．６℃，发酵时间为９８．３２ｈ，酶活达到最大值１０３．９６５Ｕ／Ｌ。表明试验建立的模型在预测Ｌｉｐ生产中具有良好的效果。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
尹立伟 池玉杰
为提高猴头菌菌株CB1锰过氧化物酶(MnP)基因的表达产量,采用PEG/CaCl2介导的原生质体转化方法,将携带有He-mnp1的重组质粒pLB01/He-mnp1转入到构巢曲霉尿嘧啶尿苷营养缺陷菌株TN02A7的原生质体中,获得了转化子菌株TN02A7-He-mnp1,并在乙醇脱氢酶启动子alcA(p)控制下实现了异源表达。将TN02A7-He-mnp1、TN02A7、构巢曲霉野生型菌株WJA01、猴头菌菌株CB1在相同的木质素环境下进行培养并检测MnP酶活性,结果表明:转化子菌株TN02A7-He-mnp1在0.05 g.L-1血红素的情况下、诱导96 h后酶活性最高为38.31 U.L-...
[期刊] 林业科学
[作者]
于存 池玉杰
锰过氧化物酶(MnP)广泛存在于白腐菌中,是降解木质素的主要酶系。首先对采自长白山的一色齿毛菌菌株CB1降解木质素的过氧化物酶进行检测,结果表明一色齿毛菌可产生MnP,但不产生木质素过氧化物酶(LiP);Mn2+不是其产生MnP的必要因子,在LNAS培养基中加入木屑为底物的条件下,一色齿毛菌MnP最大酶活为18.4 U·L-1。在酶活检测的基础上,为了深入研究MnP降解木质素的功能,根据已知的MnP基因保守区序列设计引物,以一色齿毛菌菌株CB1的基因组DNA为模板,采用染色体步移技术,克隆到该菌株一个编码MnP1蛋白的全长DNA基因(GenBank登录号JQ782578.1),命名为Cu-mn...
[期刊] 林业科学
[作者]
池玉杰 闫洪波
White rot fungus Pleurotus djamor H1 was stilly cultured at 28 ℃ under 4 different kinds of LNAS culture solution,the extracellular enzyme solutions were sampled at different interval,O.D.values of the solutions,representing manganese peroxidase(MnP),laccase and lignin peroxidase(LiP)activities,were...
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
孙鸿有 袁文海 金爱武 任孝蓉
9年生檫树过氧化物酶同工酶基本酶谱有A_1,A_2,B,C_1,C_2,C_36条酶带;以树冠中部的幼叶分析最好;在树冠阳面与阴面采样,酶谱无差别;在4月10日至5月15日期间采样酶谱分离无影响;不同种源、不同家系的酶谱基本无差异。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
郑苗苗 张令昂 焦战战 邵淑丽
采用LNAS(低氮天冬酰胺-琥珀酸)培养基添加方式,对红平菇HP1(Pleurotus djamor)进行培养,检测不同时间培养液对不同底物的氧化作用,作为锰过氧化物酶的产生及活性测定的主要依据。在含Mn2+的培养液添加底物木屑后锰过氧化物酶最大酶活为358.7 U·L-1,提取经优化筛选后的锰过氧化物酶粗酶液,对4种具有不同化学结构的染料进行了脱色试验。结果表明,对异戊二烯类番红在6 h时脱色率为82.6%。因此,显示出红平菇HP1锰过氧化物酶对番红染料脱色具有较大的应用潜力,进而对废水处理具有更好的应用前景。采用RT-PCR和RACE技术,从红平菇HP1菌株中获得编码锰过氧化物酶基因的c ...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
Jun Sangcheol Kim Kyunghoon Choi Hyoung T Kim Kyujoong
白腐担子菌Trametes versicolor在加入0.05％Tween 80,(NH4)2-tatrate和80 mg/kg Mn-SO4的Kirks培养基上能够高活性地分泌Mn-过氧化物酶。在该培养基中培养10 d,活性达到最高。通过DEAE-Sepharose CL-6B,SP-Sepharose和离子交换柱分离纯化,获得2种类型的Mn-过氧化物酶同工酶,并对这2种酶的酶动力学,N-端的氨基酸序列及其编码基因的核酸序列做了研究。
关键词：
白腐菌 Mn-过氧化物酶 同工酶
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