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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈武 彭曙光 周清明 黎定军 罗宽
采用75%乙醇沉淀、阴离子交换色谱层析和阳离子交换色谱层析等方法,分离并纯化侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterospours)2-Q-9菌株外泌抗菌肽BL2Q9。结果表明,BL2Q9的相对分子质量为7 800,等电点为10.2。Edman降解测序发现其N末端封闭,串联质谱测序结果表明其与细菌第Ⅳ类鞭毛合成蛋白pilQ的前体蛋白以及转录抑制子CodY蛋白的部分序列相似,但与已知抗菌肽的序列相似性较低。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
黎定军 陈武 罗宽
侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus)菌株2-Q-9分泌的抑菌物质能强烈抑制青枯病菌的3个生理小种的正常生长.为了进一步在生产上利用该抑菌物质,就该抑菌物质的性质进行了初步研究.结果表明,该抑菌物质经高温处理后性质稳定;在碱性条件下比酸性条件下稳定;对胰蛋白酶和蛋白酶K不敏感,对胃蛋白酶部分敏感;该抑菌物质可能为蛋白或多肽类物质.
关键词：
侧孢芽孢杆菌 外泌 抑菌物质 性质
[期刊] 华北农学报
[作者]
胡瑞萍 张铎 张丽萍 张根伟 张蕾 赵宝华
为了分离纯化及鉴定枯草芽孢杆菌BSD-2代谢产物中抗菌肽,采用盐酸沉淀、Sephadex G-50层析以及反相HPLC对其进行分离纯化,并利用Tricine-SDS-PAGE、MAIDL-TOF-MS、红外光谱和核磁共振技术对其分子量、氨基酸序列以及结构进行初步解析。结果显示该抗菌肽是由29个氨基酸组成,分子量为3 514 Da,等电点为10.46。红外光谱和核磁共振分析其结构中含有-CH2-、-CH3、-OH、-NH2、-CH、-CO-以及苯环等官能团。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙力军 陆兆新 别小妹 吕凤霞 方传记
【目的】研究培养基对解淀粉芽孢杆菌ES-2菌株产生抗菌脂肽的影响,为选择合适的产抗菌脂肽的培养基提供指导。【方法】通过HPLC技术对培养基中的碳、氮源对ES-2菌株抗菌脂肽组分的影响进行试验。【结果】改进的Landy培养基抗菌脂肽产量较高;葡萄糖是ES-2菌株产生脂肽的良好碳源,特别是对surfactin的产生有明显的促进作用;蔗糖和乳糖也是产生fengycin的良好碳源;L-谷氨酸和L-天门冬酰胺是抗菌脂肽产生的良好氮源;而不同的氨基酸组合并不有利于抗菌脂肽的产生;实验结果还显示,6种脂肪酸对抗菌脂肽的产生起到抑制作用。【结论】改进的Landy合成培养基是ES-2菌株产生脂肽适宜的培养基,在...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
彭兵 张树斌 贾宇 王立安
【目的】揭示生防菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株A产生的抗真菌蛋白的性质及作用机理。【方法】采用硫酸铵沉淀菌株A发酵液获粗蛋白;采用DE52离子交换层析技术对粗蛋白进行分离纯化;对具抗真菌活性的纯化组分采用MALDI-TOF-MS进行结构分析;以玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)为材料,对纯化活性蛋白的抗真菌机理进行研究。【结果】从粗蛋白中分离到一种抗真菌活性蛋白(FV),与RNA结合蛋白Hfq Bacillus subtilis subsp.subtilis gi|16078797的匹配率为86.484%,相对分子质量为8 508.5 Da,等电点为8....
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
来航线 杨保伟 邱学礼 薛泉宏
通过对采集样品中细菌的分离与纯化,获得9株芽孢杆菌,经纯化培养后观察其个体和群体形态特征,并进行了12项生理生化特征鉴定。结果表明,B10为地衣芽孢杆菌,B13为巨大芽孢杆菌,B12、B14为短小芽孢杆菌,B15为苏芸金芽孢杆菌,B16为蕈状芽孢杆菌,B11,B17,B18为蜡样芽孢杆菌。通过对8株植物病原菌和3株动物病原菌的拮抗试验,初步确定B13,B16,B17,B18的抗菌谱较广,其中B10,B15对棉花枯萎菌,B13,B17对辣椒疫霉菌,B11对西瓜枯萎菌,B10,B17,B18对3株动物病原菌有较好的拮抗能力。
[期刊] 华北农学报
[作者]
孟立花 李社增 郭庆港 马平 刘大群
枯草芽孢杆菌NCD-2菌株对棉花黄萎病病原菌大丽轮枝菌具有较强的抗生作用。通过对NCD-2菌株培养条件的研究,结果表明在30℃、培养液初始pH为7.0和培养时间为2 d条件下,利用NB培养基培养该菌株所得培养液抑菌活性优于其他培养基,其培养液经硫酸铵沉淀所得的蛋白粗提液经RNA酶处理后的抑菌活性与对照相比差异不显著,经蛋白酶K和胰蛋白酶处理后的抑菌活性与对照相比差异显著;蛋白粗提液经60℃处理后的抑菌活性与对照相比差异不显著,经80,100,120℃处理后抑菌活性与对照相比差异显著,但经120℃处理30 min后仍有一部分抑菌活性,研究结果说明该菌株产生的抗菌物质存在性质上的差异。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
张蕾 赵春燕 祁丹 孙军德
以胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)(硅酸盐细菌)为材料,经液体发酵培养后,通过碱提醇沉法得到胞外多糖粗提物。紫外光谱分析表明,该粗提物不含有核酸和蛋白质,经DEAE-纤维素离子交换柱层析分离纯化得到多糖纯品。通过Sephadex G-100凝胶柱层析和醋酸纤维薄膜电泳鉴定,其为均一组分不含有其他多糖;化学法分析表明,多糖纯品含有氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸,不含有硫酸根。
关键词：
硅酸盐细菌 胞外多糖 鉴定
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张荣胜 刘永锋 刘邮洲 罗楚平 刘长河 李美荣 陈志谊
通过离子注入技术对枯草芽孢杆菌生防菌Bs-916突变选育,得到一株拮抗性能比出发菌Bs-916提高15%以上的突变菌株H-74。通过对其抗菌物质的高效液相色谱(HPLC)分析表明,H-74分泌的脂肽类抗菌物质主要是表面活性素。在PDA平板上的水稻纹枯病菌菌丝抑制试验中,它能有效抑制新生菌丝的生长,并使细胞内含物外泄。盆栽控病试验表明,它对水稻纹枯病菌的相对防效达到73.35%。将H-74分泌的脂肽类抗菌物质单喷于水稻植株上,测定与植物抗病相关的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的变化,发现其对植物抗病相关酶活性表达有明显的诱导作用。结果还显示同时接种脂肽类...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
别小妹 陆兆新
应用P lackett-Burm an Design对枯草芽孢杆菌fmbR菌株抗菌物质提取的主要影响因子(甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、pH值和时间)进行了研究。JMP软件分析结果表明:影响抗菌物质提取的关键因素为乙醇(P
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
余惠荣 李悦 李晓菲 赵秀香
从烟草根际土壤中分离到1株生防细菌侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)B8,为了将B8应用于植物病害生物防治,对菌株B8产生的抑菌物质粗提物理化性质进行研究,并采用薄层层析、Pharmadex LH-20柱层析和高效液相色谱对抑菌物质进行分离纯化。试验结果表明:侧孢短芽孢杆菌B8抑菌物质粗提物具有较好的热稳定性,可耐受100℃的高温;其p H值适应范围较宽,在p H值4~10时都有较好的活性,在中性条件下活性最强;对紫外光和日光灯照射不敏感,可长时间保存;侧孢短芽孢杆菌B8产生的抑菌物质为蛋白类,经SDS-PAGE电泳确定蛋白分子量约为11.2k Da;质谱分...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
纪存朋 孙谧 于建生 郑媛
海洋微生物溶菌酶发酵液经低温离心、超滤浓缩、乙醇提取、Superdex 75 10/300凝胶层析和反相高效液相色谱层析纯化得到电泳纯海洋溶菌酶,分子量为17.1 kD,比活达到3 987.7 U/mg,纯度提高41.98倍,活力回收率为21.7%。对该酶冷冻干燥过程的研究结果表明,海藻糖、蔗糖和麦芽糖对该酶均有一定的冻干保护作用。其中,以海藻糖的保护效果最佳。0.5 mol/L海藻糖与20 mg/ml吐温80复合作为冻干保护剂,使冻干后的溶菌酶活性维持在95%以上,为该酶进一步研究和应用提供了稳定的酶制剂。
关键词：
海洋微生物 溶菌酶 分离纯化 冷冻干燥
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
曲晓旭 刘洪霞 高玲 陆兆新 吕凤霞 张充 赵海珍 别小妹
［目的］本文旨在建立一种利用ＰＣＲ技术鉴别抗菌脂肽类型和筛选抗菌脂肽产生菌的快速、准确、灵敏的方法。［方法］以枯草芽孢杆菌（ＢａＣｉｌｌｕｓ ｓｕＢｔｉｌｉｓ）、淀粉液化芽孢杆菌（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａＣｉｅｎｓ）和多黏类芽孢杆菌（ＰａｅｎｉＢａＣｉｌｌｕｓ Ｐｏｌｙｍｙｘａ）的典型菌株为研究对象，针对几种代表性脂肽的合成酶基因设计特异性引物进行ＰＣＲ扩增，并通过测序法验证检测结果的正确性，推测芽孢杆菌生物合成抗菌物质的潜在能力。［结果］ＰＣＲ结果表明：所有检测菌株均具有ｓｕＲｆａＣｔｉｎ合成酶调控基因；除Ｐ．Ｐｏｌｙｍｙｘａ Ｊｓａ－９外，其他菌株均检测到ｆｅｎｇｙＣｉｎ合成酶基因的存．．．
关键词：
抗菌脂肽 芽孢杆菌 调控基因 检测
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭珺 武爱莲 闫敏 李娓 池秀蓉 丁玉川 焦晓燕
拮抗菌Ｐｂ－４是一株对多种植物病原菌有较强抑制作用的菌株。为了明确拮抗菌Ｐｂ－４的分类地位和抑菌机理，通过形态观察、生理生化特征和１６Ｓ ｒｒＮＡ基因序列同源性比对及系统发育树分析，对Ｐｂ－４菌株进行鉴定。并采用平板对峙培养法测定Ｐｂ－４菌株的抑菌谱，显微观察其抑菌作用，采用硫酸铵沉淀和乙醚、苯提取得到抑菌活性物。通过加热处理，明确高温对Ｐｂ－４菌株抑菌活性的影响。结果表明，Ｐｂ－４菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌；Ｐｂ－４菌株对番茄枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、西瓜枯萎病菌、青椒枯萎病菌、辣椒疫霉病菌、苹果腐烂病菌均有抑制作用，其抑菌活性具有广谱性。该菌菌液能明显抑制枯萎病菌孢子的萌发，并对病菌菌丝有致畸．．．
关键词：
解淀粉芽孢杆菌 枯萎病 拮抗菌 抑菌活性
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
牛焕杰 李辉 王娜娜 张红 王惠 黄丽丽
【目的】从枯草芽孢杆菌Ｅ１Ｒ－ｊ菌株的发酵液中分离纯化抗菌蛋白，分析确其对苹果树腐烂病菌菌丝的抑制作用，为更好地利用该菌株防治植物病害和研制生物农药奠定基础。【方法】采用盐酸沉淀法从Ｅ１Ｒ－ｊ发酵液中提取粗蛋白，并筛选酸沉淀的最佳ｐＨ值，然后通过反相柱ＲＥＳＯＵＲＣＥＴＭＲｐＣ、凝胶柱ＳＵｐＥＲｄＥｘ－７５、阴离子交换柱ｄＥＡＥ－ＳＥｐＨＡＲＯＳＥ和脱盐柱层析技术，提取并分离纯化粗蛋白；在粗蛋白分离纯化过程中，以皿内对峙试验测定蛋白的抗菌活性；通过扫描电镜技术，观察抗菌蛋白对病原菌菌丝的抑制作用。【结果】以ｐＨ ４．０盐酸沉淀获得的粗蛋白活性最强，抑菌效果最佳。反相柱ＲＥＳＯＵＲＣＥＴＭＲｐＣ．．．
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