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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王进荣  杨利国  王元兴  
用人工合成人抑制素α亚基 (1 2 6Gly .Tyr)片段与KLH连接作完全抗原免疫产蛋三黄母鸡 ,用放免法测定排卵周期外周血中雌二醇和孕酮的水平 ,观察产蛋率的变化。宰杀后卵巢称重 ,各期卵泡分类计数。结果免疫组产蛋率、大白泡、小白泡和小黄泡数比对照组高 (P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 夏银  汪兴生  杨利国  韦来红  程瑞禾  
运用Mannich反应制备褪黑激素(MLT)完全抗原(复合物中MLT与BSA的结合比为11.5∶1)。在秋冬季用该抗原主动免疫5只罗曼蛋鸡,经ELISA检测,各鸡均产生MLT特异性抗体。在自然光照下,通过MLT完全抗原主动免疫,可显著提高首次免疫2个月后的雌二醇(E2)水平,且抗体效价高的两只鸡提高的幅度较大;还抑制了雌二醇(E2)和孕酮(P)在秋冬季的下降趋势。因此短日照下通过主动免疫中和蛋鸡体内MLT,可增强蛋鸡生殖内分泌功能,提示短日照下MLT对蛋鸡生殖机能具有抑制作用。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张小冬  程瑞禾  夏银  
研究了抑制素主动免疫对母羊促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)以及妊娠、产羔的影响。15只发情季节考力代母羊平均分成3组:人抑制素α亚基(1-26)Tyr·Gly合成肽免疫组(H组)、猪精液抑制素免疫组(S组)和对照组(C组)。H组在初次免疫后即产生了抑制素抗体,第2次加强免疫后抗体滴度最高可达1∶64000。S组和C组均未产生可与人抑制素合成肽结合的抗体。H组母羊在第一次加强免疫后,血清FSH和P的水平显著高于C组(P<0.05)。S组母羊E2浓度在初次和第一次加强免疫后显著高于对照组(P<0.05)。各组血清LH水平未有显著变化。H组和S组母羊妊娠期分别为148...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 袁安文  邓治邦  王乃东  许道军  薛立群  
【目的】探索外源促性腺激素对卵巢在雄性受体内生长、卵泡发育和卵母细胞成熟与发育能力的影响。【方法】将1日龄小鼠卵巢移植到7~12周龄雄性小鼠肾囊下,回收前用促性腺激素对受体进行处理或不处理,同龄雌性小鼠用促性腺激素进行处理后作为对照。移植21d后回收移植卵巢,观测移植体的回收率及生长和卵泡发育;对卵母细胞进行体外成熟、体外受精,观察2-细胞胚和囊胚发育率。【结果】移植21d后,未处理组移植体回收率为85.4%,与处理组(90.7%)差异不显著(P>0.05)。未处理组移植体卵泡发育至成熟阶段,回收卵母细胞均处在GV期,平均每枚移植体回收卵母细胞数为(41.4±25.8)枚,2-细胞胚胎发育率为...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李超  梅承  朱玉林  薛建华  钟寿坤  麻柱  张胜利  施振旦  
【目的】研究免疫抑制素提高奶牛超数排卵的效率以提高胚胎产量。【方法】免疫组首次免疫抑制素α亚基融合蛋白(1mg·头-1)与白油佐剂混合乳液,首免后第28、56d分别进行2次加强免疫,剂量为0.5mg·头-1。对照组同时注射生理盐水与白油佐剂的混合乳液。在第二次加强免疫后10d,采用FSH四日递减法进行超排处理,并根据母牛发情表现进行人工授精,试验一使用常规冷冻精液输精,试验二使用分离的雌性精子输精,输精后第7天进行冲胚。【结果】主动免疫抑制素能够有效提高血液抗抑制素抗体效价。试验一,免疫抑制素组头均获胚/卵总数为(15.8±2.8)枚,显著高于对照组(8.3±1.5)枚(P<0.05);头均可...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 牛树理  叶荣  杨利国  
为研究中和内源抑制素对排卵的影响,用猪精液抑制素粗品,对产后2 ̄5个月的25头母黄牛进行主动免疫。粗制品用福氏完全佐剂乳化后间隔20d免疫两次。在配种后第10d对11头发情母牛经直肠触摸卵巢,同时颈静脉采血。根据血清孕酮水平与排卵数之间的线性回归关系测定血清孕酮,采用直肠触摸黄体数推算排卵率。排2个以上卵的母牛占36%(4/11)。结果表明,用猪精液抑制素主动免疫黄牛可以提高其排卵率。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王水莲  薛立群  邓立新  崔先利  杨利国  
【目的】探讨不同剂量的双拷贝抑制素pcISI基因免疫对肉牛生殖能力的影响。【方法】将58头同期发情肉牛随机分为6组,每组肉牛分别注射0.75(T1)、1.5(T2)、2.25(T3)、3.0mg/头(T4)pcISI质粒、3.0mg/头pcMV-S空质粒(C1)和3mL/头生理盐水(C2),初次免疫21d后进行加强免疫,以探讨抑制素pcISI基因疫苗对肉牛卵泡和黄体发育的影响。【结果】4个剂量组的大卵泡数均高于对照组,除了T1外,其它3个剂量组均与对照组差异显著(P<0.05);T3和T4的中卵泡数均高于对照组,且差异显著(P<0.05);T3和T4的小卵泡数均高于对照组,且差异显著(P<0....
[期刊] 中国农业科学  [作者] 施振旦  李明  刘丽  黎敏义  秦清明  
【目的】通过免疫抑制素和卵泡抑素促进精子发生,在夏季热应激状态下保持公猪精液品质。【方法】在夏季热应激状态下对精液品质出现下降的成年种公猪单独免疫抑制素、或联合免疫抑制素α亚基和卵泡抑素重组蛋白(n=6)3次,每次间隔21 d;然后在9周试验期间定期采血测定血液抗体效价、FSH和睾酮浓度,每周采精观察精子活力和精子密度作为精液品质指标。【结果】抑制素单独免疫、抑制素和卵泡抑素联合免疫都使猪血液中抗抑制素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01),联合免疫也使猪血液中抗卵泡抑素的抗体效价显著高于对照组值(P<0.01)。单独免疫或联合免疫都显著升高了血液FSH浓度;联合免疫还升高了血液睾酮水平。...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 林鹏飞  剧世强  罗碧平  郝元斌  王利勤  芮荣  靳亚平  
【目的】研究猪有腔卵泡发育和闭锁中颗粒细胞凋亡与卵泡液类固醇激素的变化,为了解猪有腔卵泡发育与闭锁的调控机理提供参考。【方法】从猪卵巢分离完整有腔卵泡,按质量分为健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡3类;再按卵泡直径大小分为大卵泡组(>5 mm)、中卵泡组(3~5 mm)和小卵泡组(
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王海滨  李美玲  夏国良  吕忠显  郭勇  谢辉蓉  
表皮生长因子 (EGF)是参与卵巢功能调节的一个重要肽类因子。关于 EGF对小鼠胚胎期卵巢卵泡发育和类固醇激素发生的作用至今未见报道。本研究以单个卵巢的总卵泡数、生长卵泡数和 5个最大卵母细胞的平均直径为卵泡发育优劣的衡量指标 ,利用我们早期研究建立的无血清培养体系研究了 EGF对胎鼠卵巢卵泡发育和类固醇激素分泌的作用。结果发现 :1EGF处理组胎鼠卵巢总卵泡数、生长卵泡数和卵巢内 5个最大卵母细胞平均直径从培养第 7天起即显著高于 ITS对照组直至培养结束 ;2 EGF在培养后期显著促进胎鼠卵巢分泌睾酮 ,但对雌二醇的基础分泌无影响 ;3EGF处理组胎鼠卵巢在培养过程的后期引起贴壁的卵巢边缘...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王水莲  薛立群  陈小军  杨利国  
选择40头南阳黄牛,用3.0 mg抑制素基因重组质粒(pCIS,免疫组,n=30)或同剂量的生理盐水(对照组,n=10)间隔21 d注射2次,分别在首次免疫当天、首次免疫后第10天和第21天、加强免疫后第10天和第45天收集血清,应用放射免疫法(RIA)测定处理后不同时期血清中激素水平。结果表明:在5个采血时间点内,加强免疫后第10天抗体阳性牛比率最高,为37.5%,与其他采血时间点有显著差异。免疫组促卵泡素(FSH)平均含量比对照组高,但差异不显著;17-β雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平在加强免疫后2组有显著性差异。另外,抑制素抗体阳性牛的FSH、E2和P4比阴性牛高,但差异不显著。这些结...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘小凡  谢晓磊  吴咏梅  陆应林  虞德兵  
[目的]本试验旨在研究c-myc基因在鸡卵泡上的表达及卵泡刺激素(FSH)对其的诱导作用,为明确c-myc在鸡卵泡发育过程中的相关机制提供理论基础。[方法]体外分离鸡小白卵泡(SWF)、大白卵泡(LWF)、小黄卵泡(SYF)、F4和F1卵泡颗粒层和膜层,检测c-myc mRNA和蛋白的表达;应用50 ng·mL~(-1)FSH处理小黄卵泡36 h,测量卵泡颗粒层的厚度和密度,检测颗粒层和膜层c-myc、标记基因和周期相关基因的表达;体外分离、培养小黄卵泡颗粒细胞,预培养16 h,用siRNA干扰c-myc 24 h后,加入50 ng·mL~(-1) FSH处理24 h,检测c-myc mRNA的表达。[结果]c-myc mRNA在等级前卵泡的颗粒层和膜层的表达水平都显著高于排卵前卵泡,卵泡的颗粒层和膜层上都有c-Myc蛋白表达。与对照组相比,FSH处理后,小黄卵泡颗粒层厚度增加约25.5%(P<0.05),密度增加约27.8%(P<0.01)。在小黄卵泡颗粒层上,FSH降低了c-myc和类固醇激素合成急性调节蛋白(star)mRNA的表达水平(P<0.05),提高了细胞增殖抗原(pcna)和周期蛋白D2(ccnd2)mRNA的表达水平(P<0.05)。[结论]FSH能诱导c-myc在鸡颗粒细胞中的表达,推测c-myc与体外培养的鸡小黄卵泡颗粒细胞的终端分化有关。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张红琳  杨利国  王诚  
采集猪卵泡液 ,用 70 %饱和度硫酸铵溶液沉淀后 ,分别过SephadexG 2 0 0柱和SephadexG 10 0柱 ,最后用磁珠免疫亲和层析法进一步提纯 ,使抑制素纯度从 12 4 μg·mg-1升至 39 4 μg·mg-1。PAGE电泳分析证明 ,提纯物只出现一条相对分子质量为 32 0 0 0的带 ,SDS PAGE电泳分析发现有两条相对分子质量分别为 14 0 0 0~ 15 0 0 0和 170 0 0~ 180 0 0的带 ,即β、α亚基。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 杨晓岚  张敏红  冯京海  翟利利  姜礼文  
【目的】研究高温诱导蛋鸡氧化损伤及对卵泡发育的影响,探讨环境高温抑制蛋鸡卵泡发育、降低产蛋量的机制。【方法】试验分两部分进行:试验一,将180只27周龄的海兰褐蛋鸡随机分为3个处理组,分别饲养于人工环境控制舱内,3个处理组分别为常温组(23℃,饲喂基础日粮)、日循环高温组(28—35—28℃,饲喂基础日粮)和高温补充VE组(28—35—28℃,饲喂基础日粮+250 IU·kg-1 VE),试验期14 d;试验二,分离蛋鸡F1和F2卵泡颗粒层并制备颗粒细胞悬浮液,将颗粒细胞分别在39或44℃下培养。【结果】试验一结果显示,日循环高温显著抑制蛋鸡卵泡发育,表现为产蛋数量下降(P<0.05)、卵巢重...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 郭威  胡青  高宇  汤蓉  迟巍  李大鹏  
以购自武汉市白沙洲水产品批发市场的360尾黄鳝(Monopterus albus)为样本,测定了雌性、间性及雄性个体血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)、甲状腺素(T4)、三碘甲腺原氨酸(T3)、皮质醇以及血糖水平,并对其变化规律进行了阐述。结果显示:血清T3在不同性别的黄鳝中维持在同一水平,T4与T3的变化趋势一致;黄鳝从雌性过渡到间性时血清T显著下降,从间性过渡到雄性时则显著上升,而E2仅在黄鳝由间性过渡到雄性时才出现显著下降;雌性与间性黄鳝血清皮质醇处于同一水平,均显著高于雄性(P<0.05);血糖在不同性别的黄鳝中也维持在同一水平。结果表明:血清E2与T水平分别与黄鳝卵巢及精巢的发育保持一...
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