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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
谢超 孙恩贵 刘俊华 王祥生 杨发青
以不同剂量的伊氏锥虫排泄分泌抗原（ＥＳＡ）对小鼠进行常规免疫，用同株伊氏锥虫攻击，观察并记录小鼠死亡时间、死亡只数，比较免疫后血清抗体水平。结果表明：除对照组和５μｇ组未产生特异性抗体外，其余各组均产生较高滴度的抗体，其中２００μｇ组为１∶６４００，１００μｇ组为１∶３２００。ＥＳＡ５０，１００和２００μｇ免疫组可对小鼠产生有效的保护，小鼠存活时间较对照组延长２～３倍，以１００μｇ组产生的保护作用最好
关键词：
伊氏锥虫 排泄分泌抗原 小鼠 免疫原性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蔡建平 汪志楷 沈永林 李祥瑞 潘红杰
以超声波粉碎法裂解纯化的不同地理株伊氏锥虫(T.evansi)单虫克隆群体,提取可溶性蛋白组分,进行 SDS-PAGE 和 Western blotting 分析,结果表明经 SDS-PAGE 分析,不同株 T.evansi 的可溶性蛋白组分中都包括20～30种蛋白成分,相对分子量(Mr)范围大约为7.9～109.5D,主要蛋白成分的 Mr 约为49～66kD 之间,Wertern botting 分析揭示不同株 T.evansi 间有10～20条为特异抗体所识别的抗原组
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李祥瑞 谢晋 孙梅 刘杰 潘红杰 沈永林 汪志楷
实验使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠,研究了重组牛白细胞介素-2(rBIL-2)对小鼠 NK 细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响.试验鼠随机分为4个组:Ag 组、Ag+rBIL-2组、rBIL-2组和 PBS 对照组.以LDH 释放法和间接 ELISA 法分别检测各组小鼠 NK 细胞杀伤活性和抗体水平.结果表明,首次免疫后24d·Ag 组 NK 细胞杀伤活性为31.6%,rBIL-2组为99.66%,Ag+rBIL-2组为98.98%,对照组为19.73%,抗体效价 Ag 组为2~4,Ag+rBIL-2组为2~6.说明 rEIL-2可显著提高 NK 细胞杀伤活性及促进抗体生成,提高宿主免...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
周金林 沈杰 周勇志 石滨海 王云飞
为了解伊氏锥虫在动物体内抗原变异情况,用伊氏锥虫安徽株克隆虫体 ShTat1分别感染兔和豚鼠。在兔体30d 中,每3d 分离兔血中锥虫并克隆,获得10个克隆锥虫,经间接免疫荧光试验和生物素抗生物素酶标试验鉴定,为9个抗原性互不相同的抗原变异体 ShTat1.1～1.9.同中方法在4只兔体内30d 获得同样9个变异体,并且出现顺序一致,该克隆在豚鼠体内15d 所获得的5个变体,经鉴定均在兔体现出过,
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李国清 汪志楷 沈永林
用云南株伊氏锥虫克隆后体外培养，培养后于第１８～６０ｄ之间，每间隔一周通过免疫抑制鼠（ＣＹ鼠）克隆，建立了７个克隆群体（代号为０１８，０２５，０３２，０３９，０４６，０５３，０６０），并将其分别与７种克隆特异性抗血清（ＡＳ０１８～０６０）进行免疫溶解和中和试验。结果如下：①０１８和０２５能被ＡＳ０１８和ＡＳ０２５所溶解或中和；②０３２，０３９，０４６，０５３能被ＡＳ０３２，ＡＳ０３９，ＡＳ０４６，ＡＳ０５３所溶解或中和；③０６０只能被ＡＳ０６０所溶解或中和。根据上述结果，将７个克隆群体鉴定为３种变异抗原型（ＶＡＴ），按国际ＶＡＴ命名法，分别命名为ＹｕＴａｔ１·１，ＹｕＴａｔ１·２和ＹｕＴａｔ１...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福 李静 周文豪 赵桂珍
从患细菌性败血症的翘嘴鳜分离嗜水气单胞菌ＢＳ－１菌株，制成福尔马林灭活疫苗（Ｆ－ＡＨ）、酚灭活疫苗（Ｐ－ＡＨ）和提取菌体脂多糖（ＬＰＳ）作为免疫原。注射接种体重为３５．５±５．６ｇ的翘嘴鳜后，通过检测血清中的凝集抗体效价、血液和头肾中吞噬细胞的吞噬活性以及应用活菌攻毒等方法，比较了３种不同免疫原的免疫效果。结果表明，ＬＰＳ的免疫效果最好，Ｐ－ＡＨ次之，Ｆ－ＡＨ较差。用活菌攻毒后，３种受免鱼体的免疫保护力分别为９２．２％，８４．７％和８０．７％。
关键词：
翘嘴鳜 细菌性败血症 免疫预防
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
周勇志 石滨海 沈杰 周金林 王云飞
伊氏锥虫在我国地理分布广泛,寄生于马、驴、骡、黄牛、水牛、骆驼和犬等家畜体内,感染后发病急,死亡快,危害很大,多年来,许多研究人员致力于研制防治伊氏锥虫病的疫苗,由于伊氏锥虫的抗原变异频繁,所以未能成功.我们曾对伊氏锥虫安徽株在动物体内抗原变异程序作了观察,发现有一定规律.因此我们对伊氏锥虫新疆株在兔中的抗原变异程序进行观察,用昆明系小白鼠95只,新西兰兔4只进行试验,先用来源于新疆骆驼株体内经过单虫克隆的虫株,接种兔2只,接种量为10~6条/只,每3d 采兔血一次分离
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福 李静 楠田理一
用酚灭活的柱状嗜纤维菌和从该菌体提取的菌体脂多糖浸泡接种２０～２５ｇ的草鱼鱼种，共浸泡２次间隔一周。通过检测受免鱼体血清、肠和体表粘液中凝集抗体效价、血液中吞噬细胞的吞噬活性和采用活菌攻毒的方法，探讨了浸泡免疫接种疫苗对预防草鱼细菌性烂鳃病的效果。结果表明，受免鱼体与对照鱼相比，血清、肠和体表粘液中凝集抗体效价和血液中吞噬细胞的吞噬活性都有明显上升。经活菌攻毒后，酚灭活柱状嗜纤维菌疫苗免疫组免疫保护率达３０％，而脂多糖疫苗免疫组免疫保护率为５５％。
关键词：
浸泡免疫,细菌性烂鳃病,草鱼
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
谢晋 沈永林 汪志楷
初步研究了伊氏锥虫（Ｔ．ｂ．ｅｖａｎｓｉ）对人血清敏感性的变异。以不断递增的人血清处理在免疫抑制鼠体内连续传代的伊氏锥虫，经２０代的压力选择，获得了能耐受０．５ｍＬ正常人血清的抗性变异克隆。该变异克隆在无人血清压力的正常鼠体内经１０次连续传代，又恢复了对人血清的敏感性。结果表明，伊氏锥虫对人血清的敏感性或抗性均不稳定。
关键词：
伊氏锥虫 人 血清 克隆 敏感性 耐受性
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福 陈萱 陈超然 梁运祥 王建华
对国内、外关于水产甲壳动物免疫防御机能及其免疫预防研究状况进行了综述。甲壳动物免疫细胞主要依靠吞噬和包围化作用发挥其防御机能 ,而酚氧化酶前体 (proPO)活化系统、植物凝血素和杀菌素等免疫防御有关的液性因子主要起杀菌和促进细胞吞噬的作用。通过免疫接种诱导水产甲壳动物产生的免疫应答主要是非特异性免疫应答。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
谢晋 沈永林 汪志楷
从人血清天然杀伤伊氏锥虫活性作用着手,深入研究在自然选择下人血清和锥虫的相互作用关系,为揭示人体抗锥虫感染非特异性免疫奠定基础。首先,用体内和体外试验检测表明,正常人血清对 T.b.evansi 的体外杀锥虫活性明显受血清浓度,孵育时间和温度影响.被人血清溶解前 T.b.evansi 有一系列形态变化,虫体肿胀、变圆、游离鞭毛明显化、表膜毛边化等.还发现不同个体人血清溶虫活性有显著差异,但与血型无关;同一个体血清溶虫活性稳定不
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
翟春生 唐雨德 顾志香
应用两种重组抗原分别制成免疫刺激复合体疫苗进行猪囊虫病免疫预防实验。实验猪接种二次,间隔14d,第二次接种后7d 用有钩绦虫卵感染,2万个·头~(-1)。感染后116d 屠宰剖检。对照组9头猪共发现1067个囊虫,平均118.6个·头~(-1);免疫 A 组8头实验猪共发现510个囊虫,平均63.75个·头~(-1),减虫率为46.2%;免疫 B 组9头实验猪共发现83个囊虫,平均9.2个·头~(-1),减虫率为92.2%.在免疫 B 组实验猪体内发现的囊虫发育不全,眼观虫体小,囊液少,囊膜较厚,不透明,呈乳白色;病理组织学检查发现,囊虫组
[期刊] 水产学报
[作者]
陶保华 胡超群 任春华
尝试使用免疫学的方法来防治对虾弧菌病。将病原副溶血弧菌制成福尔马林灭活疫苗，在实验条件下分别以浸泡、口服和注射等方式接种于斑节对虾和日本对虾，结果发现，在一定的范围内，对虾的免疫保护率随疫苗浓度的增加而升高。在注射接种的方式中，斑节对虾在 １０９、１０８、１０７ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１的疫苗剂量下的保护力分别为４０％、５０％和４０％，浸泡组（疫苗浓度分别为１０８ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１、１０７ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１和１０６ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１）的免疫保护率分别为３０％、３０％和２０％，投喂组的免疫保护率为１１．１％。日本对虾注射免疫组（疫苗剂量为１０８ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１、１０７ｃｅｌｌｓ· ｍＬ－１和...
关键词：
弧菌疫苗 免疫预防 斑节对虾 日本对虾
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蔡建平 汪志楷 沈永林 李祥瑞 潘红杰
以经生物素标记、Triton X-114相分离、ConA-sepharose 和 Streptavidin-agarose 亲和沉淀抽提、SDS-PAGE 分离并经 wester blotting 鉴定的伊氏锥虫(T.evansi)一种60kD 非变异性表面蛋白质免疫 ICR 小鼠,制备高免血清,用间接免疫荧光技术对该60kD 蛋白的细胞表面分布进行了初步定位研究。结果表明,在同源和异源株虫体表面都有强烈的特异性荧光染色。以该蛋白经直接脾内免疫 ICR 小鼠(总剂量约10μg·鼠~(-1)),可获得对10~2条同源和异源株虫体攻击的部分保护作用,表现为虫血症出现的时间("潜隐期")
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李有全 罗建勋 高金亮 关贵全 马米玲 刘志杰 刘军龙 刘爱红 任巧云 党志胜 鲁炳义 刘光远 白启 殷宏
【目的】构建吕氏泰勒虫裂殖子cDNA表达文库,并从中筛选抗原候选基因。【方法】从吕氏泰勒虫裂殖子直接提取和纯化mRNA,采用oligo(dT)引物合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用PhageMaker extract对连接产物进行体外包装以形成完整的噬菌体,并用之转染大肠杆菌ER1647,从而构建成吕氏泰勒虫的cDNA表达文库。用吕氏泰勒虫阳性血清和兔抗绵羊IgG-AP筛选得到阳性克隆,经测序和Blast软件分析并获得新基因。【结果】成功构建吕氏泰勒虫裂殖子cDNA表...
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