- 年份
- 2024(1054)
- 2023(1437)
- 2022(1211)
- 2021(1095)
- 2020(883)
- 2019(1827)
- 2018(1706)
- 2017(2800)
- 2016(1759)
- 2015(2010)
- 2014(1926)
- 2013(1846)
- 2012(1943)
- 2011(1786)
- 2010(1917)
- 2009(1727)
- 2008(1661)
- 2007(1663)
- 2006(1329)
- 2005(1312)
- 学科
- 管理(5414)
- 业(5074)
- 济(4974)
- 经济(4960)
- 企(4356)
- 企业(4356)
- 学(3701)
- 人事(1940)
- 人事管理(1940)
- 财(1846)
- 农(1769)
- 中国(1762)
- 害(1616)
- 生物(1588)
- 业经(1533)
- 及其(1511)
- 技术(1511)
- 方法(1507)
- 地方(1444)
- 虫(1399)
- 策(1304)
- 虫害(1264)
- 制(1260)
- 数学(1241)
- 数学方法(1227)
- 农业(1225)
- 病虫(1200)
- 病虫害(1200)
- 税(1200)
- 收(1186)
- 机构
- 大学(27831)
- 学院(27319)
- 研究(12380)
- 农(12048)
- 科学(10800)
- 农业(9713)
- 业大(8380)
- 中国(7942)
- 所(7839)
- 济(7565)
- 经济(7370)
- 研究所(7326)
- 管理(6790)
- 农业大学(6523)
- 室(6308)
- 京(6218)
- 省(6039)
- 实验(5945)
- 理学(5911)
- 实验室(5757)
- 理学院(5734)
- 管理学(5558)
- 管理学院(5521)
- 重点(5397)
- 业(5287)
- 中心(5005)
- 江(4656)
- 技术(4636)
- 院(4522)
- 科学院(4348)
共检索到42289条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
尹芬芬 杨帆帆 谢中艺 王雨柔 黄新祥 生秀梅 张盈
为探究伤寒沙门菌对巨噬细胞凋亡及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand, TRAIL)信号通路的影响,对伤寒沙门菌感染THP-1细胞早期和后期提取细胞RNA进行转录组测序(RNA-seq).通过定量PCR(qPCR)技术检测凋亡相关基因的转录水平,对RNA-seq结果进行验证,流式细胞术和蛋白质免疫印迹法检测THP-1细胞的凋亡和凋亡相关蛋白;加入TRAIL抗体结合TRAIL蛋白后,流式细胞术和蛋白质免疫印迹法检测感染早期THP-1细胞凋亡的变化.结果显示,伤寒沙门菌感染THP-1细胞后,凋亡相关基因caspase-3、caspase-8、caspase-9在感染后期转录水平显著增加,Tnfsf10、Tnfrsf10b、Tnf、Fas在感染早期和后期转录均增加,细胞凋亡率明显增加,caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白活化增加,TRAIL、DR5蛋白表达增加;与PBS对照组相比,加入TRAIL抗体后caspase-3蛋白活化明显减弱,细胞凋亡率明显下降.综上,伤寒沙门菌通过部分激活TRAIL信号通路来诱导巨噬细胞凋亡.
[期刊] 华北农学报
[作者]
肖红 何珍 田棋 黄鑫淼 廖卫东 黄廷华 姚敏
利用增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)表征鼠伤寒沙门氏菌株14028(Sal-14028),以研究其在猪肺泡巨噬细胞(3D4/21)中的示踪作用，首先将增强型绿色荧光蛋白基因通过电击法转入Sal-14028,经卡那霉素抗性培养基筛选和测序鉴定，获得了具有绿色荧光信号的阳性菌株并检测其荧光稳定性，命名为Sal-pPpagC-EGFP。接着在同等条件下对比荧光菌株和野生菌株(WT)的生长特性，通过小鼠感染试验检测EGFP基因的插入对荧光菌株毒力有无明显影响，以分析荧光菌株的生物学特性；应用荧光显微镜和间接免疫荧光法检测荧光菌株在猪肺泡巨噬细胞3D4/21吞噬溶酶体中的定位情况。结果显示，在不同时间点，EGFP标记的鼠伤寒沙门氏菌在荧光显微镜下发出强烈的绿色荧光，且所带荧光不受抗性选择的影响，可稳定遗传。相同培养条件下，荧光菌株Sal-pPpagC-EGFP生长曲线的变化趋势与野生株基本相同。另外，经过改良寇氏法计算出的LD_(50)与野生株相比无显著差异(P>0.05),说明EGFP基因的插入对荧光菌株毒力无明显影响。荧光菌株在感染猪肺泡巨噬细胞后，吞噬溶酶体内可观察到标记菌株，并随着时间增加菌株数量呈现增长趋势。表明荧光菌株除了具备发光特性外，其他生物学性状没有明显改变。
[期刊] 华北农学报
[作者]
程瑜 张华屏 乔中东
通过雄激素诱导小鼠骨髓巨噬细胞凋亡以及对Fas信号传导通路的研究来探讨雄激素对免疫系统抑制作用的机制。采用不同浓度(1~10 nmol/L)的雄激素处理小鼠骨髓巨噬细胞24 h后,先用DNA片段电泳法和Annexin-V/PI双染后流式细胞仪检测不同处理组的细胞凋亡的情况;再用RT-PCR半定量法观察雄激素对Fas途径中一些基因表达的影响。发现10 nmol/L雄激素处理的巨噬细胞凋亡率31.7%比对照组7.4%显著升高,并伴随Fas途径中相关基因(Fas,FasL,FADD,caspase-8和caspase-3)转录水平的升高。雄激素可能是通过Fas途径来诱导小鼠骨髓巨噬细胞发生凋亡,从而...
关键词：
雄激素 凋亡 骨髓巨噬细胞 免疫抑制
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
戈艺潼 吉滢 曾敏敏 郑学明 黄新祥 张盈
近年来，细菌外膜囊泡（OMVs）在抗肿瘤治疗中展现出的巨大潜力引起了广泛的关注。为探究伤寒沙门菌外膜囊泡（S. Typhi-OMVs）对人结直肠癌细胞株HT-29增殖的影响及可能的作用机制，通过超速离心法提取不同细菌的OMVs，细胞增殖实验（CCK-8）检测各细菌OMVs对细胞活力的影响；转录组测序（RNA-seq）分析处理后细胞基因表达水平的变化；试剂盒检测铁死亡相关标志物的含量变化；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白质免疫印迹法（western blot）分别检测相关基因mRNA和蛋白质的表达变化。结果显示，在提取的6种细菌OMVs中，S. Typhi-OMVs对HT-29细胞的增殖产生了最明显的抑制作用，并且呈现出浓度和时间梯度依赖性；RNA-seq显示HT-29细胞可能发生了铁死亡；S. Typhi-OMVs作用后，细胞内发生了铁沉积，氧化产物增多，抗氧化剂减少，符合铁死亡生化特征；SAT1是S. Typhi-OMVs处理后HT-29胞内mRNA表达量变化最大的基因；p53-SAT1-ALOX15是铁死亡的信号通路之一，S. Typhi-OMVs处理后胞内p53、SAT1、ALOX15的mRNA与蛋白表达均增高。以上结果表明，S. Typhi-OMVs能够抑制结直肠癌细胞HT-29的增殖，其机制可能与通过p53-SAT1-ALOX15信号通路诱导HT-29发生铁死亡有关。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
宁程程 李娜 郭蕴 季春辉 王立霞 李志远 乔军 孟庆玲 才学鹏
【目的】鼠伤寒沙门菌（STM）是一种可感染人和多种动物的重要人兽共患病原菌，研究STM小RNA（sRNA）STnc290基因的分子特征和在细菌的细胞侵染及小鼠致病性中的作用。【方法】通过PCR扩增STM sRNA STnc290基因，并利用生物信息学软件分析STnc290基因的序列特征、二级结构分子特征及预测潜在靶基因。同时，利用λ-Red同源重组系统构建STnc290基因缺失株及回补株；通过分析STM-SL1344、STM-ΔSTnc290及△STnc290/STnc290在侵染细胞、小鼠半数致死剂量、小鼠存活率、致病小鼠肝脾载菌量和小鼠肝脾病理变化差异，利用qRT-PCR检测STnc290基因调控的潜在靶基因转录水平。【结果】sRNA STnc290基因大小为79 bp，其上游序列含有-10 box和-35 box的启动子核心序列TGATATATA和CTGACA，并且还存在σ因子rpoD16结合位点AAATAATT；STnc290基因的二级结构含有典型的茎环结构；通过在线软件预测发现STnc290基因两个潜在的靶基因为pqaA和narX基因。STM-SL1344、STM-ΔSTnc290及ΔSTnc290/STnc290菌株生长测定显示，与STM-SL1344和ΔSTnc290/STnc290回补株相比，STnc290基因缺失株在生长特性上无明显差异（P>0.05）；与STM-SL1344株相比，STM-ΔSTnc290对小鼠巨噬细胞RAW264.7的黏附、侵袭能力均显著减弱（P<0.05）；STM-ΔSTnc290株感染小鼠半数致死剂量显著升高（P<0.05）；STM-ΔSTnc290株感染的小鼠存活率显著高于亲本株（P<0.05）；STM-ΔSTnc290株感染小鼠肝脾载菌量在感染后第7、9天显著降低（P<0.05）。qRT-PCR检测表明，STnc290基因缺失株靶基因pqaA和narX转录水平均显著下调（P
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
程安怡 赵金鹏 黄小红 张伟妮
为了探究脂多糖(LPS)对大黄鱼原代头肾巨噬细胞(PKM)的激活作用及其相应受体,采用流式细胞术检测LPS对大黄鱼PKM吞噬活性和氮呼吸爆发的影响,用实时荧光定量PCR检测LPS对3种促炎因子(IL-1β、IL-6、IL-8)和7种受体基因(TLR1、TLR2、TLR21、MR1、MR2、NOD1、NOD2)转录水平的影响.结果显示:0.1μg·mL~(-1) LPS可以显著提高大黄鱼PKM的吞噬能力(P<0.01);LPS可以显著上调3种促炎因子(IL-1β、IL-6、IL-8)和6种受体基因(TLR1、TLR2、TLR21、MR2、NOD1、NOD2)的表达水平,显著下调MR1的表达水平.研究表明,LPS对大黄鱼PKM有明显的激活作用,并刺激细胞向M1型巨噬细胞分化.
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
范彩云 张运海 王菊花 王尚 朱飞 赵男 程建波
为探讨ＨＨ信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用机制，以猪脂肪间充质干细胞（ＡＤＳＣＳ）为材料，应用油红Ｏ染色法检测ＡＤＳＣＳ成脂分化过程中的形态变化；采用荧光定量ＰＣＲ及ＷｅＳｔｅＲｎ ＢｌＯｔ的方法检测ＨＨ通路Ｇｌｉ１及脂肪细胞分化转录因子的时序表达。通过嘌呤衍生物２，６，９－三元取代嘌呤（ＰｕＲｍＯＲＰＨＡｍｉｎｅ，Ｐｍ）激活猪ＡＤＳＣＳ细胞中ＨＨ信号通路，探讨体外激活ＨＨ信号通路对猪ＡＤＳＣＳ向脂肪细胞分化的作用及其机制。结果显示，在成脂诱导分化的过程中，经５μｍＯｌ／ｍｌ的Ｐｍ持续处理，细胞中Ｇｌｉ１的ｍＲｎＡ及蛋白表达量增加；猪ＡＤＳＣＳ向脂肪细胞分化的数目减少、细胞内甘油三酯含量降低．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
华利忠 陈耿 张书霞
选用5头猪圆环病毒2型(PCV2)及猪呼吸和繁殖综合征病毒(PRRSV)抗体阴性普通断奶仔猪,无菌分离脾脏淋巴细胞和巨噬细胞(macrophage,M),分别以PCV2和PCV2+M与淋巴细胞相互作用,同时设M和淋巴细胞对照组。培养0、6、12、24 h后分别收取各组淋巴细胞,用流式细胞术对细胞凋亡率进行测定,半定量RT-PCR法测定淋巴细胞Fas和FasLmRNA的转录情况。结果显示:PCV2+M组的淋巴细胞凋亡率在24 h时显著高于其他3组(P<0....
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王思琪 周春雪 李玉琦 杜星 潘增祥 李齐发
【目的】探索miR-34a诱导GCs凋亡的RNA激活机制，为揭示猪卵泡闭锁的分子机理、筛选调控母猪繁殖的小核酸调节物提供依据。【方法】利用生物信息学方法分析猪miR-34a特征及其与潜在靶基因lncRNA NORHA启动子的结合情况。利用核质分离技术分析猪GCs中miR-34a的亚细胞定位。qPCR检测miR-34a对猪GCs中NORHA、凋亡标志基因BCL-2和BAX表达的影响。利用荧光素酶活性分析验证miR-34a对NORHA启动子转录活性的靶向调控关系。利用染色质免疫沉淀（ChIP）检测miR-34a对猪GCs中NORHA启动子miRNA反应元件（MRE）处AGO2和组蛋白修饰因子富集情况。利用western blot和流式细胞术分析miR-34a通过NORHA对下游因子FOXO1的表达和细胞凋亡的调控作用。【结果】猪miR-34a为基因间miRNA，其序列在哺乳动物中具有高度保守性。亚细胞定位分析显示，miR-34a在猪GCs中细胞核与细胞质均有分布。生物信息学分析显示miR-34a的MRE位于NORHA启动子-194 nt至-173 nt处，且两者结合自由能为-23.9 kcal·mol~(-1)。qPCR结果表明miR-34a显著上调猪GCs中NORHA的表达。荧光素酶活性分析显示，miR-34a极显著上调NORHA启动子报告载体活性，而对MRE突变型启动子活性没有显著影响。ChIP试验显示，miR-34a可增加NORHA启动子MRE处RNA诱导转录激活（RITA）复合物核心成员AGO2和转录激活型组蛋白H3K4me3的富集，而减少转录抑制型组蛋白H3K9me3的富集。共转试验显示，敲减NORHA可显著或极显著逆转由miR-34a过表达引起的FOXO1蛋白水平和早期凋亡率的上调，以及BCL-2/BAX比值的下调。【结论】细胞核miR-34a是猪GCs中的内源性小激活RNA(saRNA)，通过靶向激活促凋亡lncRNA NORHA的转录，诱导猪GCs早期凋亡（细胞膜完整），可能参与猪卵泡闭锁的启动。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王南威 李莉莉 陈凯风 周洲平 潘鹏 关晋 徐成刚 廖明 张建民
【目的】通过揭示c-di-GMP通路基因STM2503调控鼠伤寒沙门菌生物被膜形成，进而影响其环境应激能力的机制，以期挖掘调控鼠伤寒沙门菌压力适应性的关键因子，为防控策略的制定提供理论依据。【方法】以λ-Red同源重组方法构建STM2503缺失株，并利用质粒PBAD表达STM2503来构建相应的基因回补株。然后通过检测不同STM2503表达水平菌株中信号分子c-di-GMP的含量揭示STM2503对菌株胞内c-di-GMP水平的影响。接下来，利用细菌运动性检测、结晶紫染色等试验检测了STM2503对菌株运动性和生物被膜形成能力的影响，并利用实时荧光定量PCR从基因层面揭示其对菌株运动性和生物被膜形成的调控机制。最后，通过抗生素处理、氧化应激、消毒剂应激等试验探究了STM2503对鼠伤寒沙门菌压力适应性的影响。【结果】与野生株（WT269）相比，STM2503的缺失使菌株胞内c-di-GMP含量升高了37.51%(P<0.001)，且不影响菌株的正常生长。另外，STM2503的缺失提高了菌株各胞外基质合成基因的表达水平，使缺失株胞外多糖、胞外DNA和胞外蛋白质含量分别增加了10.30%(P<0.01)、33.59%(P<0.001)和27.60%(P<0.01)，最终使菌株的生物被膜形成能力显著增强了1.63倍（P<0.01）。并且，269ΔSTM2503通过降低鞭毛合成相关基因fliA与flhC的表达使其在6 h的运动直径较野生株相比下降了17.22%(P<0.01)。这些变化最终导致269ΔSTM2503菌株对头孢噻肟、头孢吡肟、阿莫西林等β-内酰胺类抗生素的敏感性降低1—3倍，且在氧胁迫和SDS消毒剂胁迫下表现出了更强的适应能力。【结论】STM2503参与信号分子c-di-GMP的降解，并通过抑制胞外基质的合成降低鼠伤寒沙门菌的生物被膜形成能力，通过上调鞭毛合成基因的表达增强菌株的运动性，进而降低菌株的耐药性和环境压力适应能力，本研究为鼠伤寒沙门菌关键防控靶点的挖掘提供了理论基础。
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
张盈 张晓磊 詹莉芳 张琪 生秀梅 黄新祥
非编码RNA在细菌的各种生命活动中都发挥着重要的功能.针对伤寒沙门菌非编码RNA AsrC,对其转录和降解特性及其所具有的功能进行初步研究.首先使用Northern blot和qRT-PCR的方法检测了σ因子rpoE和rpoS对AsrC转录的影响,分析了使用利福平抑制细菌RNA合成的情况下,RNase E和RNase III对AsrC降解的影响.其次使用AsrC缺陷株和高表达菌株分析细菌在酸、氧、高渗应激条件下的生长情况.再者通过全基因组芯片技术,研究AsrC高表达菌株基因表达的变化.进一步研究AsrC在细菌侵袭和巨噬细胞胞内生存力中的作用.结果显示,rpoE在酸应激下、rpoS在高渗应激下调节AsrC的转录.细菌中RNase E主要参与了AsrC的降解.高表达AsrC后,有40个基因表达上调,23个基因表达下调.AsrC高表达可以增强伤寒沙门菌对于上皮细胞的侵袭力,并且可以减弱细菌的胞内生存和增殖力.
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
熊昌艳 李雪娇 黄新祥
通过研究σ因子和RNase对伤寒沙门菌非编码RNA ArpH表达的影响,并结合全基因组芯片的结果,初步探讨ArpH对细菌侵袭力和胞内生存力的影响.应用qRT-PCR检测了rpoE和rpoS对ArpH转录的影响,以及RNase Ⅲ、RNase G和RNase E分别对ArpH降解的影响.另外还利用全基因组芯片技术对ArpH高表达菌株在氧应激下的基因表达谱进行分析.最后观察了ArpH对伤寒沙门菌侵袭力的影响和对胞内生存力的作用.结果显示,rpoE在酸、氧及高渗应激下、rpoS在氧应激下调节ArpH的转录.细菌中RNase Ⅲ主要参与了ArpH的降解.氧应激下高表达ArpH后,基因表达上调的有89个,基因表达下调的有24个.ArpH高表达可以减弱伤寒沙门菌对上皮细胞的侵袭力,并能增强细菌的胞内生存力.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
柳向军 李谋 刘小林
为了探讨仅含有BH3结构域的促凋亡蛋白BclGs的促凋亡机理,从人睾丸cDNA文库中克隆BclGs基因编码区,将其与pEGFP-C1载体连接,构建载体pEGFP-BclGs,转染COS7细胞和多种肿瘤细胞(如Hela、HepG2和MCF7等),研究BclGs对肿瘤细胞的促凋亡功能。结果表明,pEGFP-BclGs可以诱导不同的肿瘤细胞凋亡,但凋亡率存在差别;BclGs在不同细胞的线粒体中均呈点状分布。线粒体是诱导肿瘤细胞凋亡的有效细胞器,BclGs在线粒体中呈点状分布。
[期刊] 水产学报
[作者]
秦真东 詹凡玢 李亚男 施斐 杨敏璇 卢志杰 李军 林蠡
为了探究鱼类体内过量游离血红蛋白对鱼体影响，本研究以草鱼为研究对象，通过体内注射血红蛋白模拟体内出血，探究血红蛋白对组织和组织中巨噬细胞的免疫调控作用。体内注射血红蛋白研究结果显示，血红蛋白的刺激导致头肾和中肾组织中明显的血红蛋白沉淀，同时提高了鱼体血清中的抗氧化相关酶活水平，促进了头肾组织中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-10的mRNA表达水平。普鲁士蓝和间接免疫荧光实验显示，头肾巨噬细胞对血红蛋白表现出了吞噬活性。荧光定量PCR检测结果显示，血红蛋白的刺激显著激活了头肾巨噬细胞中CD68、CD86、CSF和MHC-Ⅱ的mRNA表达水平。进一步的细胞因子检测结果显示，血红蛋白刺激12 h后，头肾巨噬细胞中的炎症因子（TNF-α、IL-1β和IL-4）、趋化因子（CCL20和CCL4）、IFN-α和TLR4的mRNA表达水平被显著上调表达。综上所述，本研究结果表明草鱼头肾巨噬细胞对血红蛋白具有吞噬能力，同时血红蛋白也激活了巨噬细胞中多种细胞因子的表达水平。本研究结果首次阐述了草鱼血红蛋白与巨噬细胞的相互作用关系，丰富了鱼类血液基础免疫学理论，同时也为鱼类健康养殖提供新的参考。
关键词：
草鱼 血红蛋白 巨噬细胞 细胞因子
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
贾坤 廖燕红 徐磊 王虎虎 徐幸莲
[目的]研究铜绿假单胞菌所产生的群体感应信号分子酰基-高丝氨酸内酯(AHL)对鼠伤寒沙门氏菌生物菌膜形成的影响,为不同菌体间群体感应的研究提供参考,为沙门氏菌的控制提供帮助。[方法]利用薄层层析法分析铜绿假单胞菌所产生AHL的成分,并通过添加0%、1.0%、1.5%、2.0%(体积分数)的AHL来研究其对鼠伤寒沙门氏菌生物菌膜形成、浮游菌体生长以及菌体泳动能力的影响。[结果]铜绿假单胞菌产生2种相同类型的AHL分子(C12-HSL和3-oxo-C8-HSL),100℃加热5 min并不会改变AHL的成分。
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
