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[期刊] 水产学报  [作者] 温海深  林浩然  
以珠江流域站为研究对象,分别在性腺发育早期、性腺发育晚期、性腺发育成熟与产卵前期、性腺退化期注射促黄体素释放激素类似物和多巴胺D2受体拮抗物,处理后6h、12h、24h测定血液中的促性腺激素水平变化。结果表明,在性腺发育的各个时期,促黄体素释放激素类似物和多巴胺D2受体拮抗物联合注射能显著刺激站促性腺激素分泌;站脑垂体促性腺激素的分泌受下丘脑释放的促性腺素释放激素和多巴胺的双重调节,多巴胺只能抑制促性腺素释放激素诱导的促性腺激素分泌。在建立站人工繁殖技术时,可采用促黄体素释放激素类似物和多巴胺D2受体拮抗物联合注射方法。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 房保海  郑法新  孙修勤  曲凌云  张进兴  
GnRH(gonadotropin-releasing hormone)是下丘脑-垂体-性腺轴中重要的十肽信息分子,在所有的脊椎动物的生殖神经内分泌调控中具有重要的作用。GnRH成熟的十肽沿着轴突被运送到下丘脑正中隆起(median eminence)末端,然后进入下丘脑垂体门脉循环(hypothalamo?hypophyseal portal circulation)(四足动物)或直接通过轴突末梢(大多数硬骨鱼)把信号传递给刺激性腺的细胞,与特异性受体结合,刺激促性腺激素(GtHs,gonadotropins)的合成与释放,参与脊椎动物繁殖的起始和维持正常生殖功能。伴随着GnRH的研究,研究...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 毛玉泽  温海深  林浩然  李成永  
:以珠江和辽河流域的鲇 (Silurusasotus)为研究对象 ,在室内进行了不同组合的激素和药物注射实验。结果表明 ,注射促黄体素释放激素类似物 (LHRH A)和多巴胺拮抗物地欧酮 (DOM )药物组合 (LHRH A+DOM ) ,剂量为 ( 10 μg +5mg) /kg鱼体重 ,能快速而大量地诱导鲇血清促性腺激素 (GtH)水平的升高 ,进而诱导产卵 ,产卵率为 90 % ,显著高于其他实验组 ;采用LHRH A +DOM药物组合对 2 92 6组鲇进行了人工催产 ,注射剂量为 ( 7μg +5mg) /kg鱼体重 ,平均催产率为 70 % ,最高 80 % ,获得鱼苗 2 0 7...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 吕慎金  刘兆斌  
促性腺激素释放激素(GnRHs)是调节动物繁殖的关键激素,在哺乳动物中主要以2种形式存在。GnRHⅠ调节促性腺激素,GnRHⅡ则具有神经调节和促进性行为作用。GnRHs可通过自/旁分泌在生殖组织和肿瘤中发挥作用。但GnRHⅠ和GnRHⅡ似乎仍有信号的差异,通过I型受体而产生不同的下游效应。配体受体的相互作用和受体构象变化参与受体激活原理已被部分确定。这些研究结果为选择新的促性腺激素释放激素类似物提供潜在的更广泛和更具体的应用前景。另外,通过合成新的促性腺激素释放激素类似物,可在生产中发挥更广泛和更具体的应用。
[期刊] 水产学报  [作者] 林信伟  林浩然  张庆  
采用离体灌流孵育和腹腔注射方法,研究鲑鱼促性腺激素释放激素(GnRH)类似物 sGnRH-A(Arg~6Trp~?Leu~3Pro~?NEt-LHRH)和哺乳类GnRH类似物LHRH-A(Ala~5Pro~?-NEt-LHRH)对鲤鱼脑垂体生长激素(GH)分泌的直接刺激作用以及对草鱼鱼种 GH 分流和生长的促进作用。2分钟脉冲式 sGnRH-A 和 LHRH-A 以剂量依存形式直接刺激离体灌流孵育的鲤鱼脑垂体 GH分泌,且 sGnRH-A 刺激GH 分泌活性显著高于 LHRH-A。腹腔注射两种剂量(0.01μg/g 体重/周和0.001μg/g 体重/周)的 sGnRH-A 或LHRH-A(每...
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 曹丽萍  丁炜东  
促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。本研究通过RT-PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约400 bp的目的序列GnRH,并将其克隆到T载体中,经酶切鉴定、序列测定分析后表明其与尼罗罗非鱼和乌颊海鲷具有较高的同源性,处于同一个进化分支上;而与日本青、金鱼、拟鲤、壁虎等的同源性较低。将此cDNA片段定向克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,转化到大肠杆菌TB1中,0.3M IPTG诱导4 h后成功表达出与预期大小相符的约56 kD的融合蛋白。表明大肠...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 柳学周  徐永江  廖梅杰  潘传燕  王妍妍  
采用RACE技术,在圆斑星鲽(Verasper variegatus)脑中克隆到3种GnRH基因的cDNA序列:cGnRH-Ⅱ、sGnRH和sbGnRH。每种GnRH都包括1个信号肽、1个Gly-Lys-Arg连接序列和1个GnRH相关肽。其中,cGnRH-Ⅱ的cDNA全长为568 bp,编码85个氨基酸,ORF为255 bp,5′UTR为141 bp,3′UTR为169 bp。sGnRH的cDNA全长为457 bp,编码90个氨基酸,ORF为270 bp,5′UTR为41 bp,3′UTR为143 bp。sbGnRH的cDNA全长为381 bp,编码98个氨基酸,ORF为294 bp,5′U...
[期刊] 水产学报  [作者] 汪小东  林浩然  谢刚  
雄鳗注射 5~ 6次、雌鳗注射 9~ 10次鲤脑垂体匀浆液 (CPE) +人绒毛膜促性腺激素 (HCG)能分别诱导精巢和卵巢发育成熟。在雌雄鳗鲡 ,注射CPE +HCG可显著增加端脑、间脑、中脑和下丘脑mGnRH的含量 ,而对后脑和延髓mGnRH的影响较小 ;注射CPE +HCG增加雄鳗后脑和延髓cGnRH -Ⅱ含量 ,对雌鳗脑区cGnRH -Ⅱ则无显著影响。雌雄鳗鲡每次注射CPE +HCG后 1天 ,血清促性腺激素 (GtH)急剧上升 ,10天后逐渐下降 ,但雌鳗在注射 7次后 10天血清GtH水平仍然显著高于相应对照组。雄鳗注射CPE +HCG 1~ 4次后 ,血清睾酮浓度无显著变化 ;雌...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 韩丹  李广  曹斌云  王娅娜  李玲  朱广琴  王建刚  宋宇轩  
在所选具有头3胎产羔记录的西农萨能奶山羊和布尔山羊群中检测促性腺激素释放激素受体基因(GnRHR)的多态性,根据检测结果分析GnRHR基因对产羔性状的影响。设计7对引物,采用单链构象多态(PCR-SSCP)技术检测该基因第1和第2外显子在西农萨能奶山羊和布尔山羊中的单核苷酸多态性。结果发现:引物P3和P7扩增片段具有多态性。P3扩增片段,在西农萨能奶山羊和布尔山羊都检测到AA和AB基因型,AB型与AA型相比在外显子1有+714缺失A和+731插入G二个突变;P7扩增片段,在布尔山羊中检测到CC和CD基因型,在西农萨能奶山羊中只检测到CC基因型,CD型与CC型相比在外显子2有+1440C→A一个...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 谢保胜  段瑞君  
从斑马鱼脑组织提取总RNA,应用RT-PCR方法克隆促性腺激素释放激素(GnRH)cDNA,其长度为646 bp,包括一个258 bp开放阅读框;编码的GnRH前体为86个氨基酸残基,由一个信号肽、GnRH十肽和一个由蛋白水解位点(Gly-Lys-Arg)连接的促性腺激素释放激素相关肽(GAP)组成;其中信号肽和相关肽的长度分别为24和49个氨基酸。该cDNA编码的GnRH的前体氨基酸序列与其他物种的GnRH前体基本一致。表明物种间GnRHcDNA的蛋白编码区高度保守,而非编码区的保守性程度很低。进化分析发现,斑马鱼与鲤、鲫、拟鲤、黑头软口鲦等淡水鲤科鱼类的同源性较高。
[期刊] 水产学报  [作者] 王承志  邱高峰  
应用反向高效液相色谱法(RP-HPLC)从中华绒螯蟹脑组织提取液初步分离了促性腺释放激素(GnRH)类似物,使用章鱼促性腺释放激素抗体(anti-octGnRH)对分离组分进行免疫斑点印迹实验鉴定,获得了免疫反应呈阳性分离组分,表明脑组织粗提液中含有GnRH类似物分离组分。对该GnRH类似物进行基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOFMS)分析,结果显示多肽物质分子量范围在800~1400u,主要由8种小分子多肽组成,其中一种组分的分子量与章鱼促性腺释放激素(octGnRH)分子量接近。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 凌雯  龚晓明  杨震  杜念兴  
应用聚合酶链反应(PCR)对畜型和禽型两个融合基因HBsAg/LHRH的5′端分别作了改造,切去了融合基因起始密码ATG前一段非编码序列61个碱基,将改造后的融合基因插入pBluescripe11KS+质粒中。琼脂糖凝胶电泳以及序列分析均表明改造和克隆成功。将改造后的融合基因克隆到含T7Promoter强启动子的表达载体pET15b中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,在E.coliDE3中表达,表达量占菌体总蛋白的10%,以兔抗LHRH抗体进行Western-blot检测,出现阳性反应带。用抗HBsAg抗体作ELISA检测,结果稀释1×10-6时仍为阳性反应。
[期刊] 水产学报  [作者] 马广智  林浩然  张为民  
采用CdCl2浸没法处理鲤,研究镉对鲤血清促性腺激素(GtH)和生长激素(GH)水平的影响。结果表明:较高浓度镉(CdCl29mg/L)处理引起血清GtH水平降低,GH水平升高;提高水中钙浓度,能使由镉引起的GtH水平的降低恢复到正常水平,并对镉引起的GH水平升高起延迟作用;镉处理使鲤对LHRH-A刺激GtH分泌的反应性下降,提高水中钙浓度也不能恢复正常。实验结果提示:镉引起的GtH和GH的变化可能主要是镉干扰了钙的生理作用。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 陈凯  习丙文  滕涛  王亚冰  高金伟  梁利国  谢骏  
促肾上腺皮质激素释放激素受体(corticotropin-releasing hormone receptor,crhr)是鱼类下丘脑–垂体–头肾调控轴上的重要应激调节因子。本研究通过c Dna末端快速扩增(race)技术成功克隆出团头鲂(megalobrama amblycephala)crhr1 m rna全长序列,应用生物信息学方法对其序列特征进行解析;同时采用荧光定量pcr技术分析了团头鲂crhr1的组织分布图谱及外源性皮质醇注射模拟应激处理下团头鲂crhr1 m rna的表达变化。研究结果表明,crhr1 m rna序列开放阅读框(open reaDing frame,orf)为12...
[期刊] 水产学报  [作者] 王滨  柳学周  徐永江  史宝  
促性腺激素抑制激素是2000年由日本学者首次从鹌鹑脑中分离出的一种新型下丘脑神经肽,通过其受体介导参与机体的生长、生殖以及摄食等生理过程。迄今,只在金鱼、斑马鱼、星点东方鲀、罗非鱼以及斜带石斑鱼等几种鱼中鉴定出促性腺激素抑制激素。目前,鱼类促性腺激素抑制激素的生理学功能研究相对较少,且存在争议。鱼类促性腺激素抑制激素及其受体的表达调控以及其他生理学功能仍有待进一步研究。本研究简要总结鱼类促性腺激素抑制激素及其受体的研究进展,并对促性腺激素抑制激素的生理学功能进行概括讨论,旨在加深对鱼类促性腺激素抑制激素的认识和了解,为进一步研究做铺垫。
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