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[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 席鹏彬  李德发  郑春田  
通过建立体外透析胃蛋白酶 胰酶制剂两步酶解法测定菜粕粗蛋白消化率的标准测定步骤及适宜酶促反应条件 ,并研究在所建立条件下测得菜粕粗蛋白体外与体内消化率间的相关关系。结果表明 ,建立适宜酶促反应条件为 :1g菜粕在 10mL胃蛋白酶溶液 (10mg·mL-1)、pH2 .0、37℃条件下水解 1h ,调至中性后转入透析袋内 ,再加入 10mL胰酶溶液 (4mg·mL-1) ,在 0 .0 1mol·L-1、pH 7.5、37℃磷酸缓冲溶液中水解 2 4h ,期间更换 5次缓冲液。菜粕干物质和粗蛋白体外消化率与相应回肠表观 (真 )消化率之间显著相关 (r=0 .86~ 0 .99) ,粗蛋白体...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 彭健  B.A.Slominski  W.Guenter  L.D.Campbell  熊远著  
采用胃蛋白酶 胰蛋白酶两步水解双低菜籽饼粕样品 ,并用特定分子量拦截值的透析袋移出小分子的酶解产物的方法 ,离体测定了 3个中国双低菜籽饼粕与 1个加拿大卡诺拉饼粕的蛋白质消化率。试验结果表明 ,用本方法离体测定的卡诺拉粕蛋白质的消化率 (73.5 9% )与猪回肠末端和成年公鸡活体测定的结果相当一致 ,证明本方法在预测双低菜籽饼粕蛋白质的消化率时准确可靠。测定结果进一步揭示了加工方式对双低菜粕品质的影响
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 田河山  胥清富  陈杰  
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张立兰  陈亮  钟儒清  张宏福  
【目的】研究外源蛋白酶对肉鸡饲粮体外干物质消化率(DMD)和酶水解物能值(EHGE)的影响,并使用仿生法获取饲粮中外源蛋白酶的最适添加量,为饲用酶制剂效价快速评价方法的建立提供理论参考。【方法】试验采用单因素完全随机设计,对照组分别为肉鸡前期和后期基础饲粮(粗蛋白质水平分别为:24.29%和21.72%,干物质基础),试验组分别在肉鸡前期和后期基础饲粮中添加0、15 000、75 000和150 000 PROT·kg-1的外源蛋白酶,试验共8种饲粮样品,每种饲粮样品设5个重复,每个重复1根仿生消化管,使
[期刊] 农业现代化研究  [作者] 黄瑞林  谭支良  邢廷铣  潘亚非  李铁军  
本研究确定的体外透析管法测定饲料蛋白质和氨基酸消失率的适宜酶促反应条件是 :温度 3 5℃ ,胃蛋白酶溶液浓度 0 .0 0 1 g/ml,胰蛋白酶溶液浓度 0 .0 0 2 5g/ml( p H7.6) ,透析液体积 3 0 0 ml( 1 .0 0 0 0 g样品 ) ,胰蛋白酶处理时间2 4 h。依据体外透析管法的测定结果 ,建立了估测饲料蛋白质和氨基酸消化率的回归预测模型。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 薛梅  黄继超  钱钊  黄明  周光宏  
在体外,将μ-钙激活酶用不同浓度的氧化剂(0μmol·L-1H2O2+0μmol·L-1Fe2+、300μmol·L-1H2O2+600μmol·L-1 Fe2+、400μmol·L-1 H2O2+800μmol·L-1 Fe2+、500μmol·L-1 H2O2+1 000μmol·L-1 Fe2+)氧化,并用其孵育分离纯化的牛肉肌原纤维蛋白,通过SDS-PAGE和Western blotting分析氧化的μ-钙激活酶对肌原纤维蛋白降解的影响。结果表明:随着氧化剂浓度的升高,μ-钙激活酶降解肌间线蛋白和肌钙蛋白T的能力减弱,同时相对分子质量为30×103肌钙蛋白T降解的产物减少。表明,μ-钙...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 余佳  荣建华  熊善柏  
为充分利用白鲢废弃物,利用碱性蛋白酶水解白鲢内脏,考察了温度、pH值、加酶量、料液比对白鲢内脏水解效果的影响。通过正交试验优化水解条件,结果表明:白鲢内脏水解的最佳条件是,酶解温度50℃,pH9.0,加酶量2000U/g,料液比1:3。在最佳酶解条件下水解7.5h,内脏蛋白质的水解度为41.73%,氮收率为64.76%。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王喆  刘茜倩  庞博  张晓辉  鲍恩东  
[目的]本研究旨在提供蛋白酶治疗奶牛乳房炎的参考数据,了解胰蛋白酶和糜蛋白酶的体外微生物敏感性。[方法]通过测定细菌的A600绘制不同细菌的生长曲线,探讨了0.5C浓度胰糜蛋白复合酶(胰、糜蛋白酶各0.08 mg·m L-1)、1C浓度胰糜蛋白复合酶(胰、糜蛋白酶各0.16 mg·m L-1)、2C浓度胰糜蛋白复合酶(胰、糜蛋白酶各0.32 mg·m L-1)及其与头孢噻呋钠、磷酸替米考星和硫氰酸红霉素联用对5种常见奶牛乳房炎致病菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、巴氏杆菌、无乳链球菌、停乳链球菌)生长的影响。同时,采用电子显微镜扫描技术,观察胰糜蛋白复合酶与头孢噻呋钠协同对大肠杆菌超微结构的影响。...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王政  杨国宇  潘玉善  郏自明  
用二次回归通用旋转设计、响应面分析法,研究三因素五水平下胰蛋白酶水解酪蛋白的反应,得到了一定条件下酪蛋白在酶作用下水解程度的变化规律。根据回归方程利用统计优选法寻优,确定了最优水解条件:温度为58℃,pH值为7.4,酶底比为0.7%。
[期刊] 华北农学报  [作者] 李美香  李铁军  宾石玉  印遇龙  黄瑞林  伍国耀  
分别从超滤管用于酶解酪蛋白测定的可行性、不同规格超滤管对酶解酪蛋白测定的影响、酶解酪蛋白的适宜添加量、酶解酪蛋白应用的动物试验步骤以及酶解酪蛋白测定效果等方面,对酶解酪蛋白方法测定猪回肠内源性氨基酸排泄量进行了综述。
[期刊] 水产学报  [作者] 王长云  薛长湖  陈修白  
低酶水解法提取无苦味鳀鱼水解蛋白王长云,薛长湖,陈修白(青岛海洋大学水产学院,266003)关键词鳀鱼,水解蛋白,无苦味,低酶水解法PREPARATIONOFFISHNON-BITTERHYDROLYSATEFROMANCHOVY(ENGRAULIS...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 储卫华  陆承平  
对体外培养嗜水气单胞菌的胞外蛋白酶 (ECPase)产生条件进行了优化。结果发现 ,其产量与碳源、氮源、培养温度、培养基初始pH值等有关。蔗糖能促进蛋白酶的产生 ,NH4 + 抑制蛋白酶的产生。其最佳产酶条件为 :pH 7 5的0 0 2mol·L-1KC1,0 0 6mol·L-1K2 HPO4 ,5g·L-1的蔗糖和 5g·L-1的胰蛋白胨水 ,2 8℃ ,15 0r·min-1摇床培养 6 5h。在此条件下酶活性可达 2 0 8U·mL-1。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李雪男  冯上乐  王贺  申晓雅  陈一格  白志毅  李文娟  
胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factors 2, IGF2)在多种细胞生长、分化和合成代谢的调节中发挥重要的调控作用。本研究成功构建了淡水珍珠贝三角帆蚌IGF2的重组质粒pEGFP-IGF2和pET32a-IGF2,通过pEGFP-IGF2-细胞转染,表明该蛋白定位在细胞质与细胞核中。将pET32a-IGF2转化到BL21 (DE3)中进行蛋白诱导表达,成功得到其原核表达载体,SDS-PAGE检测显示,在约25kD处有一条清晰的条带,符合目的条带大小(26.27kD),且主要表达于上清液中。为研究重组蛋白IGF2对三角帆蚌细胞活性的作用,本研究通过CCK8细胞活性测定,进一步探讨了添加不同浓度重组目的蛋白(0 μg/mL、2.5 μg/mL、5 μg/mL、7.5 μg/mL、 12.5 μg/mL、17.5 μg/mL、 22.5 μg/mL)培养的三角帆蚌外套膜细胞增殖活性。结果显示,三角帆蚌IGF2重组蛋白能显著促进三角帆蚌外套膜细胞的增殖活力(P<0.05),且在其浓度为12.5 μg/mL时对三角帆蚌外套膜细胞的促生长效果最佳,这为促进三角帆蚌外套膜细胞传代、细胞系建立奠定了基础,也为下一步探究IGF2在贝类中的功能提供依据。
[期刊] 农业现代化研究  [作者] 李铁军  贺建华  陈孝珊  
通过研究脱毒桐饼 (粕 )不同重量和粒度、碱溶液的浓度及 p H值、搅拌时间与离心时间以及离心速度等对蛋白质溶解度的影响 ,确定了测定脱毒桐饼 (粕 )蛋白质溶解度的适宜条件。结果表明 ,其适宜的条件是 :脱毒桐饼(粕 )样品 1.5 g(± 0 .0 0 1) ,需置于 75 m l的 p H值为 13.8的 3% (w/ v) KOH溶液中 ,经磁力搅拌 30 min,取搅拌液5 0 ml于离心机内离心 10 min,转速为 30 0 0转 / min(Rpm) ,再取离心上清液 15 m l,通过凯氏半微量定 N法测定其蛋白质含量 ,最后计算脱毒桐饼 (粕 )蛋白质溶解度
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 黄志坚  董瑞兰  罗刚  江和基  
采用体外细胞黏附模型,研究菠萝蛋白酶对K88+产肠毒素大肠杆菌(ETEC)黏附大鼠小肠黏膜上皮细胞的抑制作用.结果表明:菠萝蛋白酶能显著降低K88+ETEC的黏附率,且与庆大霉素的抑菌效果相当(P>0.05).由此可以推测,菠萝蛋白酶能体外抑制K88+ETEC菌毛黏附上皮细胞,阻止K88+ETEC对肠道的侵袭,为临床提供一定的理论依据.
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