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[期刊] 水产学报  [作者] 候利波  陆银月  任秋霖  孔祥会  朱雷  顾伟  孟庆国  
为了探究低氧胁迫对中华绒螯蟹血淋巴细胞影响的分子机制,本研究通过使用Nova Seq 6000测序技术,检测了低氧组(1.5±0.5)mg/L和对照组(6.0±0.5)mg/L处理24 h后的中华绒螯蟹血淋巴细胞的转录组数据变化。首先,对测序得到的原始数据进行拼接、注释以及筛选分析获得128 614个转录本和128 614条基因,平均长度为2 634 bp (N50),Q30 > 92%。其次,以1.2倍为阈值(P
[期刊] 中国水产科学  [作者] 朱宁宁  王文  顾志峰  李正荣  
改进常规血液细胞电镜制样技术 ,直接取中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)血淋巴液固定、脱水、包埋、电镜观察。结果显示 ,中华绒螯蟹血淋巴具有 3类细胞 ,即无颗粒细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞。其中 ,无颗粒细胞的核质比最大 ,异染色质高度浓缩、边缘化 ,几乎没有常染色质 ,胞质内线粒体数目相对较多 ,与高等动物的中幼红细胞结构很相似 ,该细胞数目在中华绒螯蟹血淋巴中最多 ,可能担负着血液的能量转换功能 ;小颗粒细胞核内常染色质较多 ,内质网、高尔基体发达 ,胞质中存在 0 .2~ 0 .4 μm的电子致密颗粒 ,而且胞质中有许多大小不一的空泡 ,细胞表面有许多突起似伪足 ,类似...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 郑宗林  黄辉  刘鸿艳  吴国忠  杨先乐  
通过体外及体内实验2种途径,探讨了壳聚糖对异育银鲫(Carassius auratus gibelio)和中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的血淋巴细胞部分特性的影响。体外实验通用3H-TdR、14C-UR、3H-Val掺入法研究了不同剂量[0μg/mL(对照)、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL和100μg/mL]的壳聚糖对异育银鲫PHA和LPS刺激的淋巴细胞DNA、RNA和蛋白质增殖的影响。结果表明,随着蟹血淋巴中壳聚糖剂量的增加,检测到3H-TdR、14C-UR、3H-Val的放射强度逐渐增强,当壳聚糖终质量浓度达20μg/mL时,PHA和LPS...
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 陆宏达  刘凯  张明辉  
对中华绒螯蟹血淋巴的血清、血浆和血细胞裂解上清液(HLS)中酚氧化酶(PO)的活力以及该酶最适pH和温度进行了测定分析,结果表明在血清和HLS中都有PO活力,而血浆中无PO的存在,血清中的PO来自于血细胞;以L-Dopa为底物,中华绒螯蟹PO活力的最适pH值为6.5,最适温度为40℃。采用SDS、Ca2+、Mg2+以及SDS与Ca2+联合和SDS与Mg2+联合分别对酚氧化酶原(proPO)进行激活试验,血清和HLS中的PO活力都有显著的增加,其中SDS的激活作用最强,Ca2+、Mg2+的激活作用最弱,SDS与Ca2+联合和SDS与Mg2+联合的混合激活作用介于SDS和Ca2+、Mg2+之间,激...
[期刊] 水产学报  [作者] 贾小燕  庄平  冯广朋  王瑞芳  卢俊  黄晓荣  
设定淡水对照组和两个盐度组(盐度12,盐度25),分别在第0、3、6、12、24、48、72、96、144小时取样,研究盐度对中华绒螯蟹雌性亲蟹6项血淋巴生化指标的影响。结果表明,在0~144 h内,盐度组中华绒螯蟹雌性亲蟹血淋巴总蛋白(TP)含量在前6 h显著高于对照组(P<0.0...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 殷丽坤  黄凯  于凯  宿志健  郭睿婕  杨旭红  吴耀庭  
为了探究低氧胁迫下中华圆田螺(Cipangopaludina cathayensis)肝脏组织基因的差异表达,本研究通过高通量测序技术,分析中华园田螺低氧胁迫组(2.5 mg/L)和常氧组(6.9 mg/L)某些基因的差异表达,并对差异基因进行生物信息学分析,进一步采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)对关键差异表达基因进行验证。结果显示,测序共获得232 379条基因(unigene),与对照组比较,低氧胁迫组筛到176个差异基因,包含64个上调基因和112个下调基因。GO功能注释分析显示,差异基因主要富集在生物学过程中的几丁质代谢过程和含氨基葡萄糖的复合代谢过程,细胞组分中的胶原三聚体成分,分子功能中的几丁质结合功能和糖衍生物结合功能。KEGG通路富集分析显示,差异基因主要集中于环境信息处理、遗传信息处理、代谢和生物系统这4大类通路。6个关键差异基因的RT-qPCR结果显示,热休克蛋白70B2和热休克蛋白β-6基因表达量上调,几丁质酶蛋白4、α-1胶原蛋白(XIV)、α-4胶原蛋白(XIV)、5-磷酸酶蛋白基因表达量下调,证实了转录组测序结果的可靠性。本研究发现,低氧胁迫激活了中华圆田螺适应缺氧的生理活动,并获得了低氧胁迫下中华圆田螺肝脏组织中相关功能基因的表达信息,为深入研究中华圆田螺响应低氧胁迫的调控机制提供了基础数据和理论依据。
[期刊] 海洋渔业  [作者] 张航利  冯广朋  庄平  王瑞芳  章龙珍  王海华  
在长江口中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)亲蟹生殖洄游期间,对比研究了不同性腺发育时期的长江口中华绒螯蟹雌性亲蟹自然群体和放流群体9项血淋巴生化指标的差异。结果表明,洄游亲蟹在性腺发育的不同时期,放流群体与自然群体血淋巴总蛋白、血蓝蛋白、甘油三酯、肌酐、Ca2+及Mg2+含量水平上均无显著差异(P>0.05)。放流群体亲蟹在性腺发育到Ⅳ、Ⅴ期时的血淋巴白蛋白含量和性腺发育到Ⅳ期时尿素含量均显著高于自然群体(P<0.05),总胆固醇含量在性腺发育到Ⅵ期时显著高于自然群体(P<0.05)。在性腺发育过程中放流群体的大部分血淋巴生化指标与自然群体都无显著差异,仅在性腺发育到Ⅳ期后少数...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 郭志勋  冯娟  王江勇  
通过检测注入斑节对虾(Penaeus monodon)血淋巴内的鳗弧菌(Vibrio anguillarumH)浓度、血淋巴细胞浓度和血淋巴细胞的组成变化,研究斑节对虾血淋巴细胞对进入体内细菌的清除作用。实验显示,斑节对虾能够迅速清除注入其体内的鳗弧菌。注射鳗弧菌悬液(107~108CFU/mL)5 min后,血淋巴中可检测到的鳗弧菌浓度是(1.4±0.6)×106CFU/mL,而2 h后所检测到的鳗弧菌的浓度仅相当于前者的3.1%。7天后,仅在部分个体的血淋巴中检测到少量鳗弧菌。伴随着血淋巴液内鳗弧菌的减少,对虾的血淋巴细胞浓度发生变化。鳗弧菌注入对虾体内5 min后,血淋巴细胞浓度为(3....
[期刊] 中国水产科学  [作者] 杜国儒   解伟   左佳俊   刘伟   王雪惠   隋丽英  
为探究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)免疫调节作用的分子机制,本研究分析了与3-羟基丁酸共培养的克氏原螯虾的血淋巴细胞转录组数据,发现细胞骨架基因呈显著的差异表达,推测其可能与克氏原螯虾的免疫调节相关。本研究对细胞骨架基因进行注释,并验证了其对细胞免疫调节的影响。注释结果显示,5个细胞骨架基因中4个为驱动蛋白超家族(kinesin family,KIF)基因,均含有KISc结构域,且编码氨基酸以谷氨酸、亮氨酸为主,蛋白质二级结构主要由α-螺旋组成。各物种中除kinesin-like protein的保守结构域及保守基序数量、种类和位置有所差别,其余KIFs基因大致相同。q RT-PCR结果表明,KIFs基因在克氏原螯虾的造血组织和鳃中表达量较高,在眼柄、肌肉等组织中表达较低(P<0.05)。RNAi结果证明,0.10μg/g体重剂量ds KIF11的敲降效果最佳,可将KIF11的表达量敲降至8.01%(P<0.05);与对照组相比,随着KIF11基因的敲降,血淋巴细胞对FITC标记的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和红色荧光微球的吞噬率分别下降36.26%(P<0.01)和41.94%(P<0.01)。上述结果表明KIFs基因保守性较高,参与了血淋巴细胞的吞噬作用,这一结果为深入研究KIFs基因在先天免疫中的功能和机制提供了依据。
[期刊] 水产学报  [作者] 姜仁良  谭玉钧  吴嘉敏  阎希柱  包祥生  姚继明  
河蟹在蜕壳前,血淋巴中 20-羟基蜕皮酮(20-HE)含量达到最高峰——116.16±32.96ng/ml;蜕壳时降入低谷——7.09±1.39ng/ml;蜕壳后仍然很低。血淋巴中20-HE 调控着河蟹的蜕壳周期。雌性河蟹卵母细胞进入大生长期,9月份血淋巴中 17β-雌二醇(17β-E_2)出现峰值——3.62±1.11ng/ml,促进了卵母细胞的卵黄积累。雄性河蟹10月份血淋巴中睾酮(T)含量开始上升,至12月份达到 2.15±0.28ng/ml,诱导精巢发育成熟。雌性河蟹血淋巴中 20-HE 含量在5月和8月各出现一个峰值,分别为 13.15±6.99和 15.80±7.40ng/ml;雄...
[期刊] 水产学报  [作者] 吴嘉敏  姜新耀  
中华绒螯蟹扣蟹性腺发育与肝胰腺和血淋巴的蛋白质浓度相关。性早熟前后 ,雌雄扣蟹肝胰腺总蛋白浓度分别由 (12 1.17± 44 .5 0 )mg·g-1和 (89.43± 2 1.86 )mg·g-1下降至 (81.0 8± 5 .84)mg·g-1和(70 .5 8± 9.90 )mg·g-1,雌性扣蟹的肝胰腺占体重的比值也由 8.18%降至 3 .90 %。血淋巴总蛋白浓度正常发育的雌性扣蟹为 (99.5 5± 12 .0 6 )mg·mL-1,明显高于性早熟雌性扣蟹的 (72 .2 6± 17.87)mg·mL-1;而雄性扣蟹性早熟前后的血淋巴总蛋白浓度无显著差异。肝胰腺总蛋白浓度二秋龄...
[期刊] 水产学报  [作者] 吴嘉敏  姜新耀  
中华绒螯蟹的性腺发育与血淋巴钙离子浓度相关。性早熟雌性扣蟹 (一秋龄 )血淋巴钙离子浓度为 2 1.2 5± 11.89mmol·L-1,明显高于正常发育的 13 .70± 1.17mmol·L-1;雄性扣蟹 (一秋龄 )则相反 ,性早熟扣蟹血淋巴钙离子浓度为 16 .33± 1.38mmol·L-1,低于正常发育的 2 0 .13± 2 .37mmol·L-1。二秋龄雄性成蟹的血淋巴钙离子指标与性早熟雄性扣蟹相当 ,无显著差异。随着个体的生长发育 ,雌性中华绒螯蟹血淋巴 17β -E2浓度逐步提高 ,正常发育扣蟹为 0 .15± 0 .0 5pg·mL-1,性早熟扣蟹为 0 .5 9± 0 ...
[期刊] 水产学报  [作者] 杨先乐  刘至治  孙文钦  蔡完其  
应用反相高效液相色谱法 (RP HPLC)建立了盐酸环丙沙星在中华绒螯蟹血淋巴内含量的测定方法。本法采用肌肉注射的给药方法 ,给药剂量为 8.17± 0 .5 6mg·kg-1和 6 .2 5± 0 .85mg·kg-1。血淋巴从心区抽取。经各种抗凝方法的比较 ,认为等量的ACD与等量的血淋巴混合 ,可得到持久的抗凝效果。血淋巴样经甲醇去蛋白 ,30 0 0r/min离心 10min后 ,取上清液上HPLC。色谱柱 ,RP ODS 5μ15 0× 4.6mm ;流动相 ,甲醇 磷酸缓冲液 四丁基溴化铵 =2 5 0∶75 0∶2 0 (v /v /v) ;流速 ,1mL·min-1;进样量 ...
[期刊] 海洋渔业  [作者] 郑宗林  叶金明  李代金  杨先乐  胡鲲  唐俊  
研究了不同水温(16℃、25℃)、不同给药剂量(10 mg/kg、20 mg/kg)和不同给药方式(肌注、口灌)等条件下,恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星在中华绒螯蟹体内的药代动力学,比较了不同条件下药物在蟹血淋巴中的吸收、分布和代谢的差异。结果表明,恩诺沙星在蟹血淋巴中的药-时数据符合开放式二室模型。16℃时以10 mg/kg剂量肌注给药后,恩诺沙星在蟹血淋巴的主要药代动力学参数为:AUC96.818 mg/(L.h),Cmax6.54μg/mL,t1/2α0.851 h,t1/2β95.415 h;25℃时以10 mg/kg剂量肌注给药后,恩诺沙星的主要药代动力学参数为:AUC168.457 ...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 贺露露  耿智  黄晓荣  冯广朋  庄平  赵峰  张涛  杨刚  
为探究盐度在中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)交配和产卵前后对血淋巴中5种激素的影响。本研究分别设置了0、2、4、6的交配盐度和3、6、9、12、15、18、21的产卵盐度,分析了不同交配和产卵盐度下中华绒螯蟹血淋巴中双羟基孕酮(DHP)、促性腺激素(GTH)、前列腺素(PG)、雌二醇(E_(2))和睾酮(T)的含量变化。结果显示,(1)在淡水中,雌蟹无交配行为发生,当盐度0.05)。(3)随盐度的升高,雌蟹产卵前,血淋巴中DHP、PG、E_(2)和T的含量均呈先下降再上升的趋势;产卵后血淋巴中DHP、PG、E_(2)则呈先上升而后下降的趋势,其中,当盐度为18时,雌蟹产卵后血淋巴中DHP、GTH、 PG、E_(2)和T均降到最低,且与产卵前相比均有显著差异(P<0.05)。(4)当盐度为6时,雌蟹产卵前血淋巴中DHP、PG、E_(2)和T的含量均最高,产卵后DHP和PG的含量下降,而GTH、E_(2)和T的含量均上升,但产卵前与产卵后相比除DHP有显著差异外(P0.05);此后随着盐度的逐渐升高,产卵前后血淋巴中T的含量呈先下降后上升的趋势。研究表明,盐度对中华绒螯蟹雌蟹交配和产卵前后血淋巴中5种激素产生了一定影响,其中,5种激素在中华绒螯蟹低盐度交配中的变化不显著,DHP、GTH和PG这3种激素参与了中华绒螯蟹的产卵活动。本研究通过探讨盐度对中华绒螯蟹雌蟹交配及产卵前后血淋巴中激素的影响,旨在了解中华绒螯蟹繁殖的生理机制,为中华绒螯蟹的繁育生物学研究提供基础资料和参考。
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