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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李刚 郑明球 蔡宝祥 吴连清
产蛋减少综合症(EDS_(76))是以母鸡产蛋量减少,下软壳蛋和无壳蛋为特征的一种病毒性传染病。该病可使鸡群产蛋率下降20%～50%,破损率达20%～40%。本病最早由荷兰Van Eck于1976年报道,迄今许多国家都已报道该病的发生,并列为鸡四大病毒性传染病之一。近年来,由于从国外引进种鸡,我国已发现部分鸡群爆发该病,但对该病病毒分离的确诊报道甚少,1991年南京某鸡场从外地引进几批褐壳蛋鸡,
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李银聚 吴庭才 程相朝 吴志明 张春杰
设计了1对特异性引物,应用降落PCR法对减蛋综合症病毒(EDSV)六邻体蛋白基因进行了扩增。将扩增产物克隆至pMD18-T载体中,经酶切和PCR鉴定后,初步证明了目的片段的正确性。进一步经核苷酸序列测定表明,所扩增的基因片段长度为2.74kb,共编码910个氨基酸,与由EDSV弱毒株(AA-2)全基因组的Hind酶切片段测序所得到的六邻体结构基因推测的氨基酸序列相比,有11处氨基酸发生了变异。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
冉智光 王泽洲
将鸡减蛋综合征（ＥＤＳ＿（７６））ＳＣ—１毒株以不同稀释度接种鸭胚，孵育９６ｈｒ，以血凝试验（ＨＡ）为指示系统，测得半数感染量（ＥＩＤ＿（５０））为１０￣（－９．６７）／０．１ｍｌ。将ＳＣ－１毒株接种１１日龄鸭胚，取不同时间的死、活胚，测得１２０和１４４ｈｒ所收胚液（含尿囊液和羊水）比其它时间所收胚液高１．３～８．６个血凝滴度；９６ｈｒ和１２０ｈｒ所收胚液平均１０ｍｌ／胚以上。用不同的反应板、红细胞浓度及甲醛灭活病毒后作ＨＡ试验，结果：Ｕ型板比Ｖ型板高１～２个滴度；０．５％、０．７５％、１％的红细胞比１．５％的红细胞高１～４个滴度，但０．５％红细胞组图像不太清晰；甲醛灭活后ＨＡ效价未见改变。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李刚 陈克卫 范伟兴 郑明球
利用减蛋综合征(EDS)病毒凝集红细胞的特性,进行了EDS病毒血凝谱的研究。结果EDS病毒能凝集鸡红细胞,但不凝集鹌鹑红细胞。试验筛选出EDS病毒凝集红细胞的最佳条件。它凝集鸡、鸭红细胞的滴度不受温度(4～37 C)和pH值(5.8～8.0)的影响。鸡源(NE_4株)和鸭源(JE_1 株)的EDS病毒都能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞。经氯仿、偏重亚硫酸钾、过碘酸钾处理后,NE_4株的血凝滴度比JE_1株高。解脱试验表明NE_4株凝集红细胞的能力比JE_1 株强,尤其在pH9.2的条件下,两者差异显著。
关键词：
减蛋综合征 病毒 血凝性
[期刊] 中国水产科学
[作者]
雷质文 黄倢 杨冰 俞开康
12 9尾中国对虾 (Penaeuschinensis)分别捕自未暴发白斑综合症 (WSSV病毒所致 )虾池、WSSV暴发虾池以及曾暴发WSSV虾池。用斑点杂交和组织病理学方法确定各尾对虾的染毒 (WSSV)程度。用 96孔酶标板法测量相应个体血淋巴上清液的抗菌活力 (Ua)、溶菌活力 (UL)、酚氧化酶 (PO)活性以及过氧化酶 (POD)相对活性 ;用硝酸纤维膜斑点法测定其碱性磷酸酶 (ALP)相对活性 ;用血凝法测定其凝集效价(HAT)。通过对以上免疫指标进行统计分析 ,结果表明 ,WSSV感染与对虾血淋巴PO活性以及ALP相对活性变化有紧密联系 ;不同虾池各免疫因子差异显著 ,发病虾池...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
孟宪红 孔杰 刘萍 马春艳 李颖
采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对经过连续4代选育的抗白斑综合症病毒(WSSV)中国明对虾(Fennerope naeuschinensis)(XY4)及未经选育的与XY4来源相同的中国明对虾野生群体(HB)进行分析,以期筛选出与抗病性状相关的分子遗传标记,为进一步的基因定位以及中国对虾的种质资源保护和分子标记辅助育种提供有力的技术支撑和理论依据。共进行220个RAPD单引物和114对双引物的检测,产生标记数目共计2439个。依据标记在群体中出现的频率和变化规律,共筛选出5个可能与抗病相关的特异性标记,对这些特异性标记进行测序并将测序结果进行BLAST分析,发现测得片段的序列与数据库中...
[期刊] 国际经济合作
[作者]
马文斌
《经济学人》2013年6月8日对弗吉尼亚州史密斯菲尔德市的火腿爱好者而言,中国大亨可能很快入主在当地占主导地位的大型猪肉加工公司完全是因为美国的衰落。本地的火腿是以花生喂养的生猪为原料,经过山核桃木熏制加工而成,它从殖民地时期就已经家喻户晓。在史密斯菲尔德公司,猪的形象可以与代表自豪感的美国国旗、商店橱窗的装饰物、学校的体育用具以及市里的水塔相媲美。如果这笔价值数十亿美元的收购交易顺利完成,位于该市的全球最大的猪肉加工企业史密斯菲尔德食品公司将成为中国双
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
周锦萍 李刚 郑明球 蔡宝祥
采用差速离心法纯化鸡源和鸭源减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒，酚－氯仿抽提法提取两种毒株的核酸。选取ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＫｐｎⅠ、ＰｓｔⅠ和ＨｉｎｄⅢ７种限制性内切酶，对两种毒株进行酶切图谱比较。结果显示，鸡源株酶切片段数分别为４，４，６，８，５，９，１０，共计４６个片段；鸭源株产生的酶切片段数分别为４，４，５，７，９，１０，８，共计４７个片段。两者的酶切结果除ＥｃｏＲⅠ完全相同外，其余均存在不同程度的差异。由此表明，鸡源和鸭源ＥＤＳ病毒虽然血清型相同，但在基因水平上存在较大的差异，属不同基因型。
关键词：
EDS病毒 病毒核酸 酶切图谱
[期刊] 西南农业学报
[作者]
马宁 曾地刚 黎铭 王建平 杨琼 陈晓汉
ｍｉｃｒｏｒＮＡｓ（ｍｉｒＮＡｓ）在调节动物的获得性和先天性免疫中发挥重要作用。为研究病毒感染对凡纳滨对虾ｍｉｒＮＡ表达的影响，构建了桃拉综合症病毒感染和对照的凡纳滨对虾的小ｒＮＡ文库，利用ｓｏｌｅｘＡ高通量测序技术对小ｒＮＡ文库进行测序，分别得到６１８５４２７６和６５３２０１１７条小ｒＮＡ序列，其中有２８６４３３７条序列被注释为保守的ｍｉｒＮＡ，对应８７种已知的ｍｉｒＮＡ。对高表达量的ｍｉｒＮＡ进行表达差异分析，得到了２２个差异表达ｍｉｒＮＡ，其中８个上调表达，１４个下调表达。对差异表达ｍｉｒＮＡ的靶基因进行了预测，其中预测得分最高的靶基因大多数涉及到动物的免疫或细胞凋亡功能，说明ｍｉｒＮＡ．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
孙静秋 许燕 李晓英
采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法,对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)成体的复眼、肝脏、心脏、鳃和肌肉等5种组织中的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、酯酶(EST)和过氧化物酶(POD)4种同工酶进行研究,并将健康虾与感染桃拉综合症病毒(TSV)病虾的同工酶酶谱进行比较。结果表明,这4种同工酶在凡纳滨对虾体内的不同组织均有分布,但在酶活性和条带数量上存在不同程度的组织特异性,其中4种同工酶均在肝脏组织中表达最强,ACP和POD在肌肉中、EST在复眼中表达最弱,AKP在复眼中不表达。感染TSV后,病虾的ACP和AKP均出现酶带数量减少和酶活性降低,如病虾的ACP酶谱...
[期刊] 水产学报
[作者]
邓敏 何建国 吕玲 左涛 龙綮新 陈兆明
通过分离纯化白斑综合症病毒 (WSSV)粒子 ,抽提病毒DNA ,用限制性内切酶EcoRⅠ或SalⅠ酶切后 ,克隆入质粒pBluescriptⅡKS中 ,从而建立了WSSV部分基因组文库。估计WSSV基因组DNA在16 5kb以上。将WSSVEcoRⅠ克隆片段标记制备为探针 ,进行Southern杂交、打点杂交和原位杂交 ,其结果证明了克隆片段对WSSV特异 ,并为检测WSSV提供了方法。通过对部分基因组文库序列分析发现 ,WSSV核酸序列与已知杆状病毒核酸序列的同源性低 ,与GenBank中已有病毒核酸序列比较都无较大同源性 ,说明WSSV不属于杆状病毒科 ,目前只能列为未分类的无脊椎动物病...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张俊儒 刘萍 王清印 李健 刘德月 孔杰
通过人工投喂携带WSSV的毒饵,对性腺发育成熟的中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)雄虾(♂)进行感染实验。采用nest-PCR(巢式PCR)技术,检测感染后的中国对虾雄性生殖系统受WSSV感染情况,同时选取感染严重的虾样进行电镜观察。巢式PCR检测结果表明,感染组中国对虾的精巢、输精管和精囊均被WSSV感染,其中精囊呈阳性的最多,输精管次之,精巢最少。通过电镜进一步观察发现,WSSV粒子只存在于精巢、输精管和精囊的结缔组织中,而在其他组织和生殖细胞中均未发现病毒粒子。其中,精巢中WSSV粒子存在于精巢内两个生精小管之间的结缔组织;输精管中WSSV粒子存在于管壁的结缔组...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
冯书营 黄倢 张士璀
通过差速离心法提取桡足类组织细胞膜,依照本实验室确立的细胞膜与WSSV特异性的结合关系,进行了桡足类细胞膜与白斑综合症病毒(WSSV)结合实验。结果表明,桡足类细胞膜与WSSV之间存在着特异性的结合,二者的结合说明了桡足类细胞膜上存在有WSSV的受体蛋白,其为确定桡足类属于WSSV感染宿主提供了重要证据。同时,比较了凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)鳃细胞膜对桡足类细胞膜与WSSV结合的影响作用,证实了凡纳滨对虾鳃细胞膜对二者的结合具有明显的封闭作用,侧面说明了WSSV在二者细胞膜上存在有相同的受体蛋白或结合位点。桡足类细胞膜经表面活性剂TritonX100处理后,与WSSV...
关键词：
桡足类 细胞膜 WSSV 结合研究
[期刊] 中国农业科学
[作者]
鑫婷 侯绍华 贾红 郭晓宇 丁家波 李延鹏 丁敏 朱鸿飞
【目的】建立一种适用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速、灵敏、特异性检测方法,即一步反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)。【方法】设计3对针对PRRSVN基因的8个位点的特异性引物,用优化后的反应体系检测RT-LAMP的特异性、灵敏性并对临床样本进行检测。【结果】RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测仅需要70min,肉眼即可观察检测结果,该方法具有良好的特异性,灵敏度是RT-PCR的10000倍,在对50份猪血液样本RNA的检测中,该方法与传统的RT-PCR检测方法具有很好的统一性(κ=0.83)。【结论】RT-LAMP检测方法可快速、灵敏、特异的检测PRRSV,并适用基层和现场检测。
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