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[期刊] 中国农业科学  [作者] 王梦芝  程欣  谢文文  张柏松  刘翔  王洪荣  
【目的】研究体外培养条件下,不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环及微生物群体的影响。【方法】3头瘤胃瘘管山羊提供瘤胃液,分别以菜籽油(A)、豆油(B)、玉米油(C)和花生油(D)为底物培养瘤胃微生物,同时设空白对照组,培养10h时用荧光标记瘤胃细菌法进行原虫吞噬细菌试验。【结果】原虫密度以对照组最高,显著高于A、B、C组(P<0.05);细菌密度以B组最高,为4.906×109cells·mL-1,显著高于对照组(P0.05),细菌蛋白组以B组最高,B、C、D均高于对照组(P<0.05)。各组原虫的吞噬速率分别为:267.6(对照组)、196.2(A组)...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王梦芝  王洪荣  李国祥  曹恒春  卢占军  
【目的】采用荧光染色标记细菌(fluorescence labeled bacteria,FLB)技术,研究山羊瘤胃中原虫对细菌的吞噬速率。【方法】利用4只装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采集瘤胃液以获取瘤胃原虫和细菌。试验设置清洗原虫祛除瘤胃自由细菌的荧光全标组(WFLB)及未清洗原虫保留瘤胃自由细菌荧光标记组(FLB)。【结果】WFLB组和FLB组的吞噬速率分别为398.4cells/(cell·h)和230.4cells/(cell·h),换算为细菌N为:2.15pgN/(cell·h)/和1.24pgN/(cell·h)。【结论】每天每头羊由原虫在瘤胃内循环中带出的细菌N损失在WFLB组...
[期刊] 华北农学报  [作者] 董瑞兰  于光辉  
瘤胃是反刍动物进行饲料消化的发酵罐,瘤胃中寄存的复杂微生物主要包括瘤胃细菌、原虫和真菌,其相互作用为饲料的消化吸收提供了可靠的保障。研究原虫对细菌活性的影响,以探讨原虫是否有助于促进或保持瘤胃细菌的活性。以2头安装有永久性瘤胃瘘管的西门塔尔牛作为瘤胃液供体动物,同时以羊草为发酵底物,设置3个处理,分别包括细菌组、原虫组及原虫+细菌组。各处理羊草的发酵规律采用体外培养法连续测定24 h。发酵结束后测定瘤胃液的pH值,各处理组羊草的总产气量和各气体成分(包括CH4、CO2和H2)含量以及各挥发性脂肪酸(VFA)的产量用气相色谱仪测定。结果表明,细菌+原虫组的总产气量显著高于细菌组(P
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 毛胜勇  陈洁  姚文  朱伟云  
采用体外厌氧共培养技术,研究了山羊瘤胃真菌对瘤胃细菌发酵的影响。结果表明:在瘤胃真菌与瘤胃细菌共培养24 h内,瘤胃真菌对瘤胃细菌表现出一定的抑制作用,共培养组24 h时底物稻草表观干物质消失率(5.85%)、总挥发性脂肪酸浓度(28.21 mmol/L)及乙酸浓度(20.32 mmol/L)显著低于瘤胃细菌培养组(10.49%、32.66 mmol/L和24.39 mmol/L);而共培养组在48 h和72 h时稻草表观干物质消失率(24.37%、29.04%)均高于瘤胃细菌培养组(21.69%、26.41%);试验结果同时显示,经灭菌处理的瘤胃真菌发酵液可显著降低瘤胃细菌对稻草片段的降解活...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 曾燕  孙朋  倪学勤  杨杰  曾东  张洪瑜  
为探讨瘤胃细菌多样性,采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(Polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术结合共性及特异性条带的克隆测序和聚类分析及主成分分析,对牛体外厌氧条件下瘤胃细菌在CMC、PCS、J、K培养基及37和50℃培养温度下的多样性进行研究。结果表明:1)37℃条件下不同培养基的DGGE图谱差异较大,虽然具有较高的平均条带数,CMC和K培养基样品分别为20和27条,但各样品间的相似性系数较低,J和CMC培养基间的相似性系数为0.84,J和PCS培养基间的相似性系数仅为0....
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王梦芝  王洪荣  徐爱秋  张洁  陈旭伟  
【目的】研究以稻草为主的日粮条件下徐淮白山羊瘤胃细菌和原虫的类群结构。【方法】以4只安装瘤胃瘘管的徐淮山羊为试验动物,PCR扩增瘤胃细菌16SrDNA序列,利用分子克隆与测序分析、细胞计数等技术,解析瘤胃细菌和原虫群体的类群组成。【结果】获得的细菌克隆基本归为两簇:与瘤胃球菌R.bromii YE282相似性为95%的XHGR1、与瘤胃R-7菌相似性为98%的XHGR3,XHGR2位于另立的R.flavefaciens簇。瘤胃球菌属细菌占细菌克隆总数的比例较高(33.33%),原虫生物量略低于细菌,占瘤胃生物总量的44.83%。群体主要有内毛属、双毛亚科、前毛属、头毛属和等毛科等原虫,其中内毛...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 李德勇  孟庆翔  崔振亮  和立文  任丽萍  
为研究植物蜕皮甾酮、大蒜提取物、苍术提取物、桑叶提取物和牛蒡子提取物对瘤胃体外发酵的影响,试验利用体外产气量法设对照组(未添加组)和5个试验组,每种植物提取物的添加水平为1.5%,测定了发酵24和48h的DM消化率以及发酵96h的发酵参数。结果显示:1)和对照组相比,各试验组24hDM消化率无显著性差异(P>0.05),植物蜕皮甾酮和大蒜提取物组48h的DM消化率显著高于对照组(P0.05);3)各组之间pH无显著性差异(P>0.05);植物蜕皮甾酮、桑叶提取物和苍术提取物组的NH3-N浓度显著低于对照...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 金恩望  王加启  卜登攀  周凌云  孙鹏  姜雅慧  包万华  史浩亭  李发弟  
为探讨植物精油对瘤胃体外发酵的影响,采用体外产气法分析不同添加水平的茶树油、肉桂油和丁香油对瘤胃发酵模式、发酵产气量及动力学参数和瘤胃氮代谢的影响。与对照组相比结果表明:1)添加各剂量的茶树油和肉桂油对微生物蛋白(MCP)含量无显著影响,但氨氮(NH3-N)浓度均有降低趋势,其中添加300和1 500mg/L肉桂油显著降低了NH3-N浓度(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 胥清富  陈杰  王子荣  任明强  陆天水  
从 6头装有瘤胃瘘管的公水牛收集瘤胃液和唾液 ,加干草粉作底物 ,进行体外厌氧培养。每隔 2h采样测pH、挥发性脂肪酸 (VFA)、氨氮 (NH3 N)、微生物粗蛋白 (MCP) ,并在培养结束后测干物质 (DM)和酸性洗涤纤维 (ADF)消失率。结果显示 ,与人工唾液相比 ,唾液使草粉DM和ADF消失率分别提高 17 95 % (P 0 0 5 ) ,12 2 4% (P >0 0 5 )和10 5 4% (P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 沈赞明  陈杰  任明强  
研究了五肽胃泌素对体外培养瘤胃微生物挥发性脂肪酸代谢和蛋白质合成 ,以及CCK2 /gastrin特异性受体阻断剂丙谷胺对其作用的影响。实验分两系列 :Ⅰ 经瘤胃瘘管从采食粗料的绵羊、山羊收集瘤胃液 ,分别加入 0、 1× 1 0 -1 2 、1× 1 0 -1 0 和 5× 1 0 -1 0 mol·L-1 的五肽胃泌素 ,厌氧培养 8h ,测定挥发性脂肪酸和微生物蛋白质 ;Ⅱ 经瘤胃瘘管收集采食粗料添加部分精料的水牛瘤胃液 ,分别加入含有丙谷胺 (1 0 -1 0 mol·L-1 )、五肽胃泌素 (1 0 -1 0 mol·L-1 )、丙谷胺 (1 0 -1 0mol·L-1 ) +五...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 朱智  朱伟云  
体外法研究了底物精粗比(m(干草)∶m(精料))分别为10∶0、7∶3、5∶5、3∶7时,向发酵液中添加大蒜油(0、30、300和3 000 mg.L-1)对瘤胃微生物厌氧发酵24 h的影响。结果显示:24 h产气量随着大蒜油浓度的增加而降低(P0.05);30 mg.L-1和300 mg.L-1大蒜油降低乙酸比例和乙酸/丙酸(P<0.05),增加丙酸和丁酸比例(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 朱玉喜   曹雨涵   吕东海   高健   郭孟娇   孙展英   孙晓妮   成艳芬   刘锁珠   刘艳丰  
(目的)本研究旨在评价植物甾醇的组成和剂量在体外对瘤胃微生物发酵的影响。(方法)本试验采用双因素试验设计,设置不同组分(菜油甾醇、菜籽甾醇、谷甾醇和β -谷甾醇,编号为:A-D)和添加剂量(即0、0.03、0.10、0.20 μg·mL~(-1))的植物甾醇,添加到含60 mL瘤胃培养基和0.60 g全混合日粮的血清瓶中。血清瓶放置在恒温培养箱中39 ℃培养24 h,培养过程中动态测定血清瓶中的总气体和甲烷产量,在发酵结束时分别收集剩余培养基和发酵底物,分析底物消失率和微生物代谢参数,包括乳酸、氨氮、挥发性脂肪酸和微生物蛋白的浓度。(结果)结果表明,在0.20 μg·mL~(-1)条件下的植物甾醇β-谷甾醇的产气量高于其它处理(P < 0.05),并且增加植物甾醇的剂量可提高瘤胃微生物代谢所产生的总挥发性脂肪酸的浓度(P < 0.01),尤其提高了乙酸的摩尔比,其中β-谷甾醇的效果最好。针对各处理中植物甾醇组分及比例不同,进行线性回归分析,结果显示,植物甾醇产品中的菜油甾醇和β-谷甾醇对微生物生长代谢有促进作用,而菜籽甾醇和豆甾醇对微生物活动有抑制作用。(结论)综上所述,添加菜油甾醇和β-谷甾醇可促进体外瘤胃微生物生长与代谢,本试验中β-谷甾醇在0.20 μg·mL~(-1)时效果最好,且在本试验所用到的植物甾醇组分中,菜油甾醇和β -谷甾醇对瘤胃微生物体外活动的促进效果最为显著。
[期刊] 草业科学  [作者] 潘敏慧   黄小乘   田怡豪   孙占微   李成云  
本研究旨在分析不同添加剂处理柞树叶青贮对延边黄牛体外发酵瘤胃降解率和微生物菌群的影响。选择4头平均体重为(443.3±26.7) kg、装有永久性瘤胃屡管的延边黄牛公牛为瘤胃液供体。将青贮的柞树叶按照添加发酵添加剂的不同分为糖蜜组(M)、乳酸菌组(LAB)、EM菌组(一种混合菌一般包括光合菌、酵母菌、乳酸菌等有益菌类)(EM)、石灰水组(LW)、乳酸菌+糖蜜组(LAB-M)以及EM菌+糖蜜组(EM-M),每组3个重复。体外发酵48 h后,计算中性洗涤纤维降解率、干物质降解率以及粗蛋白质的降解率,并提取瘤胃液中的细菌总DNA,进行PCR扩增后用Illumina Hi Seq 2500测序平台进行高通量测序。结果表明:各青贮柞树叶试验组的干物质、粗蛋白质以及中性洗涤纤维的降解率均较对照组显著升高(P <0.05),EM组和EM-M组降解率增加最显著。LW组的干物质降解率、粗蛋白质降解率和中性洗涤纤维降解率显著低于其余的5个组(P <0.05)。不同发酵添加剂的青贮柞树叶对延边黄牛体外发酵瘤胃微生物菌群无显著影响(P> 0.05)。在门水平上,变形菌门、拟杆菌门以及厚壁菌门是反刍动物瘤胃内的主要微生物菌群。在属水平上,不动杆菌属、普氏菌属、弓形杆菌属是主要微生物菌群。综上所述,不同添加剂可以有效地改善瘤胃降解环境,提高瘤胃降解率。其中,EM组和EM-M组效果较好,且各试验组对于延边黄牛瘤胃微生物整体区系构成、微生物多样性以及微生物的丰度均无显著影响。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 沈赞明  韩正廉  
在系列Ⅰ(青草、干草、稻草)和系列Ⅱ(稻草添加精料及非蛋白氮)日粮条件下.分别测定了3头装有永久性瘤胃瘘管的去势公水牛瘤胃真菌孢子数量,体外培养120h的混合真菌胞外羧甲基纤维素酶(CMCase)和滤纸酶(FPase)的活力变化。结果表明:青草期瘤胃真菌数量及CMCase和FPase活力均显著高于稻草期(P<0.05);干草期CMCBse和FPase活力居中。稻草添加精料日粮时.稻草日粮(!期)添加混合精料(2kg/d)(Ⅱ期),瘤胃真菌数量无明显变化,但FPase活力显著降低(P<0.05);精料加羟甲基尿素(80g/d)添加于稻草日粮(Ⅲ期)对瘤胃真菌数量基本无影响,CMCase和FPas...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 程茂基  卢德勋  王洪荣  王岗  赵秀英  张海鹰  郭文华  
在体外分别研究了 36 ,72 ,14 4 ,2 16 ,32 4 ,4 5 0mg·L-16个水平的大豆肽、玉米肽和瘤胃液肽在瘤胃微生物培养液中的降解速度。结果表明 :随着培养时间的延长 ,3种来源肽处理的培养液中肽的含量均极显著降低 (P
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