为了探究侏儒型华南鲤(Cyprinus carpio rubrofuscus)生长发育迟缓的分子机制，深入分析血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor， VEGF)在鱼类生长过程中的作用，本研究比较分析了侏儒型华南鲤和生长正常华南鲤(对照组)的生长性状、摄食率和饲料利用率等指标，并扩增和测序分析了华南鲤vegf_(121)基因的cDNA序列，利用实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测了生长正常华南鲤vegf_(121)基因的mRNA在11种组织中的表达量，以及在侏儒型鱼的心脏、垂体、大脑、肌肉和下丘脑中的表达水平。摄食实验结果显示，侏儒型华南鲤的摄食率和增重率显著低于体型相似的生长正常华南鲤，而饲料转化率与正常鱼无显著差异。同时，获得华南鲤vegf_(121)基因cDNA序列1 235 bp，其中开放阅读框432 bp，编码144个氨基酸。该蛋白属于VEGF家族的VEGF_(121)亚型。其氨基酸序列与11种已知鱼类VEGF_(121)序列同源性在79.86%以上，而与人类(Homo sapiens)和小鼠(Mus musculus)的同源性仅为51.02%和52.74%。VEGF_(121)亚型在人类和鱼类的同源性较低且时空分布存在较大差异，可能与其呼吸方式和呼吸系统的血管形成模式差异有关。qRT-PCR结果显示，在生长正常华南鲤11个组织中均能检测到vegf_(121) mRNA的表达，说明vegf_(121)对于华南鲤不同组织中血管的发育有不同程度的调控作用。比较侏儒型华南鲤和生长正常鱼的下丘脑等5个组织中该基因的表达发现，在侏儒型华南鲤下丘脑组织中的表达水平显著高于生长正常鱼；而在大脑和垂体中，vegf_(121)的表达水平相当；在肌肉和心脏组织中，vegf_(121)的表达水平都较生长正常鱼低，但差异不显著。因此，推测侏儒型华南鲤的生长发育缓慢可能与下丘脑的血管生成异常和器质性病变影响鱼体的食欲调控信号有关，进而导致鱼体生长缓慢。本研究为进一步探讨侏儒型华南鲤生长发育缓慢的原因提供了科学依据。对养殖经济鱼类群体中侏儒型个体产生原因的遗传学研究及增加养殖鱼类的产量具有重要意义。

为阐明黄条鰤幼鱼摄食消化特性构建最佳胃排空数学模型，确立最适摄食投喂间隔，实验检测了黄条鰤幼鱼（63.96±5.63）g胃排空过程中内容物重量、肝脏和肠道中消化酶活性变化，分析了垂体中摄食调控相关基因的表达，比较了线性模型、平方根模型、立方模型3种数学模型对胃排空曲线的拟合程度。结果显示，黄条鰤在摄食后瞬时胃内容物湿重呈阶段性降低，18 h后降为0，属于直线下降型胃排空类型。胃排空过程中，肝脏淀粉酶、脂肪酶和糜蛋白酶活性呈先上升后下降、随后又上升接着下降的“M”型变化趋势，淀粉酶活性在摄食后0～6 h显著上升，脂肪酶和糜蛋白酶活性在0～9 h显著上升，三种酶活性在9～12 h均呈显著下降趋势，在15～18 h显著上升，且在18 h活性达到最高；肠道中的淀粉酶在0～6 h显著上升，随后下降，9～12 h呈上升趋势，12 h活性达到最高，随后逐渐下降，其脂肪酶和糜蛋白酶活性则是在摄食后0～12 h显著上升，12 h活性达到最高，随后逐渐下降。神经肽Y（Neuropeptide Y， NPY）和食欲素（Orexin， Ore）mRNA表达水平呈先上升后下降趋势，NPY在摄食后12～15 h内表达水平显著上升，Ore在9～15 h内表达水平显著上升，NPY、Ore二者mRNA表达水平均在摄食后15 h达到最高，随后显著下降。胃内容物残余百分比与胃排空时间、NPY mRNA的表达呈显著负相关，NPY mRNA的表达水平与胃排空时间呈显著正相关。研究结果将有助于明确黄条鰤最佳摄食间隔，为工厂化养殖模式下黄条鰤投喂提供理论依据。

为了解不同种类鳜鱼生长差异的生理基础与机制，比较研究了鳜（Ｓｉｎｉｐｅｒｃａ ｃｈｕａｔＳｉ）、斑鳜（Ｓｉｎｉｐｅｒｃａ．Ｓｃｈｅｒｚｅｒｉ）和杂交鳜（斑鳜♀×鳜♂）幼鱼３０ ｄ内的生长速率与日摄食量、胃蛋白酶活性和胃蛋白酶原（ｐＧａ１、ｐＧａ２、ｐＧｃ）基因相对表达量间的关系。结果表明，鳜、杂交鳜和斑鳜日增重率分别为（１．１７１±０．１８０）Ｇ／ｄ、（１．０１９±０．１０４）Ｇ／ｄ和（０．４３３±０．０７８）Ｇ／ｄ，生长速率快慢次序是鳜＞杂交鳜＞斑鳜。鳜、杂交鳜和斑鳜平均日摄食量分别为（６．１±０．３１）Ｇ／ｄ、（５．２６±０．３３）Ｇ／ｄ、（４．２４±０．２３）Ｇ／ｄ。胃蛋白酶比活力最高部．．．

MicroRNA(miRNAs)是一类长度为18-25nt的内源性非编码单链小RNA,参与细胞增殖与凋亡、免疫、脂肪代谢等过程。本试验以三组投喂不同类型饵料的鲤(Cyprinus carpio)肝脏为研究材料,通过HiSeq 2500深度测序技术和生物信息学分析miRNA,鉴定出235个已知miRNAs。三种饵料组共表达的差异miRNAs有13个,随机挑选5个miRNA并采用qPCR进行验证,表达趋势在qRT-PCR结果和RNA测序结果中高度相似;对13个共表达的差异表达miRNAs进行靶基因预测,共预测到靶基因530个。对预测靶基因进行KEGG通路分析,结果显示参与2-羰基羧酸代谢,糖基磷脂酰肌醇(GPI)-锚定生物合成,柠檬酸循环(TCA循环)等通路的调节。本研究首次了解鲤摄食不同种类饵料的miRNAs表达特征,可以为深入了解miRNA对鲤摄食不同种类饵料过程的调控作用奠定基础。

为了研究不同温度和摄食率对鲈鲤幼鱼摄食代谢特征的影响,在15和25°C条件下驯化4周后,以泥鳅块为饵料,按不同的摄食率(15°C下摄食率为1%、2%和4%体质量,25°C下摄食率为1%、2%、4%和6%体质量)投喂实验鱼[体质量(38.35±0.49) g,体长(14.22±0.10) cm],随后测定其耗氧率并计算其摄食代谢相关参数。结果显示,在相同的摄食率下,25°C驯化组静止代谢率、摄食代谢峰值、特殊动力作用(SDA)总耗能和SDA系数都显著高于15°C驯化组;25°C驯化组在2%和4%摄食率下的SDA时间显著小于15°C驯化组。在25°C驯化组中,4%摄食率组的代谢峰值、峰值比率、SDA时间和SDA总耗能都显著高于1%和2%摄食率组,但是显著低于6%摄食率组,4%和6%摄食率组的峰值时间显著高于1%和2%摄食率组,2%、4%和6%摄食率组的SDA系数显著低于1%摄食率组;在15°C驯化组中,4%摄食率组代谢峰值、峰值比率、SDA时间和SDA总耗能都显著高于1%和2%摄食率组,各个摄食率组的峰值时间和SDA系数没有显著性差异。研究表明,相比于低温条件,25°C水温条件可能更有利于鲈鲤幼鱼对食物的快速消化和吸收;随着摄食率的增加,鲈鲤幼鱼通过代谢峰值的增加和SDA时间的延长来满足其SDA耗能增加的需求。本研究结果为鲈鲤的养殖实践和物种保护提供了重要的参考依据。

[目的]本试验旨在探究膨化饲料及其补充抗应激剂对团头鲂(Megalobrama amblycephala)生长性能、消化酶活性、应激及生长与摄食相关基因表达的影响。[方法]由饲料公司按实际生产条件制备了三种配方相同的饲料，即硬颗粒饲料、膨化饲料及添加抗应激剂的膨化饲料。将平均体重为14 g左右的15 000尾团头鲂(Megalobrama amblycephala)随机放入三个水槽中(规格为：20 m×4 m×2 m，长×宽×高)，每个水槽5 000尾鱼。然后，将其随机分为三组，即全程投喂普通膨化饲料组(extruded feed, EF )、全程投喂添加抗应激剂的膨化饲料组(anti-stress feed, AF )及前90 d投喂普通膨化饲料而后90 d投喂硬颗粒饲料的间隔投喂组(PE: Pellet and Extruded Feed)。每天8：00、12：00及16：00将鱼饱食投喂3次，养殖期为180天。分别在到第91天和第181天时采样，测定指标。[结果]第91天，AF组增重率、体长以及平均日增重均显著高于另外两组(P＜0.05)，另外两组间无显著差异(P＞0.05)。第181天，PE 组增重率与体长均显著高于EF组(P＜0.05)，且其肥满度与脏体比均显著高于另外两组(P＜0.05)，但平均日增重与AF组差异不显著(P＞0.05)。第91天，各组体组成无显著差异。第181天，PE组体粗脂肪含量显著高于另外两组(P＜0.05)。第91天，AF组蛋白酶、脂肪酶及淀粉酶活性均显著高于另外两组(P＜0.05)。第181天，PE组蛋白酶和脂肪酶活性显著高于EF组(P＜0.05)，但与AF组差异不显著(P＞0.05)。第91天，AF组血浆皮质醇浓度和乳酸水平均显著低于另外两组(P＜0.05)。第181天，EF组皮质醇浓度和乳酸水平均显著高于另外两组(P＜0.05)，且另外两组间无显著差异(P＞0.05)。此外，三组间肝脏瘦素mRNA表达量无显著差异(P＞0.05)，但EF组肝脏胰岛素样生长因子I及垂体生长激素受体和神经肽Y的mRNA表达量均显著低于另外两组(P＜0.05)，且另外两组之间差异不显著(P＞0.05)。此外，PE组生长激素的mRNA表达量显著高于其他组(P＜0.05)，而EF组胆囊收缩素的mRNA表达量显著高于其他两组(P＜0.05)。[结论]与全程投喂普通膨化饲料组相比，添加抗应激剂膨化饲料可显著提高团头鲂生长性能和抗应激能力。此外，普通膨化饲料与颗粒饲料间隔投喂也可提高团头鲂生长性能及生长激素的基因表达。

为考察摄食水平对岩原鲤幼鱼摄食代谢和力竭运动后代谢特征的影响,在(25±0.5)℃条件下,将实验鱼[体质量(13.05±0.17)g]轻度麻醉后灌喂不同摄食水平(通威鲤鱼种饲料,饵料分别为体质量的0%、0.5%、1%和2%)的混合饵料,随后在不同时间点测量其耗氧率并计算相关参数。结果显示,各个摄食处理组和对照组的静止代谢(RMR)无显著性差异;摄食后,各摄食水平组岩原鲤代谢率均呈现先上升后下降的整体变化趋势;0.5%和1%摄食水平的SDA耗能和峰值时间无显著性差异,但都显著低于2%摄食水平组(P<0.05)。摄食水平从0.5%上升到2%,摄食代谢峰值(PMR)和SDA系数无显著性变化;摄食组运...

瓯江彩鲤(Cyprinius carpio var. color)是一种既可食用又可观赏的优良养殖对象。为了解不同体色瓯江彩鲤间生长差异的代谢生理基础,本研究分析了4种体色类型("全红"、"大花"、"粉玉"和"粉花")瓯江彩鲤间的生长、摄食率、消化酶活性和呼吸代谢率差异及其相关性。结果显示, 4种体色瓯江彩鲤的绝对增重率和特定增重率、日摄食量和日摄食率、胰蛋白酶活性大小差异顺序均为"大花">"粉花">"全红">"粉玉";其中带有大块黑色斑纹的"大花"和"粉花"体色个体的上述性状显著高于无黑色斑纹的"全红"和"粉玉"体色(P0.05);相关性分析发现,特定增重率和摄食率、特定增重率与胰蛋白酶活性、摄食率与胰蛋白酶、脂肪酶活性的相关性均达到显著或极显著(P<0.05或P"全红">"粉花">"粉玉",表现出红色体色的呼吸耗氧率高于白色体色。以上结果反映了4种体色瓯江彩鲤的生长差异是与其相关代谢生理基础相关联的,为瓯江彩鲤的进一步种质改良与育种提供了理论依据。

为研究crh (Corticotropin-releasing hormone)基因对鱼类摄食的调控作用,首次克隆了银鲫(Carassius auratus gibelio) crh基因c DNA全长序列。运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测crh基因m RNA在不同组织的表达及餐前、餐后和禁食对其表达的影响。结果显示,银鲫crh基因的c DNA序列全长为920 bp,其中,5’-UTR为53 bp,3’-UTR为378 bp,开放阅读框(Open reading frame,ORF)为489 bp。推导银鲫crh基因的ORF区编码蛋白由162个氨基酸组成,其中,含有11个氨基酸的保守区,24个氨基酸的信号肽,41个氨基酸的成熟肽。氨基酸序列的多重比较分析显示,银鲫crh基因与金鱼(Carassiusauratus)的同源性为99%,与鲤(Cyprinuscarpio)的同源性为96%。荧光定量PCR表达分析显示,银鲫crh基因在下丘脑中的表达量最高,其次是端脑和心脏。crh基因的表达量在餐前与餐后没有显著变化(P>0.05),在禁食第5天、第7天出现极显著降低(P<0.01),而在复投喂后第9天、第11天出现极显著升高(P<0.01)。以上结果显示,crh基因在银鲫摄食调控方面可能扮演着重要角色。

本研究基于转录组学的分析结果，克隆分析了银鲳(Pampus argenteus)二肽酶(dehydropeptidase， dp1)、羧肽酶A (carboxypeptidases， cpa2l)和磺基转移酶(sulfotransferase， sult2) 3个营养代谢相关基因，并探讨了其在消化吸收水母(Scyphozoa)过程中发挥的功能。通过RACE技术克隆获得了银鲳dp1、cpa2l和sult2基因的cDNA全长序列。dp1基因全长2 522 bp，包含1个1 272 bp的开放阅读框(ORF)，含有1个由23个氨基酸组成的信号蛋白肽和1个典型的酰胺水解酶超家族的结构域。cpa2l基因全长1421 bp，ORF长1260 bp，含有1个由16个氨基酸组成的信号蛋白肽和1个典型的M14金属羧肽酶家族的结构域。sult2基因全长1 834 bp，ORF长714 bp，含有1个典型的磺基转移酶家族的结构域。银鲳Dp1、Cpa2l和Sult2与蓝鳍金枪鱼(Thunnus maccoyii)同源性最高，系统进化树结果也显示，银鲳dp1、cpa2l和sult2和蓝鳍金枪鱼对应基因聚在一个分支上，亲缘关系最近。运用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测了dp1、cpa2l和sult2基因在不同组织中的表达水平及摄食水母对3个基因不同组织中表达规律的影响。结果发现，银鲳dp1基因在肝脏中表达量最高(P<0.05)，与未摄食水母组相比，dp1基因在摄食水母组的脑和鳃中表达量均极显著增加(P<0.01)，在中肠和肾脏中显著增加(P<0.05)，而在肌肉中显著下降(P<0.05)。cpa2l基因在未摄食水母组的中肠的表达量最高，而在摄食水母组的肾脏的表达量最高(P<0.05)，与未摄食水母组相比，摄食水母组cpa2l基因在肝脏中的表达量极显著增加(P<0.01)，而在中肠和肌肉中却极显著下降(P<0.01)。sult2基因在肝脏中表达量最高(P<0.05)，与未摄食水母组相比，sult2基因在摄食水母组的中肠、脑、鳃、肝脏和肾脏中表达量显著增加(P<0.05)。上述结果表明，dp1、cpa2l和sult2基因在银鲳摄食水母后机体营养物质的消化吸收和代谢过程中起重要的调节作用，基于摄食水母后3个基因组织表达模式的比较分析，推测dp1主要参与调控消化吸收和组织中营养素沉积的过程，cpa2l主要参与调控肝脏中营养代谢的过程，而sult2可能在整个消化吸收和代谢过程中均起到重要的调控作用。

通过对新疆乌伦古湖１４５０尾河鲈食性的鉴别与统计，比较了不同年龄组（０＋～９＋）在不同季节食物组成及摄食强度，研究了河鲈摄食生态位的时空格局，并综合其生长生殖特点探讨了可能存在食浮游一底栖动物群（０＋～２＋），食鱼群（３＋及３＋以上）两种生态类群及该物种的摄食生态策略。

采用荧光定量RT-PCR方法对奥利亚罗非鱼DMO和DMT基因的时空表达进行了研究。结果发现,这两个基因均从原肠胚早期开始转录,一直到出膜,都维持着较高的表达水平,但DMO表达量明显高于DMT。从鱼苗孵化出膜的第1天开始,随着日龄的增加,DMO和DMT基因的表达量均增加,但DMO在性腺和脑中都能表达,而DMT则仅在精巢中专一性表达。鱼苗性腺分化时期,也可影响DMO和DMT基因的表达量,提示它们可能与激素调控有关。在雌、雄鱼的肝和肾等5种组织中均检测不到这两个基因转录本的存在;在脑中仅可检测到DMO基因不同强弱的转录本,呈现出很强的中枢神经系统的表达特异性。此外,在成体的卵巢和精巢中分别只可检测到...

本文旨在克隆鲤(Cyprinus carpio)激素敏感性脂肪酶a (hormone-sensitive lipase a, lipea)基因,探究其时空表达特征及其与脂肪沉积的关系,以期为鲤脂肪沉积分子调控机制研究奠定理论基础。本实验采用RACE技术克隆获得鲤lipea基因,其cDNA全长为3379 bp,包括230 bp的5′非翻译区(5′-UTR)、1067 bp的3′非翻译区(3′-UTR)和编码693个氨基酸的开放阅读框。多序列比对显示,鲤lipea与斑马鱼(Danio rerio)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)和虹鳟(Oncorhynchusmykiss)的氨基酸序列相似性分别为88.17%、64.94%和63.35%,不同物种间序列差异主要集中在C-端的多肽序列上。蛋白质结构分析显示该蛋白含有3个功能域分别具有脂肪酶活性、乙酰基水解酶活性和水解酶活性。应用实时荧光定量PCR技术分析了lipea基因在鲤各组织、不同发育时期以及脂肪含量极端差异个体的肌肉和脂肪组织中mRNA表达量的变化。结果显示, lipea在各组织中均有表达,腹腔脂肪中相对表达量最高,其次是腹部肌肉,血液中最少。随着胚胎的发育, lipea的表达水平呈现下降趋势, 8细胞期表达量最高,其次是囊胚晚期,开口期最少。lipea表达量与背部肌肉脂肪含量呈正相关,但差异不显著(P>0.05),与腹腔脂肪量呈负相关,且差异极显著性(P<0.01),推测lipea基因对鲤腹腔脂肪沉积可能具有抑制作用。本实验结果可为进一步解析鲤lipea基因的功能和基因调控脂肪沉积分子机制研究提供参考。

以肉食性鱼类翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)为研究对象,对其肽YY(peptide YY,PYY)基因进行鉴定和分析,并通过中枢注射人工合成的鳜PYY多肽,研究PYY对翘嘴鳜摄食量的影响。氨基酸序列多重比对结果发现,sc-PYY与各个物种的氨基酸序列高度保守,鱼类中与狼鲈(Dicentrarchus labrax)、红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)一致性较高;实时荧光定量PCR检测sc-PYY mRNA表达的组织分布,结果显示,sc-PYY mRNA在脑中表达量最高,在肠道、肌肉、眼睛中亦有较高的表达;翘嘴鳜中枢注射PYY后,摄食量在4 h相比于对照组(PBS)显著性下降。这表明PYY可能在减少鳜的食物摄入量中发挥着重要的作用。

【目的】探究日本医蛭在不同摄食阶段、各个组织（唾液腺、肠、嗉囊、皮肤及精卵巢）中水蛭素基因（hirudin）的时空表达模式，以期为水蛭药材的科学合理利用提供理论依据。【方法】基于课题组前期的水蛭唾液腺转录组数据筛选结果及基因克隆获得的水蛭素基因序列信息，利用实时荧光定量PCR方法，对水蛭关键活性成分的编码基因hirudin在不同摄食阶段、不同组织中的表达量进行检测分析，研究该基因的时空表达模式。【结果】水蛭素基因（hirudin）在日本医蛭的唾液腺、肠、嗉囊、皮肤及精卵巢组织中均有表达，且在唾液腺中的表达量显著高于其他组织；Hirudin基因在不同摄食阶段的唾液腺组织中表达结果显示，摄食后第2天表达量显著升高，之后随着摄食时间的推延而出现下降趋势；Hirudin基因在嗉囊、肠中的表达量呈先升高后下降的趋势，分别于摄食后第1天、第2天达到最高，之后会随着停食时间延长而呈现下降趋势，尤其是在摄食后第7天、第8天的表达量呈现显著性降低；Hirudin基因在皮肤组织中也有表达，并随着停食时间的延长呈先升后降的趋势，最高峰出现在摄食后第2天；在精卵巢组织中，摄食期间hirudin基因的表达量最高，与其他摄食阶段的表达呈现显著性差异。【结论】水蛭素基因hirudin在日本医蛭的唾液腺、肠、嗉囊、皮肤和精卵巢组织中均有不同程度的表达，在唾液腺中的表达量显著高于其他组织。摄食行为及食物刺激可能影响水蛭素基因（hirudin）的表达，在不同摄食阶段的表达量存在显著差异。研究结果可为水蛭药材的科学采收加工、提取部位的科学选取、合理入药提供理论依据和技术支撑，对未来水蛭药材资源的可持续利用具有重要的参考价值。